一、大肠癌不同部位扫描电镜观察及其临床意义（论文文献综述）
热孜完·吾甫尔[1]（2021）在《Ce6-PDT对结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路的影响》文中提出目的:在观察Ce6-PDT对人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路及微丝骨架影响的基础之上,进一步靶向干扰Rac1基因,探讨Ce6-PDT抑制人结肠癌SW620细胞迁移中Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin通路所发挥的信号转导作用,以期发现Ce6-PDT抑制结肠癌迁移的靶分子,提供Ce6-PDT抑制结肠癌转移的实验依据和理论基础。方法:1.MTT法检测Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞的存活率;2.采用划痕实验检测Ce6-PDT以及RNAi联合Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞的迁移能力;3.采用扫描电镜观察Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞伪足;4.采用免疫荧光和激光共聚焦技术观察Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞微丝骨架F-actin在细胞内分布、聚合情况;5.Western Blot检测Ce6-PDT以及RNAi联合Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白和微丝骨架蛋白F-actin的表达水平。结果:1.与对照组未经处理的人结肠癌SW620细胞相比,Ce6-PDT处理的细胞存活率降低（P<0.05）;2.与对照组未经处理的人结肠癌SW620细胞相比,Ce6-PDT处理的细胞迁移能力减弱（P<0.05）;3.与对照组未经处理的人结肠癌SW620细胞相比,Ce6-PDT处理的细胞伪足减少或消失;4.人结肠癌SW620细胞微丝骨架F-actin主要分布于细胞核周围,未经处理的细胞F-actin呈聚合状态,Ce6-PDT导致其解聚、分布混乱以及细胞核碎裂;同时,Ce6-PDT后微丝骨架蛋白F-actin表达量降低（P<0.05）;5.Ce6-PDT后,人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白Rac1和p-cofilin表达量降低（P<0.05）;6.RNAi和Ce6-PDT联合干扰后,人结肠癌SW620细胞迁移能力进一步减弱（P<0.05）;7.RNAi的联合干扰一定程度上影响Ce6-PDT对SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白表达的调控（P<0.05）。结论:1.Ce6-PDT抑制人结肠癌SW620细胞存活率和迁移能力,并导致细胞伪足减少或消失;2.Ce6-PDT导致结肠癌SW620细胞微丝骨架F-actin解聚、细胞核碎裂,并且抑制微丝骨架蛋白F-actin的表达;3.Ce6-PDT一定程度上下调人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路;4.结肠癌SW620细胞中,Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路可能参与Ce6-PDT抑制细胞迁移的过程。
秦路峰[2]（2020）在《壳聚糖基纳米材料在膀胱癌靶向治疗中的应用研究》文中研究表明目的:壳聚糖（chitosan,CS）纳米材料因其具有优良的生物学性能成为肿瘤靶向治疗的常用的递送载体。CD44是透明质酸（hyaluronic acid,HA）的受体,在膀胱癌T24细胞中高表达,制备HA修饰的新型壳聚糖纳米材料包载cy3标记的siRNA（sCSNPsHA）,以Bcl-2致癌基因为靶标,转染膀胱癌T24细胞,通过一系列实验证明sCSNPsHA对膀胱癌T24细胞的抑制作用,评价壳聚糖纳米材料作为siRNA递送载体的可行性,为晚期膀胱癌的治疗提供新的思路。方法:利用壳聚糖（CS）和三磷酸纳（sodium tripolyphosphate,TPP）通过离子交联法制备壳聚糖纳米材料（chitosan nanoparticles,CSNPs）;然后用CSNPs包载以Bcl-2致癌基因为靶标的cy3标记的siRNA制备成s CSNPs,再将CSNPs及sCSNPs与透明质酸（hyaluronic acid,HA）结合后制备CSNPs-HA及sCSNPs-HA。用激光粒度分析仪连续6天测量CSNPs、CSNPs-HA、sCSNPs、sCSNPs-HA四种材料的平均粒径、分散度（PDI）及Zeta电位以检测其稳定性;并用扫描电镜（scanning electron microscopy,SEM）来观察制备的壳聚糖纳米材料纳米粒表面结构;用分光光度法评估CSNPs及CSNPs-HA对siRNA的包载能力;通过改变CS与TPP的比例、制备温度、超声的频率和时间等条件不断优化壳聚糖纳米材料的制备方法。MTT实验评估壳聚糖纳米材料CSNPs及CSNPs-HA材料本身细胞毒性;用CSNPs及CSNPsHA包载cy3标记的siRNA制备成sCSNPs及sCSNPs-HA转染膀胱癌T24细胞,荧光显微镜观察转染效果、分析荧光数据;用MTT实验及划痕实验分别检测不同组膀胱癌T24细胞的增殖和迁移能力。qRT-PCR法和Western Blot法检测膀胱癌T24细胞中Bcl-2的mRNA水平和相关调节蛋白水平表达的差异,评价包裹siRNA的壳聚糖纳米材料sCSNPs及sCSNPs-HA干扰Bcl-2基因表达的效果。结果:采用最优制备方案得到的壳聚糖纳米材料平均粒径为130nm,分散度小于1,具有较好的分散性;连续6天测得的参数变化不大,表明其稳定性较好。纳米粒在扫描电镜下呈现典型的球形,形态圆润,分散性较好。分光光度法检测壳聚糖纳米材料（CSNPs）及HA修饰的壳聚糖纳米材料（CSNPs-HA）对siRNA有较强的包载能力;MTT实验表明壳聚糖纳米材料CSNPs及CSNPs-HA细胞毒性符合生物医用材料的标准;通过荧光图像、荧光数据证明制备的壳聚糖纳米材料的转染效果优于公认的转染试剂Hiperfect;划痕实验表明sCSNPs-HA组可以明显降低膀胱癌T24细胞的迁移能力;细胞增殖实验表明sCSNPs-HA组可以明显抑制膀胱癌T24细胞增殖能力;qRT-PCR、Western Blot结果表明sCSNPs-HA组对Bcl-2基因在mRNA及蛋白水平表达有明显抑制作用。结论:本研究成功构建了包载cy3标记的siRNA的HA修饰的壳聚糖纳米材料（sCSNPs-HA）,采用优化后的离子交联法制备的纳米材料的纳米粒粒径、形态较为理想,分散性好。CSNPs及CSNPs-HA符合生物医用材料的标准,转染效果优于公认的转染试剂Hiperfect,MTT实验及划痕实验证明包载可以沉默Bcl-2基因的siRNA的HA修饰的壳聚糖纳米材料转染膀胱癌T24细胞可以明显降低T24细胞的增殖能力和迁移能力;qRT-PCR、Western Blot表明sCSNPs-HA组对Bcl-2基因在mRNA及蛋白水平表达有明显抑制作用,进而促进肿瘤细胞凋亡,为膀胱癌基因靶向治疗提供新的理论。
郭瑞[3]（2019）在《基于喉癌大切片的淋巴管不同染色方法的比较及重建》文中研究说明目的:比较免疫组织化学、酶组织化学和苏木精-伊红染色3种方法对喉癌大切片中淋巴管的标记与显示,并在此基础上将较可靠方法所得的阳性染色结构进行三维重建,以验证相关染色方法的准确性。方法:收集喉癌全喉切除术后标本3例,参照改良川本法制作冷冻全喉大切片90张,分别采用免疫组织化学法（淋巴管内皮细胞特异性标记物D2-40）、酶组织化学法（5-核苷酸酶5-Nase）、苏木精-伊红染色方法（HE）进行染色,比较不同方法对喉癌大切片中淋巴管的染色结果,然后在此基础上将染色较可靠的切片图像通过配准、分割后进行三维重建。结果:HE和D2-40免疫组化染色背景较清晰,酶染色背景欠干净,非特异染色较多。经图像质量筛查,剩余21组HE染色切片105个明确的血管结构中,56个（53.3%）5-Nase标记阴性,102个（97.1%）D2-40标记阴性,少量管腔（2.9%）呈部分阳性。D2-40染色对血管的识别率明显高于5-Nase（P<0.001）;105个不能明确区分血管或淋巴管的管腔样结构,95个（90.5%）在D2-40染色中获得阳性结果,89个（84.8%）在5-Nase组中呈阳性,两阳性率间差异没有统计学意义（P=0.209）,但在5-Nase染色切片中部分腺体组织同时被染;此外,在5-Nase和D2-40染色切片中还可观察到散在呈点状或簇状分布的阳性细胞,而在HE染色中无法识别这些细胞或结构。将D2-40染色切片整体配准后选择感兴趣区域进行三维重建,可见D2-40染色阳性的管状结构呈柱状分布,而D2-40染色阳性的点状或颗粒状结构呈簇状或团状分布。结论:通过改良川本法的切片及染色技术,克服了切片由于尺度加大所产生的各种不利影响,均获得质量较高的染色切片;结合D2-40对切片图像的二维染色及染色阳性结构的三维重建结果,提示D2-40对于喉癌中管腔样淋巴管的标记具有较高的特异性与准确性,而对于非管腔样淋巴管的标记准确性仍需进一步验证。
计玉容[4]（2019）在《大容量肺灌洗对肺功能的影响及其相关因子的变化》文中指出目的本研究旨在探究大容量肺灌洗对肺功能的影响及其相关因子的变化,为该技术减轻机体炎症反应,改善肺功能提供依据。方法以2018年3月至2018年12月就诊于应急总医院的职业性尘肺病患者为研究对象,对其行大容量全肺灌洗。用肺功能仪测量入选者灌洗前、灌洗后1个月和灌洗后3个月的肺功能数值,包括最大通气量（MVV）、用力肺活量（FVC）、第一秒肺活量（FEV1）、第三秒肺活量（FEV3）、一秒率（FEV1/FVC）、三秒率（FEV3/FVC）、最大呼气中期流量（MMEF）、峰流速（PEF）、75%呼气流速（MEF75）、50%呼气流速（MEF50）、25%呼气流速（MEF25）、残气/肺总量（RV/TLC）、功能残气量（FRC）、肺泡通气量（VA）和CO弥散量(DLCO)。收集患者灌洗前、灌洗后1个月和灌洗后3个月的静脉血。将收集到的静脉血离心后取上清液,用ELISA法测量血清中IL-1β、TNF-α、IL-10、ROS、MDA和SOD的含量。结果1一般情况显示,本研究纳入实验人数为46人,身高（167.61±6.31）cm;体重（70.41±8.19）kg;年龄（47.83±6.02）岁;接尘工龄（14.93±7.64）岁。其中37例煤工尘肺患者,9例矽肺患者,包括壹期16例,贰期26例,叁期4例。2灌洗前后肺功能指标VA%和RV/TLC%差异有统计学意义（P<0.05）,灌洗后3个月VA%数值高于灌洗前（P<0.05）,RV/TLC%值灌洗后3个月低于灌洗前（P<0.05）,即肺灌洗后可增加肺内有效通气量,减少残气量与肺总量的比值,对肺功能的损伤程度和通气功能指标异常率经卡方检验差异无统计学意义（P>0.05）,从数值变化中可以看出肺灌洗对肺功能的损伤程度和通气功能情况有改善趋势。3灌洗前后血清中IL-1β、TNF-α、MDA和SOD组间差异有统计学意义（P<0.05）;灌洗后1个月和灌洗后3个月的IL-1β与灌洗前比较,血清中含量均下降（P<0.05）;灌洗后3个月TNF-α值低于灌洗前（P<0.05）;灌洗后3个月MDA低于灌洗后1个月（P<0.05）,灌洗后3个月SOD值高于灌洗前和灌洗后1个月（P<0.05）,灌洗前后IL-1β和TNF-α的异常率结果有统计学意义（P<0.05）,与灌洗前后IL-1β和TNF-α值有差异相一致。4探究灌洗前后肺功能的改变与血清中细胞因子的关系,灌洗前VA%值与IL-1β为负相关（r=-0.343,P<0.05）,VA%值与TNF-α为负相关（r=-0.366,P<0.05）,RV/TLC%与MDA为正相关（r=0.440,P<0.05）;灌洗后1个月VA%与IL-1β呈负相关（r=-0.345,P<0.05）;对灌洗后3个月VA%和RV/TLC%与血清中细胞因子的研究结果显示肺功能指标与各因子无相关关系（P>0.05）,灌洗后TNF-α、IL-1β和MDA值下降,VA%值上升,RV/TLC%值下降。结论1大容量全肺灌洗对尘肺患者的肺功能指标有改善作用。2肺灌洗后患者相关炎性因子有减低趋势,提示该技术可以减轻机体炎性水平,改善肺功能。图3幅;表14个;参160篇。
钱飞[5]（2018）在《HMGB1-RAGE炎症信号通路促进直肠癌进展机制研究》文中指出目的:近年来,越来越多的证据显示,HMGB-1、RAGE不仅与炎症性疾病有关,也和多种肿瘤的发病关系密切。多项研究表明,它们在许多肿瘤组织中的表达明显升高,可以增强肿瘤的侵袭力,而且可能和包括K-RAS通路在内的多条肿瘤信号通路有关,但是它们在直肠癌中的作用及具体机制尚未明确。故本研究将在直肠癌细胞和直肠癌组织中,对HMGB-1、RAGE的表达变化以及HMGB-1、RAGE在肿瘤进展过程中发挥的作用和机制进行研究,为寻找直肠癌的治疗靶点提供科学依据。方法:1.体外培养HCT116和SW480直肠癌细胞,先后添加HMGB-1及RAS抑制剂反式法尼基硫代水杨酸（FTS）,然后分别应用CCK-8法检测直肠癌细胞的增殖情况。2.体外培养HCT116直肠癌细胞,观察组添加HMGB-1进行处理,提取细胞蛋白,以K-RAS抗体进行免疫共沉淀,然后免疫共沉淀洗脱,最后加入RAGE、K-RAS抗体,并分别以二抗标志,行Western blot蛋白定量检测,分析RAGE蛋白和K-RAS蛋白的表达情况、相互作用及变化。3.体外培养HCT116直肠癌细胞,观察组添加HMGB-1进行处理,然后加入RAGE、K-RAS抗体,并分别以二抗标志,再行免疫荧光双标检测分析RAGE蛋白和K-RAS蛋白的表达情况、相互作用及变化。4.体外培养HCT116和SW480直肠癌细胞并分成6组,A组:HCT116细胞;B组:HCT116 细胞+HMGB1（100ng/ml）处理组;C 组:HCT116 细胞+HMGB1（100ng/ml）+RAS抑制剂处理组;D组:SW480细胞;E组:SW480细胞+HMGB1（100ng/ml）处理组;F 组:SW480 细胞+HMGB1（100ng/ml）+RAS 抑制剂处理组;应用RT-PCR方法检测各组细胞中目的基因YAP1的表达情况。5.在 HCT116 细胞、HCT116+HMGB1 处理组细胞,HCT116+HMGB1+RAS 抑制剂处理组细胞中,应用Western blot方法,检测目的蛋白YAP1的表达水平。6.选取南通大学附属医院手术切除的直肠癌及癌旁新鲜标本共8对,所有患者术前均未接受化疗、放疗且无其它炎性、肿瘤性疾病。应用Western blot免疫印迹法检测其中RAGE蛋白和YAP1蛋白的表达情况。7.选取南通大学附属医院手术切除后制成石蜡切片的直肠癌标本共66例,所有患者术前均未接受化疗、放疗且无其它炎性、肿瘤性疾病。应用免疫组化法检测其中RAGE蛋白和YAP1蛋白的表达情况,免疫组化结果以双盲法进行评判,检测结果让2位高年资的病理医师分别进行研读。并用统计学方法分析检测结果和临床病理指标之间的关系。8.选取直肠癌组织,提取组织蛋白,以K-RAS抗体进行免疫共沉淀,然后免疫共沉淀洗脱,最后加入RAGE、K-RAS抗体,并分别以二抗标志,行Western blot蛋白定量检测,分析RAGE蛋白和K-RAS蛋白的表达情况及相互作用。结果:1.HMGB1可显着增强HCT116和SW480直肠癌细胞的增殖,而RAS抑制剂FTS联合治疗后可减弱HMGB1介导的直肠癌细胞增殖。2.用K-RAS抗体在分组后的直肠癌细胞中分别进行免疫共沉淀检测,实验结果显示:A组（HCT116细胞组）和B组（HCT116细胞+HMGB1组）中RAGE蛋白与K-RAS蛋白存在相互关联、相互作用,并且B组中作用相比于A组中作用更明显。3.免疫荧光双标检测结果显示:A组（HCT116细胞组）和B组（HCT116细胞+HMGB1组）中RAGE蛋白与K-RAS蛋白部分共定位,相比于A组,加入HMGB1处理后的B组,K-RAS蛋白和RAGE蛋白的表达均显着增加。4.在HCT166细胞和SW480细胞中,RT-PCR检测结果显示:加入HMGB1处理后,目的基因YAP1的表达水平均显着增加,当在此基础上加入RAS抑制剂FTS后,目的基因表达水平显着降低,但是仍高于各自的对照细胞组。5.在HCT166细胞中,Western blot检测结果显示:加入HMGB1处理后,目的蛋白YAP1的表达水平显着增加,当在此基础上加入RAS抑制剂FTS后,目的蛋白的表达水平显着降低,但是仍高于原来的对照细胞组。6.直肠癌组织和癌旁组织的Western blot检测结果显示:RAGE和YAP1两种蛋白在癌组织中的表达均高于在各自样本癌旁组织中的表达。7.免疫组化显示直肠癌标本中的RAGE蛋白和YAP1蛋白均为高表达。RAGE的高表达与晚期组织学分级、淋巴结转移和TNM分期有关（P≤0.007）,YAP1的高表达亦与晚期组织学分级、淋巴结转移和TNM分期有关（P≤0.035）。8.在直肠癌组织中用K-RAS的抗体进行免疫共沉淀检测,实验结果显示:直肠癌组织中RAGE蛋白与K-RAS蛋白均为高表达,且两种蛋白之间存在相互关联、相互作用。结论:1.HMGB1-RAGE信号可以促进直肠癌细胞的增殖,在直肠癌的进展过程中,RAGE、K-RAS存在相互作用,添加RAS抑制剂可减弱HMGB1-RAGE信号介导的直肠癌细胞增殖。2.直肠癌细胞中,HMGB1可以增强YAP1的表达,当在此基础上加入RAS抑制剂后,YAP1的表达水平显着降低;RAGE、YAP1在直肠癌组织中高表达,且均与肿瘤的侵袭力有关。3.由于慢性炎症上调HMGB1-RAGE的表达,促进RAGE的活化并募集K-RAS,激活RAS下游的YAP1蛋白,进而促进直肠癌的进展。
龚泉[6]（2018）在《TEM8在NSCLC中的表达及其作用机制的研究》文中进行了进一步梳理[目的]探讨TEM8在NSCLC中的表达、生物学功能及分子作用机制。[方法]1.TEM8在NSCLC患者中的表达及其临床意义研究收集67例NSCLC患者手术切除的肺癌组织石蜡标本,应用免疫组织化学染色方法比较TEM8在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达,分析TEM8表达与患者临床特征及预后的关系。免疫组织化学染色法对67例NSCLC患者肿瘤组织切片进行CD34标记并进行微血管计数,初步探讨TEM8表达与肿瘤血管生成的关系。收集21例NSCLC患者手术切除的肺癌组织新鲜标本,分别应用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法比较患者癌组织和癌旁组织中TEM8表达情况。单因素生存分析NSCLC患者生存期与TEM8蛋白表达水平及临床病理特征的关系,Cox回归模型分析TEM8表达与NSCLC患者预后的影响因素。2.TEM8与NSCLC细胞生物学行为的关系及机制的体外研究应用慢病毒表达载体构建、筛选稳定沉默和过表达TEM8的宣威肺腺癌XWLC-05细胞株。MTT法检测沉默和过表达TEM8后肺癌细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化,扫描电镜观察细胞形态变化,划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,qRT-PCR和Western blot检测ERK、BCL-2及cyclinD1等分子表达,初步探讨TEM8的体外分子作用机制。3.TEM8对XWLC-05肺癌裸鼠移植瘤模型影响及机制的体内研究将稳定沉默TEM8的XWLC-05细胞接种裸鼠皮下,观察裸鼠一般情况、成瘤情况及肿瘤生长情况。成功接种后的第28天处死裸鼠,测量离体肿瘤的体积和重量,计算肿瘤抑制率。离体肿瘤组织HE、免疫组化和免疫荧光检测TEM8和CD34表达,通过微血管计数观察TEM8表达与NSCLC肿瘤血管生成的关系。qRT-PCR和Western blot检测ERK、BCL-2和cyclinD1等分子表达,初步探讨TEM8的体内分子作用机制。[结果]1..TEM8在NSCLC患者中的表达及其临床意义研究67例NSCLC患者肿瘤组织免疫组化染色提示,TEM8在癌组织中的阳性表达率为52.23%（35/67）,在癌旁组织中的阳性表达率为17.91%（12/67）,两者差异有统计学意义（P<0.05）。21例NSCLC患者肿瘤组织qRT-PCR和Western blot实验证实:在mRNA和蛋白水平,TEM8在癌组织中的表达显着高于癌旁组织,两者之间的差异有统计学意义（P<0.01）。TEM8表达阳性的NSCLC患者肿瘤组织微血管密度显着增大,与TEM8表达阴性患者的差异有统计学意义（P<0.05）,提示TEM8表达可促进NSCLC患者肿瘤血管生成。TEM8表达与NSCLC患者肿瘤分化程度、临床分期、术后发生胸膜侵犯、术后出现远处转移显着相关（P<0.05）。单因素生存分析结果显示,NSCLC患者的生存期与TEM8蛋白表达水平、临床分期、是否有远处转移相关（P<0.05）。Cox回归模型分析结果提示,TEM8蛋白表达水平、临床分期、是否有远处转移是NSCLC患者预后的影响因素（P<0.05）。2.TEM8与NSCLC细胞生物学行为的关系及机制的体外研究沉默TEM8表达后,与空白对照组及阴性对照组相比,MTT检测结果提示细胞增殖能力受到显着抑制（P<0.01）;流式细胞凋亡检测结果提示细胞凋亡率明显上升,达（24.17±2.16）%（P<0.01）;扫描电镜观察显示XWLC-05细胞呈现凋亡的形态学改变;流式细胞周期分析结果提示细胞周期被阻滞在G1期（P<0.05）,从而抑制细胞增殖活性;划痕实验结果提示细胞迁移能力受到显着抑制（P<0.01）;Transwell实验结果提示细胞侵袭能力受到显着抑制（P<0.01）;qRT-PCR 和 Western blot 检测结果提示:肺癌细胞 ERK（或 p-ERK1/2）表达显着下调（P<0.01）,BCL-2、cyclinD1的表达亦显着降低（P<0.01）。过表达TEM8后,与空白对照组及阴性对照组相比,MTT检测结果提示细胞增殖能力显着增强（P<0.01）;流式细胞凋亡检测结果提示细胞凋亡率未见明显变化（P>0.05）;流式细胞周期分析结果提示细胞周期未被阻滞在G1期（P>0.05）,而是更多地进入了 G2期,提示肺癌细胞获得了更强的增殖活性（P<0.05）;划痕实验结果提示细胞迁移能力显着增强（P<0.01）;Transwell实验结果提示细胞侵袭能力显着增强（P<0.01）;qRT-PCR和Western blot检测结果提示:肺癌细胞ERK（或p-ERK1/2）表达显着上调（P<0.01）,BCL-2、cyclinD1的表达亦显着增加（P<0.01）。3.TEM8对XWLC-05肺癌裸鼠移植瘤模型影响及机制的体内研究最早于接种后第7天出现肉眼可见的移植瘤,各组裸小鼠均成功成瘤,成瘤率100%。至实验结束时,裸鼠全部存活。实验观察期间,各组小鼠的体重均有不同程度的增长,但组间比较无显着差异（P>0.05）。与空白对照组和阴性对照组相比,沉默TEM8表达后,实验组裸鼠皮下移植瘤的生长受到明显抑制,肿瘤抑制率为57.82%,其差异有统计学意义（P<0.05）。实验组裸鼠离体肿瘤重量为（0.29±0.04）g,显着低于阴性对照组[（0.58±0.08）g,P<0.01]和空白对照组[（0.63±0.17）g,P<0.01],空白对照组和阴性对照组肿瘤重量的差异无统计学意义（P>0.05）。实验组裸鼠离体肿瘤体积（436.64±102.39）mm3明显小于阴性对照组[（944.18±178.52）mm3,P<0.01]和空白对照组[（988.68±128.43）mm3,P<0.01],空白对照组与阴性对照组肿瘤体积差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学及免疫荧光染色显示:TEM8蛋白主要表达于肿瘤细胞膜,实验组TEM8的表达显着低于阴性对照组和空白对照组（P<0.05）。CD34主要表达于荷瘤组织中血管内膜,实验组CD34表达显着低于阴性对照组和空白对照组,微血管密度明显低于对照组（P<0.05）,提示TEM8表达可促进肺癌荷瘤小鼠肿瘤血管生成。qRT-PCR和Western blot检测结果提示:沉默TEM8表达后,与对照组相比,肺癌细胞ERK（或p-ERK1/2）表达显着下调（P<0.01）,BCL-2、cyclinD1 的表达亦显着降低（P<0.01）。[结论]1.TEM8在NSCLC患者癌组织中存在转录和翻译水平的异常表达。2.癌组织中TEM8的表达水平结合临床分期、是否有远处转移等,可作为NSCLC患者病情评估和预后判断的参考指标,具有一定的临床指导意义。3.TEM8可能通过ERK/BCL-2信号通路调控细胞周期蛋白cyclinD1和抗凋亡蛋白BCL-2表达水平,进而调节NSCLC细胞的增殖和凋亡。4.TEM8与NSCLC肿瘤血管生成有关,可能是NSCLC抗肿瘤血管生成治疗的靶点。
李芳[7]（2018）在《胆汁酸在诱导Barrett’s食管肠上皮化生作用中的机制及临床意义》文中研究指明背景Barrett’s食管（Barrett’s esophagus,BE）是胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease,GERD）最严重的并发症,同时也是食管腺癌最重要的癌前病变。在西方国家,BE的发病率呈逐年上升趋势。目前关于BE的发生机制尚未阐明。过去认为,长期酸暴露可以引起BE,但也有学者提出胆汁酸在BE发生发展中的作用更为重要。目的本实验拟研究不同浓度胆汁酸对人食管上皮细胞（BAR-T）细胞形态、超微结构的影响,探讨BE化生的机制及其临床意义。方法（1）购买人原代食管BAR-T细胞,在我院中心实验室用DMEM含血清的细胞培养液进行细胞培养,并进行传代、冻存、复苏及化学刺激。（2）挑选生长良好的细胞,每天分别用250umol/L、400umol/L、500umol/L胆汁酸刺激3次,连续7天,并在倒置相差显微镜下观察细胞形态改变,在透射电镜下观察超微细胞结构改变。结果（1）对照组细胞组在显微镜下可见正常细胞形态,当细胞生长至7天出现多数细胞接触抑制、细胞凋亡;实验组细胞生长时间较对照组长,有正常接触抑制,凋亡少见。（2）在透射电镜下:对照组可见正常细胞微结构,实验组可见线粒体肿胀变形、核仁边集、双核仁及自噬小体形成。结论（1）BAR-T细胞在胆汁酸刺激下出现形态、结构变化。（2）不同浓度胆汁酸对BE细胞系作用不同,随着浓度增加,细胞出现异型增生趋势。
甘露,陈燕,居文惠[8]（2018）在《子宫内膜癌中VEGF和MMP-9蛋白的表达及临床意义》文中提出目的探讨VEGF和MMP-9蛋白在子宫内膜癌患者中的表达及临床意义。方法取2014年1月至2017年2月取子宫内膜癌患者100例,设为观察组。患者均行手术治疗,围术期取病灶组织与癌旁组织。选择同期进行手术治疗的子宫良性疾病患者100例,设为对照组。患者入院后完善相关检查,将围术期切除的病灶组织制备切片,采用免疫组织化学法检测不同组织VEGF和MMP-9蛋白水平,对子宫内膜癌中VEGF和MMP-9蛋白与临床病理进行单因素及多因素Logistic回归分析。结果观察组癌旁组织与对照组中VEGF和MMP-9蛋白阳性率比较无统计学意义（P>0.05）;子宫内膜癌组织中VEGF和MMP-9蛋白阳性率,高于癌旁组织（P<0.05）;单因素结果显示:子宫内膜癌组织VEGF和MMP-9蛋白阳性率与年龄、肿瘤大小及分化程度差异无统计学意义（P>0.05）;子宫内膜癌组织VEGF和MMP-9蛋白阳性率与肿瘤侵袭深度、淋巴结转移、病理分期关系密切（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果表明:子宫内膜癌组织VEGF和MMP-9蛋白阳性率多与子宫内膜癌组织浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有关（P<0.05）。结论子宫内膜癌患者中VEGF和MMP-9蛋白呈高表达,且与组织浸润、淋巴结转移及临床分期有关,能直接参与子宫内膜癌的发生、发展。
朱曦龄,黎功[9]（2017）在《FMNL2基因对大肠癌细胞SW620增殖、侵袭及转移的影响》文中研究指明目的探讨FMNL2基因对大肠癌细胞SW620增殖、侵袭及转移的影响。方法将大肠癌SW620细胞随机分为三组,其中稳定转染FMNL2-shRNA质粒的细胞作为shFMNL2组,稳定转染Pgenesil-1质粒的细胞作为对照组,单纯SW620细胞作为空白组。扫描电镜下观察三组细胞超微结构;Real-time PCR法检测FMNL2 mRNA表达,Western blotting法检测FMNL2蛋白表达,MTT法检测细胞增殖活性（光密度值）,平板克隆形成试验检测细胞克隆数,Transwell小室及Boyden小室试验检测细胞运动及侵袭能力。结果透射电镜下,空白组细胞均具有癌细胞的一般特征;对照组细胞内无退变的细胞器,细胞质基质密度均匀,细胞表面可见许多微绒毛和伪足;shFMNL2组细胞质内出现大小不等空泡及自噬体,细胞质局部粗面消失,细胞膜及核膜基本完整,细胞表面绒毛大量减少,未发现伪足。shFMNL2组FMNL2 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组及空白组（P均<0.05）。培养第1、2、3、4、5、6、7天时shFMNL2组细胞光密度值均低于对照组及空白组（P均<0.05）。shFMNL2组细胞克隆数、Transwell小室及Boyden小室穿膜细胞数均较对照组及空白组减少（P均<0.05）。结论抑制FMNL2基因表达导致大肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力下降;FMNL2基因可能是大肠癌侵袭、转移的相关基因之一,其可能作为大肠癌潜在的治疗靶点。
王舒艺[10]（2016）在《适配子介导的纳米基底捕获肝癌循环肿瘤细胞及其临床应用研究》文中研究指明循环肿瘤细胞（CTCs）目前被认为是恶性肿瘤复发转移的重要途径之一。因此,检测捕获病人CTCs具有重要的临床价值和实际应用意义。但是,目前由于循环肿瘤细胞在外周血中微乎其微,这对于CTCs的临床检测和应用是一个严峻的考验。肝癌（hepatoce llular cac ino ma, HCC）作为世界范围内常见的恶性肿瘤,死亡率居世界第三位,而复发和转移是导致死亡的最常见原因。肝癌细胞可以在肿瘤发生的早期进入外周循环而形成肝癌循环肿瘤细胞,因此检测肝癌循环肿瘤细胞具有重要的临床价值和应用意义。为了获的一个简单易行、且效率良好肝癌循环肿瘤细胞捕获方法,我们结合适配子（sLex-AP）扩展了具有良好生物相容性、透明的纳米膜芯片（CTC-BioTChip）的应用范围,并利用此平台,成功实现了肝癌细胞的捕获和鉴定,捕获效率可达61.6%以上。随后,我们为验证次平台的临床实用性,将此平台用于检测肝癌患者的循环血肿瘤细胞,我们共检测了42例外周血样本（2毫升）,其中检测到肝癌循环肿瘤细胞的有25例（59.5%）,肝癌循环肿瘤细胞平均检出个数为2±2。通过统计分析,我们发现,肝癌循环肿瘤细胞的个数和阳性率与肿瘤的大小、门静脉留栓的有无、TNM分期的高低正相关。因此,1)我们的CTC-BioTChp能够通过修饰sLex-AP而实现肝癌循环肿瘤细胞的捕获,CTC-BioTChip的可控制、易拓展等特性值得我们进一步开发；2)通过临床应用,肝癌循环肿瘤细胞的成功捕获以及后续统计学分析结果提示,CTC-BioTChip能够实现临床肝癌循环肿瘤细胞的捕获鉴定,具有良好的临床应用前景,可以为肝癌患者的预后判断及个体化治疗更多的信息。
二、大肠癌不同部位扫描电镜观察及其临床意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大肠癌不同部位扫描电镜观察及其临床意义（论文提纲范文）
（1）Ce6-PDT对结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验内容与方法 |
| 3 质量控制 |
| 4 统计学方法 |
| 5 技术路线 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 光动力治疗抑制肿瘤细胞迁移及其机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（2）壳聚糖基纳米材料在膀胱癌靶向治疗中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验仪器与试剂 |
| 1.1 实验仪器 |
| 1.2 实验材料和试剂 |
| 1.3 实验细胞 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.1.1 试剂准备 |
| 2.1.2 细胞复苏 |
| 2.1.3 细胞传代 |
| 2.1.4 细胞冻存 |
| 2.2 壳聚糖纳米材料的制备及表征 |
| 2.3 壳聚糖纳米材料制备的优化设计 |
| 2.3.1 CS与TPP质量比对纳米材料参数的影响 |
| 2.3.2 超声时间对纳米材料参数的影响 |
| 2.3.3 超声频率对纳米材料参数的影响 |
| 2.3.4 常温与冰上制备对纳米材料参数的影响 |
| 2.4 测定制备的壳聚糖纳米材料包载siRNA的能力 |
| 2.5 评价制备的壳聚糖纳米材料的稳定性 |
| 2.6 制备的壳聚糖纳米材料细胞毒性的检测 |
| 2.7 包载siRNA的壳聚糖纳米材料对T24 细胞转染能力的评估 |
| 2.8 细胞划痕实验检测不同组别膀胱癌T24细胞划痕愈合率 |
| 2.9 MTT法检测壳聚糖纳米材料包载siRNA抑制膀胱癌T24 细胞增殖的能力 |
| 2.10 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同组别T24 细胞Bcl-2m RNA的表达水平 |
| 2.10.1 细胞总RNA的提取 |
| 2.10.2 逆转录过程 |
| 2.11 Western Blot实验分析不同实验组中Bcl-2 基因的表达水平 |
| 2.11.1 总蛋白提取及处理 |
| 2.11.2 Western Blot实验测蛋白表达量 |
| 2.12 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 壳聚糖纳米材料的表征结果 |
| 1.1 壳聚糖纳米材料制备及优化 |
| 1.2 壳聚糖纳米材料的表面结构及包载能力 |
| 1.3 壳聚糖纳米材料的稳定性 |
| 2 壳聚糖纳米材料的细胞毒性实验 |
| 3 包载siRNA的壳聚糖纳米材料对T24 细胞转染能力的评估 |
| 4 包载siRNA的壳聚糖纳米材料对膀胱癌T24 细胞迁移能力和增殖能力的影响 |
| 4.1 包载siRNA的壳聚糖纳米材料对膀胱癌T24 细胞迁移能力的影响 |
| 4.2 包载siRNA的壳聚糖纳米材料对膀胱癌T24 细胞增殖能力的影响 |
| 5 实时荧光定量PCR分析不同实验组Bcl-2在mRNA表达水平的差异 |
| 6 Western Blot实验分析不同实验组Bcl-2 在蛋白表达水平差异 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（3）基于喉癌大切片的淋巴管不同染色方法的比较及重建（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 标本来源 |
| 1.2 标本固定与切片 |
| 1.3 切片染色 |
| 1.4 切片观察 |
| 1.5 切片三维重建 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 HE、5-Nase、D2-40染色的大体结果 |
| 2.2 HE、5-Nase、D2-40对血管的识别 |
| 2.3 HE、5-Nase、D2-40对淋巴管的识别 |
| 2.4 HE、5-Nase、D2-40对腺体组织和点状结构的识别 |
| 2.5 感兴趣区域三维重建 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（4）大容量肺灌洗对肺功能的影响及其相关因子的变化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 临床研究 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.1.1 尘肺诊断标准 |
| 1.1.2 入选标准 |
| 1.1.3 排除标准 |
| 1.1.4 伦理审查 |
| 1.1.5 手术方法 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.2.1 主要实验用品和仪器设备 |
| 1.2.2 肺功能指标判定 |
| 1.2.3 实验方法 |
| 1.2.4 样本量计算依据及随机抽取方案 |
| 1.2.5 统计学方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 患者一般情况 |
| 1.3.2 尘肺患者肺功能情况 |
| 1.3.3 尘肺患者相关因子情况 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 参考文献 |
| 第2章 综述 大肠癌的病因及大肠癌患者围手术期 VTE 的研究进展 |
| 2.1 职业性尘肺病相关概念 |
| 2.2 大容量全肺灌洗的手术过程 |
| 2.2.1 研究发展 |
| 2.2.2 手术过程 |
| 2.3 尘肺病的发病机制及分类 |
| 2.3.1 机械损伤 |
| 2.3.2 免疫反应 |
| 2.3.3 肺泡巨噬细胞反应和细胞因子的释放 |
| 2.3.4 氧化应激反应与自由基 |
| 2.3.5 肺泡上皮细胞反应与纤维化的形成 |
| 2.4 药物治疗对灌洗液的影响 |
| 2.5 职业性尘肺病的治疗 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 附录 A应急总医院侵入性检查/治疗知情同意书 |
| 致谢 |
| 导师简介1 |
| 导师简介2 |
| 作者简介 |
| 学位论文数据集 |
（5）HMGB1-RAGE炎症信号通路促进直肠癌进展机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 课题来源、研究目的和意义 |
| 1.2 国内外研究概况 |
| 1.3 论文的主要研究内容 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 第三章 小结 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 本研究所获的基金资助 |
| 攻读博士学位期间公开发表的论文及参编着作 |
| 致谢 |
（6）TEM8在NSCLC中的表达及其作用机制的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 全文中文摘要 |
| 全文英文摘要 |
| 研究背景和立题依据 |
| 参考文献 |
| 第一部分: TEM8在NSCLC患者中的表达及其临床意义研究 |
| 前言 |
| 技术路线 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 拟开展的后期研宄 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分: TEM8与NSCLC细胞生物学行为的关系及机制的体外研究 |
| 前言 |
| 技术路线 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 拟开展的后期研宄 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分: TEM8对XWLC-05肺癌裸鼠移植瘤模型影响及机制的体内研究 |
| 前言 |
| 技术路线 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 拟开展的后期研究 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 研究的创新性及特色 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（7）胆汁酸在诱导Barrett’s食管肠上皮化生作用中的机制及临床意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要符号表 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 观察 |
| 2.3.1 直接观察 |
| 2.3.2 透射电镜下观察 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 显微镜下直接观察 |
| 3.2 透射电子显微镜观察 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 创新与不足 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
（8）子宫内膜癌中VEGF和MMP-9蛋白的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 纳入与排除标准 |
| 1.3 主要仪器与试剂 |
| 1.4 检测方法 |
| 1.5 判定方法 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 子宫内膜癌组织与远癌子宫黏膜组织VEGF和MMP-9蛋白阳性率比较 |
| 2.2 子宫内膜癌组织VEGF和MMP-9蛋白阳性率与临床病理资料相关性 |
| 2.3 子宫内膜癌组织VEGF和MMP-9蛋白阳性率影响多因素Logistic回归分析 |
| 3 讨论 |
（9）FMNL2基因对大肠癌细胞SW620增殖、侵袭及转移的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 细胞转染及克隆筛选 |
| 1.2.2 细胞超微结构观察 |
| 1.2.3 FMNL2 mRNA表达检测 |
| 1.2.4 FMNL2蛋白表达检测 |
| 1.2.5 细胞增殖活性检测 |
| 1.2.6 细胞克隆数检测 |
| 1.2.7 细胞迁移及侵袭能力检测 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 三组细胞超微结构比较 |
| 2.2 三组细胞FMNL2 mRNA和蛋白表达比较 |
| 2.3 三组细胞增殖活性比较 |
| 2.4 三组细胞克隆数比较 |
| 2.5 三组细胞运动及侵袭能力比较 |
| 3 讨论 |
（10）适配子介导的纳米基底捕获肝癌循环肿瘤细胞及其临床应用研究（论文提纲范文）
| 论文创新 |
| 论文中使用到的缩写 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 适配子介导的CTCs-~(BioT)Chip对肝癌循环肿瘤细胞的捕获 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第二部分 适配子介导的CTCs-~(BioT)Chip对肝癌循环肿瘤细胞捕获的临床应用 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
四、大肠癌不同部位扫描电镜观察及其临床意义（论文参考文献）
- [1]Ce6-PDT对结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路的影响[D]. 热孜完·吾甫尔. 新疆医科大学, 2021(08)
- [2]壳聚糖基纳米材料在膀胱癌靶向治疗中的应用研究[D]. 秦路峰. 青岛大学, 2020(01)
- [3]基于喉癌大切片的淋巴管不同染色方法的比较及重建[D]. 郭瑞. 山西医科大学, 2019(09)
- [4]大容量肺灌洗对肺功能的影响及其相关因子的变化[D]. 计玉容. 华北理工大学, 2019(01)
- [5]HMGB1-RAGE炎症信号通路促进直肠癌进展机制研究[D]. 钱飞. 苏州大学, 2018(04)
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- [7]胆汁酸在诱导Barrett’s食管肠上皮化生作用中的机制及临床意义[D]. 李芳. 济南大学, 2018(02)
- [8]子宫内膜癌中VEGF和MMP-9蛋白的表达及临床意义[J]. 甘露,陈燕,居文惠. 河北医药, 2018(08)
- [9]FMNL2基因对大肠癌细胞SW620增殖、侵袭及转移的影响[J]. 朱曦龄,黎功. 山东医药, 2017(24)
- [10]适配子介导的纳米基底捕获肝癌循环肿瘤细胞及其临床应用研究[D]. 王舒艺. 武汉大学, 2016(07)