一、益冠胶囊抗血栓作用的实验研究（论文文献综述）
董艳[1]（2020）在《三七总皂苷治疗冠心病血瘀证的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络机制研究》文中指出三七是传统活血止血中药,其主要活性成分是三七总皂苷（PNS）。目前PNS已被广泛运用于治疗心血管疾病,尤其对于抗血小板药物抵抗、继发性硝酸甘油失效及术后仍胸闷胸痛等难治性冠心病血瘀证患者疗效突出。但由于PNS包含数十种皂苷成分,作用靶点繁多,作用环节交错,作用机制复杂,在一定程度上限制了其临床运用和疗效发挥。而现有PNS治疗冠心病血瘀证的机制研究结果分散、单一,难以形成清晰、系统的调控网络。有鉴于此,本研究利用网络药理学预测、临床验证和细胞学基础研究的方法,旨在从转录组学层面系统揭示PNS治疗冠心病血瘀证的多靶点、多层次网络作用机制,以期为PNS的临床运用提供客观依据,从而提高中医药治疗冠心病的临床疗效。目的从lncRNA-miRNA-mRNA调控网络层面,利用网络药理预测、临床验证和细胞学功能研究,系统揭示PNS治疗冠心病血瘀证的多靶点、多层次整体作用机制。方法第一部分 基于网络药理学的PNS治疗冠心病血瘀证靶基因及IncRNA-miRNA-mRNA调控网络的预测研究根据2015版《中华人民共和国药典》确定PNS的5个主要成分为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd。首先,运用PharmMapper数据库,通过反向药效团匹配的方法,分别预测与5种成分中每种匹配度最高的前300个靶基因,将靶基因统一命名并作去重处理。同时,在NCBI GEO数据库中检索和筛选人类冠心病靶基因相关研究,利用GEO2R分析GSE20686基因集中393例冠心病和非冠心病患者的差异表达基因,筛选其中差异倍数至少为1.5且P<0.05者作为冠心病的靶基因。基于团队前期高通量测序数据,分析15例冠心病血瘀证、冠心病非血瘀证和健康人群的差异表达基因（每组各5例）,从而获得冠心病血瘀证的靶基因。其次,通过对PNS、冠心病及冠心病血瘀证的预测靶基因进行统一命名后,采用VENN网站分析3组数据的交集基因,并利用GeneCards、GeneMANIA及WebGestalt GSAT数据库分析该交集靶基因及其共表达网络的GO功能及KEGG通路。最后,根据交集靶基因的功能及信号通路,结合本团队前期构建的冠心病血瘀证lncRNA-miRNA-mRNA网络,进一步预测PNS治疗冠心病血瘀证的调控网络。第二部分PNS干预冠心病血瘀证靶基因及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络的临床验证研究采用临床随机双盲安慰剂对照试验,纳入冠心病不稳定型心绞痛（UA）血瘀证患者80例,随机分为试验组和对照组各40例。试验组为西医基础治疗+血塞通软胶囊（主要成分是PNS,以下简称PNS）,对照组为西医基础治疗+PNS模拟剂,疗程为4周。分别观察两组的性别、年龄、吸烟、饮酒、体重指数、危险因素、用药情况和血运重建情况等基线指标,以评价组间均衡性。比较两组的主要疗效和次要疗效指标,以评价PNS治疗UA血瘀证的临床有效性。主要指标为心绞痛疗效和中医证候疗效,通过分析西雅图心绞痛量表（以下简称西雅图量表）和冠心病心绞痛血瘀证疗效评价量表（以下简称血瘀证量表）的积分变化获得。次要指标为中医症状体征疗效,通过分析两组治疗前后的症状体征变化获得。同时,统计两组治疗前后的血常规、肝肾功能、血糖、血脂、心肌酶、凝血功能及心电图等安全性指标,评价PNS的临床安全性。为了验证PNS治疗冠心病血瘀证的靶基因及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络,进一步采用实时荧光定量PCR检测两组治疗前后血浆中靶基因及网络的表达水平,分别计算2-ΔΔCt值及差异倍数。第三部分基于RNA干扰技术研究PNS调控lncRNA-miRNA-mRNA网络的作用机制采用H2O2干预人脐静脉内皮细胞以构建冠心病血管内皮细胞氧化应激损伤模型。利用化学合成siRNA的方法制备miR-3656 inhibitor和miR-3656 mimics,并以慢病毒shRNA包装的方法制备lncR CTB-114C7.4 overexpression和lncR CTB-114C7.4 knockdown。运用噻唑蓝比色法分别筛选H2O2的造模浓度,以及PNS的最佳干预时间和浓度。完成以上前期实验基础后,将实验分为7组:空白对照组、H2O2 模型组、H2O2+PNS 治疗组、H2O2+lncR CTB-114C7.4 overexpression组、H2O2+miR-3656 inhibitor 组、H2O2+PNS+lncR CTB-114C7.4 knockdown 组、H2O2+PNS+miR-3656 mimics组。利用实时荧光定量PCR检测网络中各RNA的表达量,分别将H2O2模型组与空白对照组、PNS治疗组,以及H2O2基础上的RNA干扰组进行两两比较;同时,将PNS治疗组与PNS基础上的RNA干扰组亦进行比较,通过计算2-ΔΔCt值及差异倍数,从而分析PNS调控网络的启动靶点和确切调控模式。同时,运用蛋白质印迹法检测各组中BCL2A1和Beclin1蛋白的表达水平,计算灰度比值,比较不同分组之间蛋白含量的差异,观察是否与相应mRNA表达保持一致。进一步运用流式细胞仪和透射电子显微镜,结合在溶酶体抑制剂条件下LC3-II蛋白水平的变化,以测定不同实验分组的细胞凋亡、自噬小体和自噬流情况,从而分析该调控网络对细胞凋亡和细胞自噬的影响。结果第一部分 基于网络药理学的PNS治疗冠心病血瘀证靶基因及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络的预测研究1、由PharmMapper数据库预测到656个PNS靶基因,在GSE20686基因集中分析出225个冠心病的靶基因,经团队前期高通量测序获得221个冠心病血瘀证的靶基因;2、以上3类预测靶基因有一个共同的交集是BCL2A1。该靶基因具有调节蛋白质结合的功能,与细胞凋亡和细胞自噬信号通路密切相关;3、BCL2A1 可以作为NR4A1 的下游调节因子,共同参与lncR CTB114C7.4-miR3656-NR4A1调控网络介导的细胞凋亡信号通路。因此BCL2A1 可能为 lncR CTB114C7.4-miR3656 的下游靶基因;4、BCL2A1蛋白还能与Beclin1蛋白结合,影响后者的生物学功能,进而调节细胞自噬。以上网络预测结果表明,PNS可能通过lncRCTB114C7.4-miR3656-BCL2A1/Beclin1网络,调节细胞凋亡或细胞自噬,进而发挥治疗冠心病血瘀证的作用。第二部分PNS干预冠心病血瘀证靶基因及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络的临床验证研究1、试验组和对照组的各项基线指标无统计学差异,表明两组具有可比性;2、在心绞痛疗效方面,PNS能降低心绞痛发作次数、改善心绞痛稳定状态;3、在硝酸甘油停减率方面,PNS能减少硝酸甘油的使用量;4、在中医证候疗效方面,PNS能降低患者的血瘀证积分,将血瘀证量表的平均减分率从6.63%提高到34.44%;5、在单项中医症状体征疗效方面,PNS能明显改善患者胸痛和胸闷症状,治疗有效率分别为80.65%和76.32%;6、在安全性指标方面,PNS对患者血常规、肾功能、凝血功能及心电图等无影响,并能改善血糖和部分肝功能、血脂及心肌酶指标,表明其临床运用安全;7、在靶基因及调控网络方面,PNS能上调患者血浆中lncR CTB-114C7.4和BCL2A1表达,并下调miR-3656和Beclin1表达水平。以上临床试验结果证实了 PNS治疗冠心病血瘀证的有效性和安全性,并验证了 PNS对预测靶基因及网络的干预作用,同时提示网络的调控模式可能为lncR CTB114C7.4↑-miR3656 ↓-BCL2A1 T/Beclin1 ↓。第三部分基于RNA干扰技术研究PNS调控lncRNA-miRNA-mRNA网络的作用机制1、lncR CTB-114C7.4是PNS的直接作用靶点,也是网络中的上游启动靶点;2、PNS调控网络的确切模式为lncR CTB114C7.4↑-miR3656↓-BCL2A1↑,而Beclin1 mRNA则表现不稳定,不直接参与该网络;3、BCL2A1蛋白在各组中的相对表达水平与其mRNA表达量保持一致,表明PNS能通过激活网络促进BCL2A1蛋白表达。而Beclin1蛋白则与BCL2A1蛋白在各组中保持相对固定的负相关关系,表明二者存在相互作用;4、在细胞凋亡方面,H2O2模型组能促进细胞凋亡,以早期细胞凋亡为主;PNS治疗组、lncR CTB-114C7.4过表达组和miR-3656阻滞组均能抑制早期和总细胞凋亡;lncR CTB-114C7.4敲降组和miR-3656过表达组则能逆转PNS的抗早期及总细胞凋亡作用。该结果表明,PNS能通过激活lncR CTB114C7.4k↑-miR3656↓-BCL2A1↑网络,从而抑制早期细胞凋亡;5、在细胞自噬方面,H2O2模型组能促进自噬小体形成和自噬相关膜合成,并有增加自噬流的趋势;PNS治疗组和lncR CTB-114C7.4过表达组均能减少自噬相关膜合成,抑制自噬小体形成和自噬流;lncR CTB-114C7.4敲降组则促进自噬小体形成,能重新激活细胞自噬。以上细胞实验表明,PNS能通过上调lncR CTB-114C7.4表达,激活lncR CTB114C7.4↑-miR3656↓-BCL2A1T网络,影响 BCL2A1 和 Beclin1 蛋白水平,从而抑制血管内皮细胞凋亡和细胞自噬。结论1、研究表明PNS治疗冠心病血瘀证的预测靶基因是BCL2A1,调控网络是lncR CTB114C7.4-miR3656-BCL2A1/Beclin1;2、PNS 治疗冠心病血瘀证有效,在临床有效的基础上进一步验证了其对靶基因及网络具有调控作用;3、PNS调控网络的启动靶点是lncR CTB-114C7.4,确切调控模式是lncR CTB114C7.4↑-miR3656 ↓-BCL2A1↓,介导的细胞学功能是通过上调BCL2A1蛋白,并下调Beclin1蛋白表达,抑制血管内皮细胞凋亡和细胞自噬,从而发挥治疗冠心病血瘀证的作用。
潘文君[2]（2020）在《通冠胶囊及其有效成分丹参酚酸B治疗心梗后心衰的作用及机制研究》文中指出目的:目前,冠状动脉粥样硬化性心脏病发病率日益增高。虽然得益于急性期经皮冠状动脉介入治疗、急性期溶栓治疗、抗血小板聚集等药物治疗,急性心肌梗死死亡率明显改善,但心肌梗死后心衰的发病率却逐年递增。心脏的再灌注治疗也带来了心脏的二次损伤,即缺血再灌注损伤。目前心肌梗死后的治疗仍以抗血小板聚集、抑制交感神经为主,但西医的治疗仍具有局限性,并且会引起消化道出血、心动过缓等不良反应。中医药多靶点作用在心梗后治疗中有明显优势,可以弥补西医的不足。本研究旨在动物及细胞水平,探究本院自主研发的中成药通冠胶囊对心梗后心衰的治疗效果及潜在的作用机制。方法:首先,我们通过异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）皮下注射构建了稳定的心梗后心衰的大鼠动物模型。将实验动物分为空白对照组、ISO模型组、美托洛尔阳性药物组和通冠胶囊治疗组。造模及给药7天后,通过小动物心脏超声检测心脏功能。麻醉处死后,取心、肺组织称重,量取胫骨长度。通过苏木素-伊红染色、天狼星红染色了解心脏病理改变。通过Western blot、免疫组织化学染色检测心脏组织蛋白表达及定位。之前课题组通过高效液相色谱证实通冠胶囊的最主要成分是丹参酚酸B。本研究亦在该动物模型上探索通冠胶囊的心脏保护作用是否是丹参酚酸B在起作用。将实验动物分为空白对照组、ISO模型组、美托洛尔阳性药物组和丹参酚酸B治疗组。造模及给药7天后,通过小动物心脏超声检测心脏功能。麻醉处死后,取心、肺组织称重,量取胫骨长度。通过苏木素-伊红染色、天狼星红染色了解心脏病理改变.通过Western blot、检测心脏组织蛋白表达。组织免疫荧光检测心脏组织细胞凋亡。在细胞水平,同样以ISO在H9C2大鼠心室肌细胞系构建心肌细胞凋亡模型。通过MTT检测细胞活力,通过细胞钙离子荧光染色了解丹参酚酸B对心肌细胞钙超载的影响,Western blot检测钙调蛋白表达及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果:通冠胶囊可明显改善ISO引起的大鼠生存率（78.05%VS 53.66%,P<0.05）、改善ISO引起的心功能降低和心梗后心肌细胞肥大及心脏胶原沉积。通冠胶囊通过抑制ISO引起的CaMKII高表达、转录阻遏因子HDAC4转位和肌细胞增强子因子MEF2表达上调,抑制ISO引起的心肌细胞肥大及心衰。同时,丝裂原激活蛋白激酶MAPKs通路作为经典的促心肌细胞肥大通路也参与了 ISO引起的心衰。通冠胶囊通过抑制MAPKs激活,及下游转录因子GATA-4表达,抑制促心肌细胞肥厚的心房利钠肽（atrial natriuretic peptide,ANP）蛋白表达,保护心脏功能。通冠胶囊的主要有效成分丹参酚酸B同样可以改善心梗后心衰大鼠心功能。并能抑制心肌细胞肥大和心脏胶原沉积。我们还发现丹参酚酸B下调了 ISO引起的心脏凋亡相关蛋白Bax的高表达,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并且抑制Caspase-3的剪切及凋亡小体的产生。在细胞水平,我们发现丹参酚酸B能改善ISO引起的细胞活力降低、细胞凋亡。丹参酚酸B可抑制ISO引起的CaMKII激活,上调肌浆网Ca-ATP酶（sarcolemmal Ca-ATPase,SERCA）表达从而改善心肌细胞内钙超载。结论:通冠胶囊能通过抑制心肌细胞肥大,改善心梗后大鼠的心功能并改善其生存率。通冠胶囊可能通过抑制CaMKII/HDAC4/MEF2和MAPKs/GATA-4通路发挥其心脏保护作用。丹参酚酸B作为通冠胶囊的主要有效成分,在动物实验中也能抑制心肌细胞肥大,改善心梗后大鼠的心功能。丹参酚酸B还能抑制CaMKII激活和上调SERCA表达,抑制细胞内钙超载,从而抗细胞凋亡。
王国锋[3]（2019）在《舒心方干预冠心病合并焦虑、抑郁的临床疗效观察》文中研究说明目的:本临床研究通过观察舒心方对气血瘀滞型冠心病合并焦虑、抑郁的干预作用,探讨舒心方的临床疗效及其安全性,以冀舒心方更广泛地应用于临床。方法:将68例冠心病合并焦虑、抑郁患者随机分为2组,即对照组和治疗组,每组各34例,2组均接受基础治疗（冠心病的常规西药治疗联合心理疏导）,对照组仅接受基础治疗,治疗组则加服舒心方,疗程3个月。通过《焦虑自评量表SAS》、《抑郁自评量表SDS》、《中医证候分级量化标准》三个量表来评定患者治疗前和治疗1个月、2个月、3个月后相关条目的分数,运用统计学软件SPSS 21.0进行分析,比较两组患者的组内和组间临床疗效、焦虑及抑郁症状变化情况。结果:治疗前,治疗组与对照组进行组间比较,两组的SAS、SDS评分及中医证候积分差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗1个月、2个月及3个月后,两组进行组间比较,SAS、SDS评分和中医证候积分的差异均有统计学意义（P<0.05）;各组内进行治疗前后比较,两组的SAS、SDS评分和中医证候积分较前均有明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）,说明治疗后两组焦虑、抑郁症状和中医证候较前有明显改善。治疗3个月后治疗组总有效率为84.8%,对照组总有效率为62.5%,有显着的统计学意义（P<0.05）。结论:本项临床研究提示了舒心方干预气血瘀滞型冠心病合并焦虑、抑郁后,可以明显改善冠心病患者的焦虑、抑郁症状及中医证候,可以显着提高临床疗效,进一步说明了舒心方治疗气血瘀滞型冠心病合并焦虑、抑郁的有效性及安全性。
任盼宁[4]（2019）在《生脉养血保心汤治疗冠心病稳定型心绞痛（气阴两虚兼瘀型）的临床研究》文中提出目的:本研究通过对临床资料的收集、统计、数据整理、分析等步骤,研究生脉养血保心汤治疗冠心病稳定型心绞痛（气阴两虚兼瘀型）的临床疗效及安全性,根据临床研究的数据全面解析其中的规律,分析个体化诊疗信息特征,并初步探讨其作用机理。方法:选取2018年4月至2018年12月期间于济南市中医医院心内科门诊就诊的冠心病稳定型心绞痛（气阴两虚兼瘀型）的患者63例,按照随机数字分组法将患者随机分为试验组32例和对照组31例,对照组31例给予西药基础治疗,试验组在对照组治疗的基础上,加用生脉养血保心汤治疗（免煎颗粒,济南市中医医院）,疗程为4周。观察治疗前后两组患者安全性指标,心绞痛、心电图变化,比较两组中医证候积分及硝酸甘油停减率的变化,评价其临床疗效及安全性。结果:临床疗效方面:生脉养血保心汤在改善中医证候、心绞痛、心电图疗效,减少硝酸甘油用量方面疗效显着（P<0.05）;生脉养血保心汤可明显降低TG水平,降低超敏C反应蛋白指标。结论:通过本次研究发现,生脉养血保心汤治疗冠心病稳定型心绞痛气阴两虚兼瘀型临床疗效显着,可减轻患者临床症状,降低TG、超敏C反应蛋白指标水平,且安全可靠,无毒副作用。
姜丹[5]（2019）在《搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究》文中认为目的:本实验研究通过建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,从内皮功能、炎症反应、细胞凋亡角度探讨搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探析其作用机制,为搜风祛痰中药的临床应用提供理论依据。材料与方法:将140只SD大鼠适应性喂养7d,随机将大鼠分成假手术组、模型组、培哚普利组、搜风祛痰中药组四组,35只/组。根据成人每日用药临床推荐的常用剂量,按成人与大鼠体重折算系数6.3,折算成大鼠用量后给药,进行预处理,每日1次,继续灌胃7d。其中假手术组、模型组大鼠予以生理盐水10 mL·kg-1灌胃;搜风祛痰中药组大鼠予以搜风祛痰中药8.1g·kg-1灌胃;培哚普利组予以培哚普利片0.4mg·kg-1灌胃。在第7d灌胃结束后1小时建立心肌缺血再灌注模型,假手术组与其它三组手术过程相同,但不结扎。造模成功后每组随机选取10只大鼠进行取材,取材前夜禁食,经大鼠腹主动脉取血4 mL,静置30 min后离心,取上清液-20℃保存备用;取血结束后即刻处死大鼠,无菌条件下取出心脏,经预冷的灭菌生理盐水清洗后,心脏经10%甲醛固定,置于液氮中,-20℃冻存备用。采用ELISA法检测血清中VEGF、TXA2、PGI2、sTM、sEPCR、IL-8、IL-6、TNF-α含量;采用Western Blot法测定P-Akt、Bax、Bcl-2蛋白表达水平;采用RT-PCR法测定Akt mRNA、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平。结果:1.ELISA法检测:1.1各组大鼠血清VEGF含量比较:模型组与假手术组相比,VEGF水平明显下降（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,VEGF水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,VEGF水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,VEGF水平升高明显（P<0.05）。1.2各组大鼠血清TXA2、PGI2含量及TXA2/PGI2比值比较:模型组与假手术组相比,TXA2水平明显升高,PGI2水平明显下降,TXA2/PGI2明显升高（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,TXA2水平下降,PGI2水平升高,TXA2/PGI2下降（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,TXA2水平下降,PGI2水平升高,TXA2/PGI2下降（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,TXA2水平下降明显（P<0.05）,PGI2水平升高不明显（P>0.05）,TXA2/PGI2下降明显（P<0.05）。1.3各组大鼠血清sTM、sEPCR含量:模型组与假手术组比较,sTM、sEPCR含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组和搜风祛痰中药组sTM、sEPCR含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组sTM、sEPCR含量升高（P>0.05）。1.4各组大鼠IL-6、IL-8含量比较:与假手术组比较,模型组IL-6、IL-8含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组与搜风祛痰中药组IL-6、IL-8含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组IL-8含量降低（P<0.05）,IL-6含量升高（P>0.05）。1.5各组大鼠TNF-a含量比较:与假手术组比较,模型组TNF-a含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组与搜风祛痰中药组TNF-a含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组TNF-a含量升高（P>0.05）。2.PCR检测2.1各组大鼠Akt mRNA表达水平:模型组与假手术组相比,Akt mRNA表达明显降低,（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,Akt mRNA表达水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比Akt mRNA表达水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,Akt mRNA表达水平升高不明显（P>0.05）。2.2各组大鼠Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平:模型组与假手术组相比,Bax mRNA表达明显升高,Bcl-2 mRNA表达明显升高（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA表达升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,Bax mRNA下降不明显,Bcl-2 mRNA增加不明显（P>0.05）。3.Western Blot蛋白印记检测（蛋白灰度统计）3.1各组大鼠P-Akt蛋白表达水平比较:模型组与假手术组比较,P-Akt蛋白表达均降低（P<0.05）;培哚普利组与模型组比较,P-Akt蛋白表达增加（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组比较,P-Akt蛋白表达增加（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组比较,P-Akt蛋白表达降低不明显（P>0.05）。3.2各组大鼠Bax、Bcl-2蛋白表达水平比较:模型组与假手术组比较,Bax、Bcl-2蛋白表达均增加、Bcl-2/Bax降低（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组和搜风祛痰中药组Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达降低、Bcl-2/Bax升高（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组Bcl-2和Bax蛋白表达均增加、Bcl-2/Bax降低（P<0.05）。结论:1.搜风祛痰中药能够使血清中VEGF含量上升,PGI2含量上升,TXA2的含量下降,保持TXA2/PGI2比例的平衡,降低血清中sTM、sEPCR水平,从而对大鼠心肌缺血再灌注后血管内皮功能具有保护作用。2.搜风祛痰中药能够降低血清中IL-8、IL-6、TNF-α的含量,说明搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用可能与抑制炎症反应有关。3.搜风祛痰中药能够上调P-Akt蛋白表达水平;下调Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平;搜风祛痰中药能够上调细胞凋亡相关基因Akt mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平,下调细胞凋亡相关基因Bax mRNA表达水平;搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用可能与激活Akt/Bax通路,抑制细胞凋亡有关。
秦伟彬[6]（2019）在《瓜蒌薤白半夏汤加味联合前列地尔对冠心病PCI术后心肌微循环的研究》文中研究指明目的:本研究旨在通过评估中药复方瓜蒌薤白半夏汤加味结合前列地尔对冠心病患者冠脉介入术后心肌微循环状态的影响,为心血管疾病介入术后的中医药治疗提供理论依据。方法:本研究为随机对照的前瞻性临床试验,根据随机数字表方法抽取广西中医药大学第一附属医院心内科明确诊断为冠心病（急性ST段抬高型心肌梗死）且行经皮冠状动脉介入术治疗的患者为研究对象,根据治疗方案将患者分为瓜蒌薤白半夏汤结合前列地尔组（GQZ组）、瓜蒌薤白半夏汤组（GLZ组）、前列地尔组（QLZ组）。三组患者入院明确诊断后均给予抗凝、抗血小板、调脂、营养心肌、抑制心肌重塑等常规治疗,GQZ组患者在常规治疗的基础上,予前列地尔注射液20ug+生理盐水100ml静脉内缓慢静注,2次/日,术前30min开始应用至术后第7天,并于术前30min开始予瓜蒌薤白半夏汤加味（瓜蒌实20g、薤白10g、半夏10g、茯苓10g、丹参15g、党参15g、川芎15g、赤芍10g、桃仁10g、炙甘草10g,剂型均为免煎颗粒）,每日一剂,水冲100ml,术后坚持服用3个月;QLZ组患者在常规治疗基础上予前列地尔注射液20ug+生理盐水100ml静脉内缓慢静注,2次/日,术前30min开始应用至术后第7天;GLZ组患者术前30min开始予瓜蒌薤白半夏汤加味,每日一剂,水冲100ml,术后坚持服用3个月。分别记录三组研究对象的一般资料,疗效观察指标有心脏功能、术后3个月健康调查简表（SF-36）评估、中医证候评定、心电图ST段回落评估、TIMI血流分级及校正后TIMI帧计数、心肌灌注评价、肌钙蛋白及肌酸激酶同工酶峰值等心肌微循环状态评估指标。最后汇总资料分析。结果:本次研究中共计纳入研究对象90例,其中终止试验1例,试验脱落2例,最终纳入完成试验者共计87例,分别为GQZ组29例、QLZ组28例、GLZ组30例。结果显示三组患者一般资料无差异,术后三个月复查超声心动图提示三组患者左室射血分数差异有统计学意义（57.93±3.68VS 55.03±4.48 VS 56.29±5.07）%,P<0.05,而GLZ组与QLZ组两组组间相比较差异没有统计学意义（F=0.48,P=0.91）;术后3个月SF36量表评估结果显示三组研究对象在躯体疼痛、生理功能、一般健康状况、情感职能、活力、社会功能以及精神健康七个方面评分差异均有统计学意义（P<0.05）;中医证候评分结果显示除了QLZ组在心悸方面（P=0.06）,其它各组在胸闷方面、胸痛、心悸、身体困重感、舌苔方面治疗前后组内比较均存在显着差异（P<0.05）;心电图ST段回落方面,GQZ组术后ST段回落明显较好,ST段回落>70%的患者较其它两组多（P=0.048）,QLZ组、GLZ组患者两两比较差异没有统计学意义（P=0.16）;心肌灌注评价,GQZ组术后的MBG分级达到MBG 3级的患者所占比例比QLZ组、GLZ组较多,差异有统计学意义（P=0.17）,QLZ组、GLZ组患者两两比较差异没有统计学意义（P=0.12）;心脏标志物方面,三组患者cTnI、CK-MB达到峰值的时间差异有统计学意义,而QLZ组、GLZ组患者两两比较在cTnI、CK-MB达到峰值时间方面差异均没有统计学意义（P=0.85 VS P=0.21）,且从各组患者cTnI水平变化趋势来看,GQZ组患者在到达峰值后下降趋势明显快于其它两组;TIMI血流分级评估,GQZ组术后的TIMI3级获得率比其它两组高（P=0.048）,而QLZ组、GLZ组患者两两比较差异无统计学意义;术后CTFC评估,GQZ组效果优于其它两组,且GLZ组疗效同样优于QLZ组;试验过程中均无明显不良反应出现。结论:瓜蒌薤白半夏汤加味结合前列地尔对于改善痰瘀型冠心病患者PCI术后心肌微循环状态有显着疗效。
孙锦[7]（2019）在《双参通冠胶囊工艺放大过程中影响因素及控制方法研究》文中研究指明目的:在双参通冠胶囊工艺研究的前期工作基础上,对双参通冠胶囊的工艺放大过程进行研究,找出工艺放大过程中变化明显的化学成分,并分析造成变化的影响因素,探讨工艺控制方法,减少药效成分的损失,保证药物质量。方法:建立双参通冠胶囊中主要人参皂苷类成分、丹参酚酸类成分、延胡索生物碱类成分高效液相色谱（HPLC）测定方法,并对其进行方法学考察。以前期实验结果为基础,分析造成其差异的影响因素,根据降解动力学基本原理,对各影响因素进行考察研究,计算其降解动力学方程。对小试和中试中提取、分离纯化和干燥过程中主要成分进行含量测定,并计算每个成分在各阶段的转移率,对小试、中试中6个成分各阶段转移率进行统计学差异比较分析,验证控制方法可行性。结果:经方法学考察结果显示,几种成分在线性、精密度、稳定性、重复性、加样回收率等考察项目均符合相关要求,表明所建立方法适合3种人参皂苷、12种丹参成分和2种延胡索生物碱的定性定量分析。对丹参不同洗脱液中丹酚酸B的稳定性研究结果表明,丹参提取液中其他组分和其自身浓度是丹酚酸B稳定性的影响因素,丹参提取液中某些成分可能对丹酚酸B具有保护作用。对延胡索乙素和脱氢紫堇碱的降解动力学进行研究,结果显示延胡索乙素的降解反应基本符合一级反应,空气是影响延胡索乙素稳定性最关键的因素,在无氧的情况下,延胡索乙素稳定性较好;此外温度、溶液pH、溶媒对延胡索乙素稳定性也有一定影响,温度越低,延胡索乙素稳定性越好;在偏中性的溶液中,延胡索乙素的稳定性较差;50%的乙醇作为溶媒,延胡索乙素的稳定性较好。脱氢紫堇碱的降解反应基本符合一级反应,温度、pH、溶媒、氧气、延胡索提取液中其他组分均对脱氢紫堇碱的稳定性有一定影响:温度越高,脱氢紫堇碱降解越快;在pH为中性的溶液中脱氢紫堇碱的稳定性较好;甲醇溶媒体系中,脱氢紫堇碱最稳定;无氧条件下比有氧条件下脱氢紫堇碱的稳定性更好;脱氢紫堇碱在延胡索提取液中的稳定性较单体溶液稳定。以人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱的转移率为考察指标,研究发现其中3种化学成分在小试和中试中表现出统计学差异（p<0.05）,人参皂苷Rb1在中试浓缩和精制两个过程中的转移率均明显高于小试;丹酚酸B中试浓缩过程转移率明显高于小试,但是干燥过程小试的转移率高于中试;延胡索乙素的小试研究中干燥转移率明显高于中试。结论:双参通冠胶囊工艺放大过程中,影响其主要成分稳定性的因素主要是是温度、空气、储存时间等。其中,工艺放大对丹酚酸B的影响最显着,除文献报道中的温度、pH、溶媒、添加剂等因素外,提取液中其他成分及其丹酚酸B自身浓度也是影响其稳定性的重要因素,研究初步认为丹酚酸A、咖啡酸、原儿茶醛、迷迭香酸等化学成分有利于丹酚酸B的稳定。对丹酚酸B的初始浓度进行研究,发现丹酚酸B初始浓度越高,丹酚酸B越稳定。所以为控制制备过程中丹酚酸B成分的稳定,应在保证其提取率的情况下,尽量降低温度、减少其受热时间,尤其注意精制过程中应及时混匀洗脱液,及时对混合均匀的洗脱液进行减压浓缩干燥,避免其因化学组分之间分离或浓度过低导致丹酚酸B降解速度加快的现象,降低其不必要的损失。延胡索在提取、精制、干燥过程中,应尽量避免其与空气的接触,尤其注意其在温度较高的情况下与氧的接触。总之,应控制温度,对各药材提取液、洗脱液进行及时处理,避免因高温、氧气、化学成分分离以及浓度过低导致的各成分损失,尽早让各有效成分处于一个相对稳定的状态下。
于永慧[8]（2019）在《心梗后纤维化心肌ECM蛋白表达谱构建及水蛭素的干预效应研究》文中认为心肌纤维化是众多心血管疾病,如心肌梗死、冠心病、心肌病等发展至后期的共同病理改变。如何防治心肌纤维化是当前世界医学研究的难点和热点。心肌梗死后心肌纤维化（Cardiac fibrosis after myocardial infraction,CFMI）是心肌纤维化常见的临床类型之一,其核心病理环节是CFMI的主要效应细胞心肌成纤维细胞（Cardiac fibroblasts,CFs）在氧化应激、炎症因子等促纤维化因素的诱导下,出现增殖、表型分化、迁移、分泌等生物学行为的改变,导致细胞外基质（Extracellularmatrix,ECM）大量沉积,影响心脏舒缩功能和电信号传导,出现心力衰竭、心律失常,影响CFMI患者预后。AMPK介导的Integrin β1信号通路在CFs参与的ECM过度沉积中发挥重要作用。现代中医理论认为,CFMI属于“胸痹”、“症瘕”等范畴,与血瘀证的病因病机密切相关。课题组前期研究发现,活血化瘀中药在调节AMPK代谢通路、优化心肌能量代谢的同时,下调CollagenⅠ、CollagenⅢ、骨桥蛋白、腱糖蛋白-C等ECM关键蛋白,抑制心肌梗死后心室重构和心功能异常。但是目前对于CFMI中ECM表达情况的研究局限于个别蛋白,活血化瘀中药在其中发挥的关键调节机制亦尚不明确。水蛭是祖国医学中经典的活血化瘀中药,具有破瘀血、通经络、消症瘕等确切功效,以及抗凝、抗栓、抗血小板、抗心肌纤维化等药理作用。目前含水蛭中成药和水蛭素衍生物比伐芦定在抗心肌纤维化、减少心梗面积方面获得一些证据,但缺乏对水蛭素单一成分抗CFMI的疗效和机制研究。本研究采用Label-free亚蛋白质组学技术探索CFMI主要病理产物ECM的组成特点,通过建立大鼠CFMI模型和AngⅡ诱导乳鼠CFs模型,以水蛭主要有效组分水蛭素为治疗手段,从AMPK介导的Integrinβ1及其下游FAK/PI3K/Akt、TGF-β1/Smad2/3信号通路,观察水蛭素对CFMI修复过程中关键ECM蛋白表达的影响,为中医药延缓CFMI、改善心梗患者预后提供科学依据。1文献综述分别阐述CFMI的病理机制、早期识别、临床干预,突出中医药活性成分在CFMI治疗中的潜力。对传统活血化瘀中药水蛭的基源、典籍记载、成药组方、制剂开发,以及水蛭主要活性成分水蛭素治疗心血管疾病的药理学机制进行了综述,为研究水蛭素干预CFMI的实验研究奠定理论基础。2实验研究研究一心肌梗死后纤维化心肌ECM蛋白表达谱的构建与生信分析目的:通过Label-free亚蛋白质组学技术分析大鼠CFMI组织中ECM蛋白的组成特点和差异蛋白的互作机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支建立Wistar大鼠CFMI模型,随机分为假手术组（Sham）、模型2周组（Model 2W）、模型4周组（Model 4W）,每组10 只。运用Label-free亚蛋白质组学技术分析CFMI后2周、4周大鼠心肌ECM差异蛋白改变,GO分析从细胞组分、分子功能、生物过程描述ECM差异蛋白特征,KEGG分析参与ECM差异蛋白表达的调控通路,最后通过Western Blot技术对筛选出的ECM差异蛋白进行验证。结果:共筛选出243个ECM差异蛋白。与Sham 比较,Model 2W上调显着的是骨甘氨酸（Osteoglycin）,Model 2W下调显着的是巢蛋白-1（Nidogen-1）,Model 4W上调显着的是光蛋白聚糖（Lumican）、胶原Ⅵ型α2链（Collagen 6A2）,Model 4W 下调显着的是 Nidogen-1;与 Model 2W 比较,Nidogen-1、踝蛋白-1（Talin-1）在Model4W显着下调（P<0.05）。GO分析显示,ECM差异蛋白功能显着富集在细胞外区域、细胞外基质等细胞组分,受体结合、金属离子结合、Integrin结合等分子功能,以及免疫调节、蛋白转运、膜组织、细胞间信号转导、细胞粘附等生物过程。KEGG分析显示,黏着斑激酶（FAK）、磷脂酰肌醇-3-羟激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、Integrinβ1与ECM受体通路显着富集。Western Blot 结果显示,与 Sham 比较,Model 2W 组 Collagen 6A2、Lumican、Talin-1 表达上调,Model 4W组 Collagen 6A2、Lumican 显着升高,Nidogen-1 显着下降（P<0.05）。与 Model2W组比较,Model4W 组 Nidogen-1、Lumican、Talin-1 表达下调（P<0.05）。其中,与 Sham 比较,Model 4W 组 Collagen 6A2、Lumican 表达上调,Nidogen-1 表达下调;与 Model 2W 组比较,Model 4W组Nidogen-1、Talin-1 表达下调,Label-free 结果与 Western Blot 结果一致。结论:参与CFMI发生的ECM差异蛋白调控靶点为Collagen 6A2、Nidogen-1、Lumican、Talin-1、Osteoglycin 等,其作用机制可能涉及 FAK、PI3K/Akt、Integrinβ1等信号通路。研究二水蛭素调节ECM表达干预大鼠心梗后心肌纤维化的效应机制目的:观察水蛭素对CFMI大鼠心脏功能、血清标记物、心肌病理、分子病理的影响,探讨水蛭素干预ECM重建防治CFMI的效应机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支建立Wistar大鼠CFMI模型,随机分为4组:假手术组（Sham,生理盐水）、模型组（Model,生理盐水）、缬沙坦组（Valsartan,144mg·kg-1）、水蛭素组（Hirudin,270mg·kg-1）,每组 20 只,每天给药 1 次,连续给药4周。心脏超声检测各组大鼠舒张末期/收缩末期的左室内径（LVD）、室间隔厚度（IVST）、左室后壁厚度（LVPWT）、左室容积（EDV/ESV）、左室射血分数（LVEF）;血清学检测心肌损伤（CK-MB、cTnT）、心力衰竭（ANP、BNP）、氧化应激（Ang Ⅱ、MDA、SOD）等标记物;TTC染色、HE染色、Masson染色、天狼星红染色观察心肌梗死及纤维化病变情况;免疫组化和Western Blot技术观察ECM差异蛋白表达;Western Blot技术观察AMPK、Integrin β1、FAK、PI3K p110α PI3K p110(3、Akt、TGF-β1、Smad2/3 等信号通路蛋白表达。结果:（1）与 Sham 组比较,Model 组 IVST、LVPWT 减少,LVD、EDV、ESV增高,LVEF降低（P<0.05）,提示CFMI模型建立成功。与Model组比较,Hirudin 组 IVSTs、LVPWT、LVEF 升高,LVD、EDV、ESV 降低（P<0.05）。（2）与 Model 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 CK-MB、cTnT、ANP、BNP、Ang Ⅱ、MDA水平显着下降,SOD显着升高（P<0.05）。（3）与Model组比较,Valsartan组、Hirudin组心重指数、心梗面积减少,胶原容积分数显着降低;Hirudin组血管周围胶原容积分数显着降低（P<0.05）。与Model组比较,Valsartan组、Hirudin 组 Collagen 6A2、Lumican 表达减少,Nidogen-1 表达增多（P<0.05）。（4）与 Model 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 AMPKα、FAK、PI3K p110α、Akt蛋白活性上调,Integrinβ1、TGF-β1、Smad2/3蛋白表达下调（P<0.05）,PI3K p110β蛋白表达无显着变化（P>0.05）。结论:水蛭素能够改善CFMI大鼠左室扩张,提高心脏功能,减轻心肌损伤,减少心重指数、心梗面积,减轻心肌组织和血管周围胶原沉积,从而延缓CFMI进展;其机制与调节Collagen 6A2、Lumican、Nidogen-1等ECM差异蛋白代谢,调控心肌 AMPKα/Integrin β1/FAK 及其介导的下游 PI3K/Akt、TGF-β1/Smad2/3 信号通路有关。研究三水蛭素干预Ang Ⅱ诱导乳鼠心肌成纤维细胞ECM表达的机制目的:通过Ang Ⅱ诱导乳大鼠心肌成纤维细胞（NRCFs）模型,观察水蛭素对NRCFs形态、增殖、表型分化、迁移、分泌等细胞生物学行为的影响机制。方法:分离、提取、培养NRCFs,经免疫荧光鉴定波形蛋白（+）/vWF（-）后,给予不同浓度（10-9 mol·L-1、10-8mol·L-1、10-7mol·L-1、10-6mol·L-1）AngⅡ诱导不同时间（6h、12h、24h、48 h）,采用CCK-8法观察NRCFs增殖活力,确立Ang Ⅱ诱导NRCFs促纤维化模型的适宜浓度和时间。NRCFs分为4组:对照组（Control）、模替型组（Ang Ⅱ）、缬沙坦组（Valsartan）、水蛭素组（Hirudin）,给予相应药物预干预30 min后加入Ang Ⅱ诱导NRCFs。采用流式细胞法观察各组NRCFs细胞周期,α-SMA法观察NRCFs表型转化,Transwell小室试验和划痕试验观察NRCFs迁移,HYP含量测定法观察NRCFs胶原蛋白分泌,免疫荧光染色技术观察ECM差异蛋白分泌情况,Western Blot技术观察AMPKα1/α2、Integrinβ1、FAK、TGF-β1、Smad2/3、Nideogen-1 蛋白表达情况。结果:（1）NRCFs培养24h后生长良好,波形蛋白（+）/vWF（-）的NRCFs比例在（98.09±1.03）%。选定 Ang Ⅱ以10-6mol·L-1刺激24h作为诱导NRCFs纤维化改变的理想模型。（2）与Ang Ⅱ组比较,Valsartan组、Hirudin组静止期G0G1期细胞百分比增多、增殖期S期细胞百分比降低,α-SMA免疫荧光染色阳性的细胞数量、穿越Transwell小室的细胞数量减少,划痕宽度延长（P<0.05）。（3）与 Ang Ⅱ 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 HYP 含量降低,Lumican、Collagen 6A2荧光强度下降,Hirudin组Nidogen-1、Talin-1荧光强度升高（P<0.05）。（4）与Ang Ⅱ组比较,Valsartan组、Hirudin组AMPKα1/α2、FAK表达上调,Integrin β1 表达下调,Valsartan 组 TGF-β1、Smad2/3 表达下调（P<0.05）;Hirudin组 TGF-β1、Smad2/3,Valsartan 组、Hirudin 组 Nidogen-1 表达无差异（P>0.05）。结论:水蛭素能够抑制Ang Ⅱ诱导的NRCFs增殖、表型分化、迁移、分泌等细胞生物学行为的改变,其机制与调节AMPK/Integrin β1/FAK信号通路表达,进而优化NRCFs对Ang Ⅱ诱导的促纤维化因素的处理能力有关。
苗鸿杏[9]（2019）在《冠通方治疗PCI术后再发心绞痛的临床观察及对凝血纤溶系统影响》文中提出目的:观察冠通方治疗PCI术后再发心绞痛的临床疗效,探讨冠通方对此类患者凝血纤溶系统的影响,为中医药治疗PCI术后再发心绞痛探索新的思路和方法。方法:将符合纳入条件的58例冠心病PCI术后再发心绞痛患者按就诊时间先后顺序排序,采用随机数字表法将病例分为两组,即治疗组和对照组,每组各29例,对照组予以西药常规治疗,治疗组在对照组基础上加服冠通方煎剂治疗,连续服用1个月。分别记录治疗前后患者的主要临床表征（包括心绞痛的疼痛程度、发作频率、持续时间）、硝酸甘油减停情况、西雅图心绞痛评分量表、凝血功能（主要观察APTT、PT、FIB）变化、肝肾功能、尿常规、粪便常规等指标,对比冠通方治疗前后心绞痛改善情况及对凝血纤溶系统的影响。结果:治疗组和对照组治疗PCI术后再发心绞痛患者均能缓解临床症状,减少心绞痛发作频率,缩短发作时间。治疗组治疗后心绞痛疗效总有效率为86.21%,对照组总有效率为57.14%,组间差异有统计学意义（P<0.05）,治疗组优于对照组。在硝酸甘油用量方面,两组治疗后均能减少硝酸甘油用量,治疗组总减停率为79.31%,对照组总减停率为57.14%,但组间差异无统计学意义（P>0.05）。在西雅图心绞痛量表评分方面,两组均能提高患者的生活质量,组间差异有统计学意义（P<0.05）,治疗组优于对照组。在凝血纤溶系统方面,治疗组治疗后能延长APTT、PT时间,降低FIB浓度,组间差异有统计学意义（P<0.05）,治疗组优于对照组。结论:1、冠通方联合常规西药治疗能有效缓解PCI术后再发心绞痛患者的临床症状,减少心绞痛发作频率及持续时间,其疗效优于常规西药治疗。2、冠通方联合常规西药治疗能有效改善PCI术后再发心绞痛患者西雅图心绞痛量表评分情况,提高患者的生活质量。3、冠通方联合常规西药治疗能延长APTT、PT时间,降低FIB浓度,加服冠通方对PCI术后再发心绞痛患者的凝血纤溶系统具有影响,有利于防止血栓形成。
王昆[10]（2019）在《芪参益气滴丸对冠心病PCI术后患者（气虚血瘀型）心功能及心绞痛疗效观察》文中研究表明目的:观察芪参益气滴丸对冠心病PCI术后患者（气虚血瘀型）心功能、心绞痛的疗效及安全性。方法:选择60例冠心病PCI术后气虚血瘀型患者,随机分为对照组（30例）和治疗组（30例）。两组均给予规范化的冠心病二级预防药物治疗,治疗组加用芪参益气滴丸（0.5g/1包po tid）,两组疗程均为6个月。观察治疗前后中医证侯积分、西雅图心绞痛量表积分、NYHA心功能分级以及心电图、BNP、心脏超声等指标。结果:两组受试者年龄、性别、冠心病分型、罪犯血管、病变支数等一般资料以及治疗前各观察指标比较,差异无统计学意义（P>0.05）。经过6个月的治疗:在中医证侯疗效方面,治疗组总有效率86.7%,对照组治疗总有效率66.7%,且治疗组改善单项中医症状疗效明显优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗组中医证侯积分较对照组降低更显着,差异有统计学意义（P<0.05）;在改善心电图变化方面,对照组和治疗组总有效率分别为63.3%和83.3%,两组间差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后治疗组在西雅图心绞痛量表PL、AS、AF、TS四个维度积分的提高较对照组更加明显,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗组BNP水平降低较对照组更加明显、LVEF及NYHA心功能分级改善情况也优于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）;同组内治疗前后LVDd比较以及治疗后两组间LVDd比较,差异无统计学意义（P>0.05）。整个试验期间无受试者因服用药物出现任何不适和严重不良反应而中断或退出研究;同时治疗前后观察监测的血、尿、便三大常规、肝肾功能、肌酸激酶等安全性指标均未见明显异常。结论:1.芪参益气滴丸具有较好的安全性;2.加用芪参益气滴丸治疗,较单纯西药可更有效改善冠心病PCI术后患者心功能,降低BNP水平,并可缓解患者临床症状、降低中医证侯积分、改善心电图心肌缺血、增加西雅图心绞痛量表积分。
二、益冠胶囊抗血栓作用的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、益冠胶囊抗血栓作用的实验研究（论文提纲范文）
（1）三七总皂苷治疗冠心病血瘀证的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 文献综述 |
| 综述一 冠心病证候相关miRNA、lncRNA和中医药干预研究现状 |
| 综述二 三七总皂苷治疗冠心病作用机制的研究现状 |
| 前言 |
| 第一部分 基于网络药理学的PNS治疗冠心病血瘀证靶基因及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络的预测研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 利用PharmMapper数据库预测PNS靶点 |
| 1.2 利用NCBI GEO数据库分析冠心病的靶基因 |
| 1.3 利用高通量测序数据预测冠心病血瘀证靶基因 |
| 1.4 运用VENN分析交集靶基因 |
| 1.5 分析交集靶基因的GO功能和KEGG通路 |
| 1.6 交集靶基因参与的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 PNS的预测靶点 |
| 2.2 冠心病、冠心病血瘀证的预测靶基因 |
| 2.3 PNS治疗冠心病血瘀证的预测靶基因 |
| 2.4 靶基因BCL2A1的共表达分析 |
| 2.5 靶基因BCL2A1及其共表达网络的GO功能和KEGG通路分析 |
| 2.6 基于BCL2A1预测lncRNA-miRNA-mRNA调控网络 |
| 3 讨论与小结 |
| 第二部分 PNS干预冠心病血瘀证靶基因及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络的临床验证研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象及分组 |
| 1.2 研究设计方法 |
| 1.3 纳/排标准 |
| 1.4 干预方法 |
| 1.5 临床观察指标 |
| 1.6 不良事件处理及数据管理 |
| 1.7 检测治疗前后血浆中靶基因及调控网络表达水平 |
| 1.8 统计方法 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 试验完成情况 |
| 2.2 基线统计情况 |
| 2.3 疗效性指标统计分析 |
| 2.4 安全性指标统计分析 |
| 2.5 血浆中lncRNA-miRNA-mRNA表达水平 |
| 3 讨论与小结 |
| 第三部分 基于RNA干扰技术研究PNS调控lncRNA-miRNA-mRNA网络的作用机制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 H_2O_2最佳造模浓度 |
| 2.2 PNS最佳作用浓度及时间 |
| 2.3 lncR CTB-114C7.4敲降慢病毒筛选结果 |
| 2.4 qRT-PCR检测结果 |
| 2.5 WB检测蛋白水平 |
| 2.6 细胞凋亡检测结果 |
| 2.7 TEM观察自噬小体 |
| 2.8 细胞自噬流检测结果 |
| 3 讨论与小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附件 |
（2）通冠胶囊及其有效成分丹参酚酸B治疗心梗后心衰的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 心肌梗死西医研究进展 |
| 一、流行病学 |
| 二、心肌梗死及心脏重构的机制 |
| 三、目前治疗手段及新的治疗方向 |
| 第二节 丹参酚酸治疗心血管疾病研究进展 |
| 一、丹参酚酸的临床研究 |
| 二、丹参酚酸抗动脉粥样硬化及保护血管功能的机制 |
| 三、丹参酚酸的心脏保护作用及机制 |
| 四、丹参酚酸是基质金属蛋白酶的抑制剂 |
| 五、总结 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 通冠胶囊对心梗后心衰大鼠的实验研究及机制探索 |
| 一、材料和方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、研究局限性 |
| 五、结语 |
| 第二节 丹参酚酸B对心梗后心衰大鼠的实验研究及机制探索 |
| 一、材料和方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（3）舒心方干预冠心病合并焦虑、抑郁的临床疗效观察（论文提纲范文）
| 英文词汇缩略 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1.临床资料 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除及脱落标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 临床分组方法 |
| 2.2 治疗方法 |
| 3.观察指标及疗效评定 |
| 3.1 观察指标 |
| 3.2 疗效指标 |
| 4.统计分析 |
| 5.结果 |
| 5.1 病例选择与入组 |
| 5.2 一般资料比较 |
| 5.3 两组治疗前和治疗1个月、2个月及3个月后焦虑评分比较 |
| 5.4 两组治疗前、治疗1个月、2个月及3个月后抑郁评分比较 |
| 5.5 两组治疗前、治疗1个月、2个月及3个月后中医证候积分比较 |
| 5.6 两组治疗3个月后中医证候有效率比较 |
| 5.7 安全评价 |
| 6.讨论与分析 |
| 6.1 西医对冠心病合并焦虑、抑郁的认识 |
| 6.2 中医对冠心病合并焦虑、抑郁的认识 |
| 6.3 舒心方治疗气血瘀滞型冠心病合并焦虑、抑郁的机理 |
| 6.4 结语、问题与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录一 病例观察表 |
| SAS(焦虑自评量表) |
| SDS(抑郁自评量表) |
| 中医证候分级量化标准 |
| 附录二 文献综述 |
| 综述1 双心疾病的中医药研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2 浅析病毒性心肌炎的中医药治疗进展 |
| 参考文献 |
| 附录三 医学伦理 |
（4）生脉养血保心汤治疗冠心病稳定型心绞痛（气阴两虚兼瘀型）的临床研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 临床研究 |
| 一、临床资料 |
| 1.病例来源 |
| 2.诊断标准 |
| 3.病例选择标准 |
| 4.临床分组 |
| 5.治疗方案 |
| 6.观察指标 |
| 7.数据处理 |
| 二、资料分析 |
| 1.一般资料分析 |
| 2.疗效性资料分析 |
| 3.安全性及不良反应 |
| 讨论 |
| 一、现代医学对冠心病的认识 |
| 二、生脉养血保心汤的方药分析及现代药理研究 |
| 三、临床疗效分析 |
| 四、安全性评价 |
| 参考文献 |
| 综述 冠心病稳定型心绞痛研究概况 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 附件 |
（5）搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤血管内皮功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤血管内皮炎症因子的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注血管内皮细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（6）瓜蒌薤白半夏汤加味联合前列地尔对冠心病PCI术后心肌微循环的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分:理论研究 |
| 1、中医病理产物在冠心病中研究进展 |
| 1.1 中医“痰邪”在冠心病的病理内涵 |
| 1.2 中医“瘀邪”在冠心病的病理内涵 |
| 1.3 痰瘀型胸痹的现代研究 |
| 2、中医对冠心病心肌微循环的研究 |
| 3、冠心病心肌微循环的治疗 |
| 3.1 中医治疗 |
| 3.2 西医治疗 |
| 4、基于循证医学对“化瘀祛痰”类中药改善胸痹PCI术后微循环的研究 |
| 4.1 资料与方法 |
| 4.2 文献检索结果 |
| 4.3 Meta分析结果 |
| 4.4 讨论 |
| 第二部分:临床实验 |
| 1、临床资料与研究方法 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究目的 |
| 1.3 诊断标准 |
| 1.4 病例纳入标准与排除标准 |
| 1.5 试验方法 |
| 1.6 观察项目 |
| 1.7 统计方法 |
| 2、结果与分析 |
| 3、讨论 |
| 3.1 立法思想 |
| 3.2 组方解析 |
| 3.3 前列地尔在改善微循环的研究 |
| 3.4 “瓜蒌-薤白”与前列地尔在心肌缺血预适应的相关性研究 |
| 3.5 心肌微循环的现代研究与中医“痰瘀”相关性 |
| 3.6 “化瘀祛痰”在改善心肌微循环的研究 |
| 3.7 心肌微循环的评估 |
| 4、不足与展望 |
| 第三部分 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附表1 痰瘀型胸痹中医证候疗效评价量表 |
| 附表2 中英文缩略词表 |
| 综述 冠心病心肌微循环障碍诊疗新进展概述 |
| 1、发生机制 |
| 2、主要评估方法 |
| 2.1 冠脉造影 |
| 2.2 血管内多普勒超声技术 |
| 2.3 微循环阻力指数 |
| 2.4 心脏磁共振显像 |
| 2.5 心脏核磁灌注成像 |
| 3、心肌微循环障碍的主要改善方法 |
| 3.1 经皮冠状动脉介入治疗 |
| 3.2 中医药治疗 |
| 3.3 其他 |
| 4、展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间主要的研究成果 |
（7）双参通冠胶囊工艺放大过程中影响因素及控制方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 文献综述 中药生产中试化学成分稳定性研究综述 |
| 1. 中药化学成分稳定性影响因素研究进展 |
| 2. 中试研究的意义及其对化学成分稳定性的影响 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 双参通冠胶囊中主要成分HPLC分析方法的建立 |
| 第二章 双参通冠胶囊中影响化学成分因素研究 |
| 第三章 双参通冠胶囊小试、中试比较研究 |
| 第三部分 讨论与结论 |
| 1. 双参通冠胶囊中主要成分HPLC分析方法的建立 |
| 2. 双参通冠胶囊影响化学成分因素研究 |
| 3. 双参通冠胶囊小试、中试比较研究 |
| 4. 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）心梗后纤维化心肌ECM蛋白表达谱构建及水蛭素的干预效应研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 ECM重建与心肌梗死后心肌纤维化的发生机制 |
| 参考文献 |
| 综述二 心肌梗死后心肌纤维化的早期识别与临床干预 |
| 参考文献 |
| 综述三 水蛭及其有效成分干预心血管疾病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 研究一 心肌梗死后纤维化心肌ECM蛋白表达谱的构建与生信分析 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 研究二 水蛭素调节ECM表达干预大鼠心梗后心肌纤维化的效应机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 研究三 水蛭素干预Ang Ⅱ诱导乳鼠心肌成纤维细胞ECM表达的机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 基金项目 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 攻读博士学位期间发表论文 |
| 附件 |
（9）冠通方治疗PCI术后再发心绞痛的临床观察及对凝血纤溶系统影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 冠心病PCI术的发展历程及现状 |
| 1.2 冠心病PCI术后面临的问题 |
| 2 中医学对冠心病心绞痛的认识 |
| 2.1 冠心病心绞痛的命名 |
| 2.2 中医学对冠心病心绞痛病因病机的认识 |
| 3 PCI术后再发心绞痛与凝血纤溶系统的关系 |
| 3.1 凝血纤溶系统失衡与血栓形成的作用机制 |
| 3.2 凝血纤溶指标与PCI术后血栓形成的关系 |
| 3.3 血栓形成与PCI术后再发心绞痛的关系 |
| 4 调节凝血纤溶系统在冠心病治疗中的应用研究 |
| 5 西医学对PCI术后再发心绞痛的临床研究 |
| 6 中医学对PCI术后再发心绞痛的临床研究 |
| 7 中药在凝血纤溶系统中的临床研究 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 样本量估算及病例来源 |
| 1.2 研究分组 |
| 1.3 研究方法 |
| 1.4 诊断标准 |
| 1.4.1 西医诊断标准 |
| 1.4.2 中医胸痹诊断标准 |
| 1.5 纳入标准 |
| 1.6 排除标准 |
| 1.7 终止试验标准 |
| 1.8 剔除、脱落病例标准 |
| 1.9 观测指标 |
| 1.9.1 疗效性观测及判定标准 |
| 1.9.2 安全性观测 |
| 2 统计学方法 |
| 3 结果分析 |
| 3.1 纳入病例基本情况 |
| 3.1.1 性别分布 |
| 3.1.2 年龄分布 |
| 3.1.3 支架植入数分布 |
| 3.2 研究结果 |
| 3.2.1 心绞痛疗效比较 |
| 3.2.2 心绞痛发作情况比较 |
| 3.2.3 硝酸甘油减停情况比较 |
| 3.2.4 治疗前后SAQ评分比较 |
| 3.2.5 凝血纤溶系统指标比较 |
| 3.2.6 不良事件与安全性评价 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 冠心病流行病学现状 |
| 2 从中医角度认识与治疗PCI术后再发心绞痛 |
| 3 冠通方治疗PCI术后再发心绞痛的病理研究 |
| 3.1 冠通方的组方原理及现代药理研究 |
| 3.2 冠通方治疗冠心病的临床研究 |
| 4 研究结果与分析 |
| 4.1 心绞痛疗效比较分析 |
| 4.2 心绞痛发作情况比较分析 |
| 4.3 硝酸甘油用药情况分析 |
| 4.4 治疗后生活质量评估分析 |
| 4.5 凝血纤溶系统指标分析 |
| 5 安全性分析 |
| 6 问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录表 |
| 附录1 心绞痛严重程度分级 |
| 附录2 冠心病心绞痛诊断标准 |
| 附录3 中医胸痹诊断标准 |
| 附录4 西雅图心绞痛量表(SAQ) |
| 附录5 实验室指标检测方法 |
| 缩略词表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（10）芪参益气滴丸对冠心病PCI术后患者（气虚血瘀型）心功能及心绞痛疗效观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1、资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 疗效判定 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 一般资料对比 |
| 2.2 研究结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 现代医学对PCI的认识 |
| 3.2 祖国医学对PCI的认识 |
| 3.3 芪参益气滴丸组方分析及药理研究 |
| 3.4 疗效评价 |
| 4 结论 |
| 5 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
四、益冠胶囊抗血栓作用的实验研究（论文参考文献）
- [1]三七总皂苷治疗冠心病血瘀证的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络机制研究[D]. 董艳. 中国中医科学院, 2020(01)
- [2]通冠胶囊及其有效成分丹参酚酸B治疗心梗后心衰的作用及机制研究[D]. 潘文君. 广州中医药大学, 2020(06)
- [3]舒心方干预冠心病合并焦虑、抑郁的临床疗效观察[D]. 王国锋. 上海中医药大学, 2019(03)
- [4]生脉养血保心汤治疗冠心病稳定型心绞痛（气阴两虚兼瘀型）的临床研究[D]. 任盼宁. 山东中医药大学, 2019(06)
- [5]搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究[D]. 姜丹. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [6]瓜蒌薤白半夏汤加味联合前列地尔对冠心病PCI术后心肌微循环的研究[D]. 秦伟彬. 广西中医药大学, 2019(03)
- [7]双参通冠胶囊工艺放大过程中影响因素及控制方法研究[D]. 孙锦. 中国中医科学院, 2019(01)
- [8]心梗后纤维化心肌ECM蛋白表达谱构建及水蛭素的干预效应研究[D]. 于永慧. 中国中医科学院, 2019(12)
- [9]冠通方治疗PCI术后再发心绞痛的临床观察及对凝血纤溶系统影响[D]. 苗鸿杏. 广西中医药大学, 2019(03)
- [10]芪参益气滴丸对冠心病PCI术后患者（气虚血瘀型）心功能及心绞痛疗效观察[D]. 王昆. 安徽中医药大学, 2019(02)
标签：丹参滴丸的作用与功效; 稳定型心绞痛; 丹参滴丸; 成分分析; 冠心病的治疗方法;