一、猪链球菌引起人猪共患病22例临床分析（论文文献综述）
贺子翔,夏昕,覃玉芳,杨浩,覃迪,向星宇,胡俊忠,湛志飞[1]（2020）在《湖南省首例猪链球菌14型人源分离株鉴定及毒力基因分析》文中提出目的了解湖南省首例猪链球菌14型菌株的生物学性状及病原学特征。方法采集患者的关节液接种到血琼脂平板,进行猪链球菌的分离培养,通过镜检、生化和血清凝集试验确认后,用聚合酶链反应（PCR）检测猪链球菌种特异性基因（16S rRNA）、2型荚膜多糖基因（cps2J）、14型荚膜多糖基因（cps14J）以及相关毒力基因:溶菌酶释放相关蛋白（mrp）、溶血素（sly）、纤粘连蛋白结合蛋白（fbps）、胞外因子（ef）、谷氨酸脱氢酶（gdh）、毒力相关序列orf2基因（orf2）和甘油醛一3一磷酸脱氢酶的编码基因（gapdh）。结果患者的关节液中分离到猪链球菌14型菌株,种特异性基因16S rRNA阳性,荚膜多糖基因cps2J阴性、cps14J阳性,毒力基因mrp阴性,其余sly、fbps、ef、gdh、orf2、gapdh均为阳性。结论湖南省已经出现了猪链球菌14型的流行,并携带多种毒力基因,需密切关注其流行趋势。
熊景峰[2]（2019）在《HPS、SS2和Pm的三重PCR检测方法建立及三联灭活疫苗的研究》文中进行了进一步梳理近年来,广东养猪业的生产规模扩大,发展速度加快,但副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）、猪链球菌2型（Streptococcus suis Type 2,SS2）和猪多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）这三种常见的病原体继续对养猪业造成了重大损害,制约着养猪业的健康发展。因此,对HPS、SS2和Pm的流行现状进行研究,建立快捷简便的检测方法,研发制备出能提供较高免疫保护力的新型三联灭活疫苗显得尤为重要。本实验针对传统的鉴定方法,耗费的时间长、步骤较繁琐等缺点,通过比较分析荚膜多糖抗原区的合成基因簇的特征,分别根据HPS的tbp B、SS2的CPS2J和Pm的KMT1保守区间,各自设计出三对引物,建立了用于鉴定三种细菌的单重PCR方法。HPS、SS2和Pm能够检测出DNA浓度的最低含量分别为2.0 pg/μL、2.6 pg/μL、4.2 pg/μL,有较高的敏感度;而且不与其他细菌反应,具有较好的特异性。在单重PCR成功建立的基础上,将筛选出来的HPS、SS2和Pm三对引物进行不同浓度的稀释、退火温度等条件的摸索,建立25μL体系的三重PCR检测方法。此三重PCR鉴定方法,对胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌、猪肺炎支原体、金黄色葡萄球菌、猪支气管败血波氏杆菌不反应,具有较好的特异性。在灵敏性实验上,三重PCR检测样品DNA浓度的最低含量为20 pg/μL,敏感度较高。在重复性实验中,均能检测出三种细菌的目的条带,成功率为100%,证明重复性好。通过对广东地区HPS、SS和Pm三种细菌的流行性调查,选择毒力较强、免疫原性好的优势血清型作为三联灭活疫苗的候选菌株。其中,HPS选血清4型;SS选SS2型;Pm则选择导致猪肺疫的A群。对HPS4、SS2和Pm A进行基础研究,得出HPS4于37℃的恒温振荡器中,以200 r/min震荡培养12 h,活菌数达到最大值,此时OD600约为0.46,活菌数约为1.32×109 CFU/m L;而SS2的培养时间为10 h,对应的OD600约为0.33,活菌数约为5.0×108 CFU/m L;Pm A的培养时间是8 h,对应的OD600约为0.39,活菌数为2.8×109 CFU/m L。以测得的三种细菌对应时间点的OD600和活菌数,作为培养疫苗菌株的时间依据。选用Balb/c小白鼠作为动物模型,进行毒力实验、稳定性实验,筛选出强毒菌株HPS4-HZ、SS2-SH和Pm A-YJ,并且计算出HPS4-HZ的LD50为2.03×109 CFU/m L;SS2-SH的LD50为8.9×108 CFU/m L;Pm A-YJ的LD50为3.98 CFU/m L。将培养好的HPS4-HZ、SS2-SH和Pm-YJ菌液,以5000 r/min的速度离心10 min,将上清液去除干净,然后用等量的0.85%生理盐水重悬沉淀,再加入终浓度至0.2%的甲醛溶液,灭活24 h,最后加入灭菌的氢氧化铝胶佐剂,摇匀混合制备成三联灭活疫苗。按照免疫程序对Balb/c小白鼠皮下注射三联灭活疫苗,小鼠没有出现死亡的情况,精神状态良好,免疫的部位没有出现炎症反应,证明疫苗具有良好的安全性。灭活疫苗对小鼠的免疫保护效力实验,表明HPS4灭活疫苗对小鼠的保护率达到90%,SS2灭活疫苗达到100%,Pm A灭活疫苗达到90%。而三联灭活疫苗对HPS4保护率达到90%,对SS2和Pm A的保护率均达到了80%。实验证明该三联灭活疫苗具有良好的免疫效果,可为小鼠提供高度的免疫保护。
孙珂[3]（2019）在《猪链球菌4型分离株及其转录调控因子GalR生物学特性研究》文中提出猪链球菌（Streptococcus suis）是一种重要的人畜共患病病原,它严重威胁人类的健康,阻碍全球养猪业的经济发展。可根据细菌荚膜多糖的不同分为33个血清型（1-31型,33型和1/2型）,其中,猪链球菌2型致病性最强。研究报道,猪链球菌4型（Streptococcus suis serotype 4,SS4）可导致人和动物发病甚至死亡,并且在我国已成为主要的流行血清型。目前,国内外对SS4的研究很少,本研究对中国不同地区的SS4进行系统的病原生物学特性分析,为SS4的防控提供参考。同时,本实验室前期通过比较蛋白组学分析SS4强弱毒株的菌体蛋白表达谱,筛选出了转录调控因子GalR,对其进行生物信息学分析及原核表达,为进一步研究GalR蛋白生物学特性奠定基础。成功构建缺失株SH1510ΔGalR,由此对GalR的生物学特性进行研究分析,为进一步研究GalR对半乳糖代谢途径的调控及其致病机理提供一定的理论依据。研究分为3部分:1.猪链球菌4型分离株生物学特性研究对来自我国不同地区的10株SS4进行多位点序列分型、毒力因子检测、动物致病性试验。结果显示,6株为ST850型,3株为ST1006型,1株为ST94型,结合菌株分离地区分析发现,广东地区菌株和江苏地区菌株有较高同源性,江沪地区菌株表现为遗传多样性;10株菌株均检测到了gdh、gapdh和orf2,6株检测到sly,4株检测到fbps,根据毒力因子谱发现共有3个毒力基因型,gdh+sly+gapdh+orf2+型有6株,gdh+fbps+gapdh+orf2+型有3株,gdh+sly+fbps+gapdh+orf2+型仅有1株;动物致病性试验表明,SH1510菌株对小鼠致死率最高,并可导致新西兰兔死亡。2.猪链球菌4型GalR基因的生物信息学分析及原核表达使用相关生物信息学分析网站对转录调控因子GalR进行蛋白序列同源性检索、功能结构域检索、信号肽预测、跨膜区预测。利用表达载体pET32a对GalR基因进行原核表达,SDS-PAGE分析蛋白可溶性,Western blotting鉴定蛋白反应原性。结果显示,SH1510菌株GalR蛋白与一些其它细菌GalR家族蛋白氨基酸序列具有一定的同源性。结构域检索发现N-末端具有HTH基序的小DNA结合结构域,C-末端具有调节配体结合结构域,中间有连接这两个功能结构域的连接子。GalR蛋白无信号肽,无跨膜区。SDS-PAGE结果显示成功的表达了GalR蛋白,并且可溶性表达达到99%以上,同时成功纯化了GalR蛋白。Western blotting结果表明GalR蛋白具有良好的反应原性。3.SH1510菌株GalR基因缺失株的构建及生物学特性分析利用同源重组的方法构建缺失株SH1510ΔGalR,通过PCR和Western blotting鉴定缺失株构建成功后,对亲本株和缺失株进行革兰氏染色和不同糖利用率的比较,以BALB/c小鼠为试验动物进行了小鼠致病性试验、竞争感染试验,并以健康猪的全血模仿体内环境进行了全血存活试验。结果表明,GalR基因缺失后,SH1510的细菌形态无显着变化;在葡萄糖和蔗糖为糖原条件下,不影响细菌的生长,在D-半乳糖为糖原的条件下,导致细菌生长速率和OD600值降低;小鼠致病性降低1.62倍;体内定植能力极显着降低（P<0.01）;全血存活能力显着降低（P<0.05）。
李燕华,韦俊杰,范秉林,姜炳坚[4]（2018）在《猪链球菌脑膜炎5例报告》文中提出人猪链球菌病是由猪链球菌感染人而引起的人畜共患性疾病,世界动物卫生组织将猪链球菌病列为B类疫病[1-2],我国将其列为二类动物疫病[3]。人颅内猪链球菌感染通常表现为化脓性脑膜炎,伴有耳聋、运动功能紊乱,重症患者发生中毒性休克综合征,导致多脏器衰竭及死亡[1-4]。猪链球菌是重要的人畜共患病原菌,其感染病例在世界范围内广泛分布。自20世纪50年代以来,由猪链球菌引发的猪链球菌病在所有养猪业发达的国家均有报道,
高雪萍[5]（2018）在《江苏某市屠宰场猪链球菌流行病学调查及NCLs菌株病原特性分析》文中研究说明猪链球菌（Streptococcus suis）是猪链球菌病的主要病原,给养猪业造成严重的经济损失。此外,猪链球菌还会感染人,是重要的人畜共患病病原菌。基于荚膜多糖抗原性的不同,猪链球菌可分为多种血清型和部分未定型菌株;其中,能感染人的血清型有2、4、5、9、14、16、21、24等。近年来,发现了 21种猪链球菌新的荚膜多糖相关基因簇（NCLs）,这些含NCLs的菌株无法用原有针对33种血清型的抗体分型;目前对这些含有NCLs菌株的病原特性了解还非常缺乏。健康猪携带猪链球菌的阳性率较高,且血清型多而复杂,是潜在的传染源,特别是那些能感染人的血清型更具公共卫生意义。因此,对屠宰场健康猪进行猪链球菌带菌情况监测,是猪链球菌病流行病学调查的重要方法之一。通过对江苏某市屠宰场健康猪群进行猪链球菌流行病学调查并分析含有NCLs菌株的病原特性,为了解该地区猪链球菌病的发病规律、制定该地区猪链球菌病的防控策略、进一步揭示猪链球菌病原特性提供参考。1江苏省某市屠宰场猪链球菌流行病学调查分别于2017年9月至12月从江苏省某市QX屠宰场采集生猪扁桃体184份。以看家基因谷氨酸脱氢酶基因gdh和DNA修复蛋白基因recN作为猪链球菌种特异性基因进行PCR扩增,二者均为阳性的扁桃体占76.6%（141/184）。针对上述8种感染人血清型,采用血清型特异性引物,应用PCR方法对猪链球菌阳性的扁桃体样品进一步分型,2、4、5、9、14、16、21、24型的检出率分别为 27.7%（51/184）、27.7%（51/184）、23.4%（43/184）、25%（46/184）、0（0/184）、28.8%（53/184）、12.5%（23/184）、1.6%（3/184）。对猪链球菌阳性的扁桃体样本分离单菌落,共获得178株猪链球菌。纯化后单菌落经PCR分型,未知血清型菌株15株,可定型菌株163株,分属20种血清型,其中分离率最高的为31型占12.4%（22/178）,其余血清型分离率分别为:9型占 11.8%（21/178）、16型占 10.1%（18/178）、4型占 10.1%（18/178）、2 型占 9.0%（16/178）、3 型占 6.7%（12/178）、5 型占 6.2%（11/178）、7 型占 5.1%（9/178）、28 型占 3.9%（7/178）、8 型占 3.4%（6/178）、21 型占 2.2%（4/178）、11 型占 1.7%（3/178）、12 型占 1.7%（3/178）、23 型占 1.7%（3/178）、25 型占 1.7%（3/178）、30 型占 1.7%（3/178）、15 型占 1.1%（2/178）、13 型占 0.6%（1/178）、29 型占 0.6%（1/178）。2含有新的荚膜多糖相关基因簇菌株病原特性分析以21种NCLs特异性引物对15株未定型菌株进行PCR分型,鉴定出9株属于NCLs,分别为:NCL-1（WUSS236、WUSS294、WUSS356）、NCL-4（WUSS284、WUSS351）、NCL-3（WUSS421）、NCL-5（WUSS234）、NCL-11（WUSS423）和NCL-17（WUSS422）。通过多位点序列分型方法,WUSS421属于ST 258,其它8株NCLs菌株为新的ST型,表明这些菌株与目前主要流行致病菌株亲缘关系较远。检测这些NCLs菌株对青霉素G钠、阿莫西林、头孢噻呋钠、红霉素、替米考星、盐酸林可霉素、盐酸万古霉素、替考拉宁、恩诺沙星、氟苯尼考10种常用抗生素的敏感性,表明多重耐药的情况严重,其中WUSS294、WUSS351、WUSS421对6种抗生素耐药,WUSS236、WUSS422对5种抗生素耐药,WUSS284、WUSS356对4种抗生素耐药,WUSS234、WUSS423对3种抗生素耐药,另有WUSS234、WUSS284、WUSS351、WUSS421、WUSS422和WUSS423对氟苯尼考中度敏感。斑马鱼毒力试验显示,上述菌株的毒力均低于猪链球菌2型毒力参考株SC070731（对斑马鱼半数致死量为8.6×105CFU/尾）,其中3株毒力最强的NCLs猪链球菌WUSS234、WUSS351和WUSS422对斑马鱼半数致死量分别为1.2 × 107 CFU/尾,1.1× 106 CFU/尾和2 ×107 CFU/尾。综合MIC试验和斑马鱼试验结果分析,WUSS351菌株对斑马鱼的半数致死量与SC070731相近,且对6种抗生素耐药,对氟苯尼考中度敏感,值得关注。
王颖[6]（2017）在《天津地区猪链球菌2型流行情况调查及耐药性检测》文中认为猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2,SS2）是猪链球菌病的重要病原体。猪链球菌感染猪,主要表现为淋巴脓肿、脑膜炎、关节炎、败血症等,可造成相关从业人员感染,严重可至感染者死亡。为了解SS2在天津养猪场的感染和流行情况,本研究从天津市养猪场采集猪的鼻腔分泌物及其血清样品,首先对血清进行了SS2抗体ELISA检测,对检出的阳性样品其相应的鼻腔分泌物又进行了该病原的细菌学分离鉴定、生化鉴定及SS2的PCR鉴定,最后对确定为SS2的菌株进行药敏试验分析,从而揭示当前天津市猪链球菌2型的流行及耐药性情况。为了进行病原的微生物学鉴定,从天津市10个规模养殖场、养殖农户及散养户抽检的480份样品中分离到18株菌,经过培养特性、染色特点、显微镜观察和生化试验等鉴定手段,确定其均为猪链球菌2型。对分离得到的18株菌进行了抗革兰氏阳性细菌的药物药敏试验,结果显示:18株菌对庆大霉素、头孢噻肟、环丙沙星、头孢曲松钠、氧氟沙星、恩诺沙星是100%耐药;17株菌对强力霉素及阿米卡星耐药,9株菌对痢菌净耐药。且18株菌中均为多重耐药,有7株是9重耐药,11株为8重耐药。综合分析药物药敏结果,提示猪链球菌2型耐药严重,其中对庆大霉素、头孢噻肟、环丙沙星、头孢曲松钠、氧氟沙星、恩诺沙星有很强的耐药性。本研究对猪链球菌2型耐药情况下抗生素的合理使用提供了参考。即在兽医师指导下,合理选用敏感性较强的磺胺类、氯霉素类、大环内酯类抗生素药物进行治疗,可以有效防治猪链球菌病,降低出现耐药性菌株的机率。
李进福[7]（2017）在《河南省猪呼吸道隐性感染病原菌耐药分子特征》文中指出猪呼吸道疾病是常见的多发性疾病,尤其是猪隐性呼吸道感染,由于症状不明显,易引起误诊或漏诊,而导致猪只长期处于亚健康状态,从而对养猪业危害较大。本试验对河南省8个不同地市114份猪源肺脏进行病原菌分离,并采用微量肉汤稀释法、PCR及测序分析代表性受试菌对常见药物的耐药表型特征及其耐药基因分子特性,以期为临床合理有效防控猪隐性呼吸道感染提供参考。本试验在114份猪肺脏（有明显病变）中共分离菌株245株,其中革兰阳性菌175株（71.43%）,包括葡萄球菌70株,芽孢杆菌60株,链球菌12株,及其他33株;革兰阴性菌70株（28.57%）,包括大肠埃希菌31株,肺炎克雷伯菌19株,其他阴性菌20株。说明临床导致猪呼吸道隐性感染的细菌菌种类较多。245株分离菌中有20.41%（50/245）为金黄色葡萄球菌、猪链球菌等致病菌,其中35株为金黄色葡萄球菌,占致病菌总数的70%,推测金黄色葡萄球菌为猪呼吸道隐性感染主要致病菌之一;53.41%（131/245）为条件致病菌,其中大肠埃希菌分离数量最多,说明其在呼吸道疾病的继发及混合感染起到一定作用。此外,在245株分离菌中共有133株为人畜共患（条件性）致病菌,具有重要的公共卫生学意义。耐药表型检测发现,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及葡萄球菌多重耐药明显,三类菌均对阿莫西林、氨苄西林高度耐药,对阿米卡星、庆大霉素高度敏感,敏感率在80%100%。对环丙沙星、恩诺沙星、头孢吡肟较敏感,敏感率在77.14%91.43%。而芽孢杆菌除了对泰妙菌素耐药明显(耐药率达（35.29%63.64%）,对其他常见药物较为敏感。同时,我们发现不同种类细菌对四环素类药物的耐药有明显差异,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和葡萄球菌对四环素的耐药明显较多西环素严重（P<0.01）,且大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对四环素类药物的耐药率极显着高于葡萄球菌（P<0.01）。耐药基因检测发现,尽管大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和葡萄球菌的耐药表型特征趋于一致,但其携带的耐药基因有明显差异。大肠埃希菌主要检出TEM（61.29%）、tetA（87.10%）、tetM（54.84%）和flo R;肺炎克雷伯菌主要携带TEM（73.68%）、SHV（89.47%）、tetA（78.95%）、tet O（42.11%）和flo R;葡萄球菌的tetA（32.86%）、tetB（14.29%）、tet C（10.0%）、tetM（10.0%）、fexA（47.14%）、lsaA（35.71%）和lsaE（11.42%）检出率较高,而芽孢杆菌对泰妙菌素的耐药主要由vgaB（40.74%）和lsa E（14.63%）介导。综上所述,河南地区猪隐性呼吸道疾病肺脏携带细菌种类复杂多样,且73.82%（181/245）的分离菌有一定致病性,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、葡萄球菌及芽孢杆菌是最常见的四种分离菌,且前三种菌对临床常见药物有一定耐药,携带多重耐药基因;而芽孢杆菌除对泰妙菌素有明显耐药外,对其他药物敏感性较高。
徐闻逸[8]（2016）在《猪链球菌2型类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶A介导的补体逃逸机制研究》文中指出先天性免疫系统作为抵御致病菌入侵的第一道防线,能够保护宿主直到获得性免疫系统被激活。补体系统作为先天免疫系统中至关重要的组成部分,能迅速的识别并通过不同的机制清除病原微生物。而致病菌也会进化出了一系列补体逃逸（complement evasion）机制逃避补体的攻击,这些机制包括:干预补体激活的起始、干预补体转化酶、干预C3及其裂解产物、干预补体激活的效应阶段、与补体调控因子互作和干预补体受体等。猪链球菌2型（Streptococcus suis serotype 2,SS2）是一种重要的人兽共患病原菌,可以引起猪的败血症、脑膜炎、肺炎、关节炎等,还能引起人的脑膜炎和中毒性休克综合症。SS2强毒株可以逃逸免疫系统的监视而在感染宿主中血液循环和组织中存活,引起败血症,但其免疫逃逸的机制尚缺乏深入研究。补体C3a和C5a是重要的趋化因子,在炎症反应和调理吞噬中发挥重要作用。为了研究SS2的补体逃逸机制,本研究分别以C3a和C5a为诱饵,通过细菌双杂交技术从SS2的分泌蛋白和膜蛋白中筛选能与C3a和C5a相互作用的蛋白质,并深入研究了其中两种类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶A（Subtilisin-like serine protease A,SspA）介导的补体逃逸机制。主要研究结果如下:1.与C3a、C5a互作的SS2分泌蛋白和细胞表面锚定蛋白的筛选:将补体C3a和C5a克隆在细菌双杂交系统中的pBT质粒上,与本实验室已有的24个SS2分泌蛋白和细胞表面锚定蛋白基因文库进行细菌双杂交筛选。结果发现其中有13个蛋白质与C3a可能存在相互作用,它们是SSU050179、SSU050214、SSU050246、SSU050274、SSU050802、SSU050812、SSU051213、SSU051214、SSU051539、SSU051664、SSU052065、SSU052100 和 SSU052104;有 5 个蛋白质与 C5a 可能存在相互作,它们是 SSU050246、SSU050431、SSU051213、SSU051293 和SSU052100。2.SspA与C3a、C5a相互作用的验证:将SS2中注释为SspA的两个蛋白质SspA-1（NJAUSSU0853,其同源基因在SSU05菌株中因终止突变而注释为SSU050811/0812）和SspA-2（SSU051982）进行了结构域分析并分别构建表达纯化了它们的活性结构域。ELISA实验证实了 SspA-1和SspA-2都与C3a相互作用,而C5a只能与SspA-2相互作用。3.SspA对C3a、C5a的切割作用:为了研究SspA-1和SspA-2与C3a、C5a互作后能否水解C3a和/或C5a,我们分别合成了氨基端带有DABCYL基团和羧基端带有EDANS基团的人C3a和C5a荧光底物蛋白,荧光共振能量转移（FRET）实验结果发现,SspA-1和SspA-2的C5a肽酶活性结构域都可以切割C5a,但未表现出浓度依赖性;SspA-1和SspA-2的C5a肽酶活性结构域也能切割C3a,并表现出浓度依赖效应。4.SspA对C3a、C5a趋化作用的影响:通过体外单核细胞趋化实验发现,分别与SspA-1和SspA-2孵育过的C3a和C5a的趋化能力显着降低（p<0.01）,证明SspA-1和SspA-2均具有抑制C3a、C5a趋化作用的能力。综上,SS2可以分泌两种类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶A（SspA-1和SspA-2）,它们均能切割补体C3a、C5a,作为C3a肽酶和C5a肽酶均能抑制C3a和C5a的趋化作用,逃逸补体系统的监视。
黄革,李建明[9]（2013）在《人感染猪链球菌病流行态势》文中研究指明猪链球菌病是由多种不同菌群的链球菌感染引起的人兽共患传染病,在北欧和东南亚的畜间广泛流行。人感染猪链菌病以散发为主,我国于1998年和2005年发生了人感染猪链球菌病暴发疫情,发病人数占全世界病例总数的半数以上。文章主要对猪链球菌病病原学特性和人感染猪链球菌病的临床表现特征、流行情况、流行病学特征以及流行环节、流行因素等方面的最新研究进展进行介绍,为今后该病的有效诊断、防治及研究提供参考。
王楷宬[10]（2011）在《猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇的分析及其在血清型鉴定中的应用》文中提出荚膜是某些细菌在细胞壁外周产生的一种黏液样物质。荚膜多糖对猪链球菌的感染与致病有非常重要的作用,根据荚膜多糖抗原性不同可将猪链球菌分成33个血清型,每个血清型的荚膜多糖都是由糖苷键连接寡糖重复单元而成的结构不同的多糖。荚膜多糖的产生是一个复杂过程,是细菌基因组中多个基因表达的糖基转移酶、乙酰转移酶、多糖合成酶和翻转酶等共同作用的结果,这些基因被称为荚膜多糖合成相关基因簇。研究此基因簇的形式和组成,能够更好地理解猪链球菌荚膜多糖的合成途径、多样性产生原因等；并且可在此基因簇中筛选血清型特异性基因,建立适于大量样品检测的分子生物学定型方法。结合荚膜多糖的组成,也将为揭示某些血清型交叉抗原性产生的原因奠定基础。1.猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇保守区的克隆与分析在分析已知的猪链球菌1、2、7、9型荚膜多糖合成相关基因簇序列,及其各orf与猪链球菌33个血清型基因组DNA杂交结果的基础上,提出猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇具有与肺炎链球菌相似的盒样（cassette-like）结构的假设。并采用PCR、测序和Southern印迹杂交等方法验证这些假设。结果显示,猪链球菌的荚膜多糖合成相关基因簇确存在与肺炎链球菌相似的盒样结构,5’端的前四个调节相关基因同源性极高,基因簇两端都有保守的侧翼基因,且在3’端的侧翼序列中找到了适于扩增荚膜多糖合成相关基因簇中血清型特异性区域的下游引物所在基因（aroA）。同时分析了各血清型的orfY、orfX、cpsA、cpsB、cpsC、cpsD和aroA的进化关系。2.猪链球菌15个血清型荚膜多糖合成相关基因簇的基因分析通过长片段PCR方法扩增猪链球菌14个血清型（1、3、4、5、7、8、9、10、14、16、19、23、25和1/2型）的荚膜多糖合成相关基因簇内的下游基因,鸟枪法测序并拼接成完整的荚膜多糖合成相关基因簇,并与已知的2型此基因簇相比较。这些血清型的荚膜多糖合成相关基因簇可分为2个组的基因型。血清型特异性基因位于基因簇的中间区域,包含糖基转移酶、乙酰转移酶、磷酸转移酶、氨基转移酶、甘油磷酸转移酶、金属蛋白酶,丙酮酰转移酶、多糖转移酶和翻转酶等。这些基因簇的3’端翻译某些IS转座酶。猪链球菌1、2、14、16和1/2型中,有5个蛋白（NeuA,B,C,D和唾液酸转移酶）与唾液酸的合成直接相关。15个基因簇中所有orf翻译蛋白以TribeMCL算法可归为127个同源组。这些血清型荚膜多糖合成相关基因簇的形式,提示猪链球菌的荚膜多糖是通过Wzy依赖途径合成的。同时,比较15个血清型中具有交叉抗原性的细菌的荚膜多糖合成相关基因簇,探讨猪链球菌荚膜多样性产生的机制。3.猪链球菌3、4、5、8、10、16、19、23、25型等9个血清型PCR检测方法的建立及应用除猪链球菌1（14）,2（1/2）,7和9型外,其余血清型至今无简单快速的PCR检测方法可用,仅能使用耗时费工的血清凝集方法进行定型。随着人和动物感染猪链球菌的血清型越来越复杂,迫切需要建立快速敏感的检测方法来解决临床诊断中的诸多问题。本文基于交叉杂交试验的结果,筛选9个血清型（3、4、5、8、10、16、19、23、25）的血清型特异性基因,并在此基础上建立了这些血清型的PCR检测方法,对199株各血清型的猪链球菌临床分离株进行检测,同时利用血清凝集方法进行定型。这些PCR方法的检测结果与经典的血清凝集方法一致,不仅能检测参考菌株,而且能检测临床分离株,并可直接应用菌液作为模板进行检测,血清学不能鉴别的菌株鉴定中也有一定作用,对猪链球菌的检测、鉴定有重要意义。4.猪链球菌1、2、14、1/2型荚膜多糖的单糖组成比较研究猪链球菌1、2、14和1/2型间存在单向或双向的交叉抗原性,这种交叉抗原性的产生原因至今未被揭示。采用Sephacryl S-300凝胶层析柱对猪链球菌14和1/2型荚膜多糖进行分离纯化,经苯酚-硫酸检测和dot-ELISA辅助鉴定,确定荚膜多糖成分。采用高效凝胶渗透色谱法测定14和1/2型猪链球菌荚膜多糖分子量分别为487.38 kD和512.72 kD。经柱前衍生高效液相色谱法、荧光标记液相色谱法和核磁共振测定14和1/2型猪链球菌荚膜多糖单糖组成分别为：Glc/Gal/GlcNAc/Rha/Neu5Ac （1:2.94:1.35:0.24:0.37）和Glc/Gal/GlcNAc/GalNAc /Rha/Neu5Ac （1:1.67:1.05:0.93:0.72:0.7）.并与已知的猪链球菌1、2型荚膜多糖的单糖组成进行比较分析,发现4种血清型荚膜多糖都具有Glc. GlcNAc.Gal和Neu5Ac,但单糖组成和比列并无明显相似性,这种交叉抗原性可能是由于荚膜多糖的空间结构相似性和（或）细胞表面的其他成分引起的。
二、猪链球菌引起人猪共患病22例临床分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪链球菌引起人猪共患病22例临床分析（论文提纲范文）
（1）湖南省首例猪链球菌14型人源分离株鉴定及毒力基因分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 病例信息 |
| 1.2 菌株来源 |
| 1.3 试剂 |
| 1.4 仪器 |
| 1.5 细菌分离培养 |
| 1.6 革兰氏染色镜检 |
| 1.7 生化鉴定和药物敏感实验 |
| 1.8 血清凝集试验 |
| 1.9 菌株DNA模板提取 |
| 1.10 猪链球菌分子生物学检测 |
| 2 结 果 |
| 2.1 菌落特征 |
| 2.2 革兰氏染色镜检结果 |
| 2.3 生化鉴定 |
| 2.4 药物敏感实验 |
| 2.5 血清凝集试验 |
| 2.6 PCR结果 |
| 3 讨 论 |
（2）HPS、SS2和Pm的三重PCR检测方法建立及三联灭活疫苗的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词或符号表 |
| 1 前言 |
| 1.1 副猪嗜血杆菌的研究概述 |
| 1.1.1 病原学特征 |
| 1.1.2 细菌分型 |
| 1.1.3 流行病学调查 |
| 1.1.4 临床表现和病理变化 |
| 1.2 猪链球菌的研究概述 |
| 1.2.1 病原学特征 |
| 1.2.2 细菌分型 |
| 1.2.3 流行病学调查 |
| 1.2.4 临床表现和病理变化 |
| 1.3 巴氏杆菌的研究概述 |
| 1.3.1 病原学特征 |
| 1.3.2 细菌分型 |
| 1.3.3 流行病学调查 |
| 1.3.4 临床表现和病理变化 |
| 1.4 副猪嗜血杆菌、猪链球菌和多杀性巴氏杆菌疫苗的研究进展 |
| 1.5 研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌种 |
| 2.1.2 实验动物 |
| 2.1.3 主要的试剂 |
| 2.1.4 主要实验仪器和设备 |
| 2.1.5 常用试剂溶液的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细菌复苏 |
| 2.2.2 革兰氏染色镜检 |
| 2.2.3 生化鉴定实验 |
| 2.2.4 细菌PCR鉴定方法的建立 |
| 2.2.5 HPS、SS2和Pm三重PCR鉴定方法的建立 |
| 2.2.6 HPS、SS2和Pm三联灭活疫苗的初步研制 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 菌落形态及特征 |
| 3.1.1 HPS菌落形态及特征 |
| 3.1.2 SS2菌落形态及特征 |
| 3.1.3 Pm菌落形态及特征 |
| 3.2 生化鉴定实验 |
| 3.3 HPS、SS2和Pm的 PCR鉴定方法 |
| 3.4 三重PCR鉴定方法的建立 |
| 3.4.1 HPS、SS2和Pm的引物筛选 |
| 3.4.2 HPS、SS2和Pm单重PCR的退火温度优化 |
| 3.4.3 HPS、SS2和Pm三重PCR的退火温度优化 |
| 3.4.4 HPS、SS2和Pm三重PCR的引物浓度优化 |
| 3.4.5 HPS、SS2和Pm三重PCR的特异性实验 |
| 3.4.6 HPS、SS2和Pm单重PCR的敏感性实验 |
| 3.4.7 HPS、SS2和Pm三重PCR的敏感性实验 |
| 3.4.8 HPS、SS2和Pm三重PCR的重复性实验 |
| 3.5 三联灭活疫苗的初步研究 |
| 3.5.1 HPS4和Pm A的 PCR鉴定实验 |
| 3.5.2 HPS4、SS2和Pm A生长曲线与OD600 值的测定 |
| 3.5.3 HPS4攻毒结果 |
| 3.5.4 SS2攻毒结果 |
| 3.5.5 PmA攻毒结果 |
| 3.5.6 菌株毒力稳定性实验结果 |
| 3.5.7 HPS4-HZ、SS2-SH和 Pm A-YJ毒力实验 |
| 3.5.8 疫苗灭活条件的确立 |
| 3.5.9 疫苗物理性状的检验 |
| 3.5.10 疫苗的无菌检验 |
| 3.5.11 疫苗安全性的检验 |
| 3.5.12 灭活疫苗的免疫效力实验 |
| 3.5.13 三联灭活疫苗的保存期研究 |
| 4 全文讨论与结论 |
| 4.1 讨论 |
| 4.1.1 HPS、SS2和Pm的流行病学 |
| 4.1.2 单重PCR方法的建立 |
| 4.1.3 三重PCR方法的建立 |
| 4.1.4 三联灭活疫苗的初步研制 |
| 4.1.5 疫苗的安全性检查与效果评估 |
| 4.1.6 疫苗的保存期试验 |
| 4.2 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 A HPS、SS2和Pm菌株信息 |
| 附录 B 副猪嗜血杆菌核苷酸序列 |
| 附录 C 猪链球菌 2 型核苷酸序列 |
| 附录 D 猪多杀性巴氏杆菌核苷酸序列 |
| 附录 E 副猪嗜血杆菌 4 型核苷酸序列 |
| 附录 F 猪多杀性巴氏杆菌 A 群核苷酸序列 |
| 附录 G 攻读硕士研究生期间论文发表情况 |
（3）猪链球菌4型分离株及其转录调控因子GalR生物学特性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 猪链球菌病研究进展 |
| 1.1 病原学特征 |
| 1.2 流行病学特征 |
| 1.3 分型方法的研究 |
| 1.4 毒力因子的研究 |
| 1.5 猪链球菌致病机理的研究 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 猪链球菌4型分离株生物学特性研究 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 猪链球菌4型GalR基因的生物信息学分析及原核表达 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 SH1510 菌株GalR基因缺失株的构建及生物学特性分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（4）猪链球菌脑膜炎5例报告（论文提纲范文）
| 1 病历资料 |
| 1.1 病史 |
| 1.2 实验室检查 |
| 1.3 影像学检查 |
| 1.4 治疗及预后 |
| 2 讨论 |
（5）江苏某市屠宰场猪链球菌流行病学调查及NCLs菌株病原特性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 猪链球菌及其危害 |
| 1.1 病原学 |
| 1.2 临床症状 |
| 1.3 感染猪的流行特征 |
| 1.4 感染人的流行特征 |
| 1.5 多基因多位点序列分型(MLST) |
| 1.6 耐药性 |
| 2 猪链球菌血清型分型研究进展 |
| 2.1 35种血清型 |
| 2.2 29种血清型 |
| 2.3 21种猪链球菌新的荚膜多糖相关基因簇(NCLs) |
| 2.4 PCR鉴定 |
| 第二章 江苏省某市屠宰场猪链球菌流行病学调查 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 引物合成 |
| 1.4 猪链球菌选择性培养基配置 |
| 1.5 扁桃体样品的采集 |
| 1.6 细菌的增殖培养 |
| 1.7 核酸模板的制备 |
| 1.8 猪链球菌阳性鉴定 |
| 1.9 2、4、5、9、14、16、21、24血清型猪链球菌鉴定 |
| 1.10 猪链球菌单菌落分离鉴定 |
| 2 结果 |
| 2.1 扁桃体样品猪链球菌鉴定结果 |
| 2.2 扁桃体样品猪链球菌单菌落鉴定结果 |
| 3 讨论 |
| 第三章 NCLs菌株病原特性分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 引物合成 |
| 1.4 菌株NCLs血清型鉴定 |
| 1.5 MLST |
| 1.6 最小抑菌浓度(MIC)试验 |
| 1.7 斑马鱼试验 |
| 2 结果 |
| 2.1 菌株NCLs血清型鉴定结果 |
| 2.2 MLST结果 |
| 2.3 MIC试验 |
| 2.4 斑马鱼试验 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 硕士期间发表文章 |
（6）天津地区猪链球菌2型流行情况调查及耐药性检测（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 猪链球菌2型研究进展 |
| 1.1 猪链球菌2型的概述 |
| 1.1.1 猪链球菌病原的特性 |
| 1.1.2 流行病学特性 |
| 1.1.3 猪链球菌2型的致病机理 |
| 1.1.4 猪链球菌的血清型 |
| 1.1.5 猪链球菌病的防治 |
| 1.2 猪链球菌2型流行情况 |
| 1.2.1 国外猪链球菌的流行 |
| 1.2.2 国内猪链球菌的流行 |
| 1.3 猪链球菌2型耐药性 |
| 1.3.1 猪链球菌用药特点 |
| 1.3.2 猪链球菌的耐药性 |
| 第2章 研究的目的和意义 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 天津市猪场猪链球菌2型流行情况调查 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 抽检样本 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.1.4 方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 血清中猪链球菌2型抗体的ELISA检测结果 |
| 1.2.2 猪链球菌的分离及形态学观察 |
| 1.2.3 猪链球菌的生化试验结果 |
| 1.2.4 荧光PCR检测结果 |
| 1.3 分析与讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 猪链球菌2型的耐药性检测 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 菌种 |
| 2.1.2 材料 |
| 2.1.3 方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 分析与讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（7）河南省猪呼吸道隐性感染病原菌耐药分子特征（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 文献综述 |
| 1 呼吸道感染常见的病原菌 |
| 1.1 大肠埃希菌 |
| 1.2 肺炎克雷伯菌 |
| 1.3 葡萄球菌 |
| 1.4 芽孢杆菌 |
| 1.5 链球菌 |
| 1.6 鲍曼不动杆菌 |
| 1.7 猪胸膜肺炎放线杆菌 |
| 2 常见病原菌耐药机制 |
| 2.1 β-内酰胺类 |
| 2.2 四环素类 |
| 2.3 氟苯尼考 |
| 2.4 截短侧耳素类 |
| 3 隐性呼吸道感染的防控 |
| 3.1 温湿度的合理控制 |
| 3.2 有害气体的有效控制 |
| 3.3 做好免疫消毒工作 |
| 3.4 科学投料及定时运动 |
| 3.5 合理的药物预防 |
| 试验一 呼吸道隐性感染病原菌分离鉴定 |
| 1.引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 病料来源 |
| 2.2 培养基 |
| 2.3 试验试剂 |
| 2.4 试验仪器 |
| 2.5 细菌分离纯化与鉴定 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 细菌形态学分析 |
| 3.2 鉴定结果分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离特征 |
| 4.2 葡萄球菌分离特征 |
| 4.3 芽孢杆菌分离特征 |
| 4.4 其他菌分离特征 |
| 5.结论 |
| 试验二 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 菌株来源 |
| 2.2 培养基 |
| 2.3 试验药品 |
| 2.4 试验试剂 |
| 2.5 试验仪器 |
| 2.6 细菌分离纯化培养 |
| 2.7 药物敏感性试验 |
| 2.8 耐药基因检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 耐药表型分析 |
| 3.2 PCR扩增及测序结果 |
| 3.3 耐药表型与耐药基因的相关性 |
| 4 讨论 |
| 4.1 产ESBLs的菌株与多药耐药 |
| 4.2 四环素类耐药性分析 |
| 4.3 氟苯尼考耐药性分析 |
| 5 结论 |
| 试验三 葡萄球菌耐药性基因检测及分析 |
| 1 引言 |
| 2 材料 |
| 2.1 菌株 |
| 2.2 试验用培养基 |
| 2.3 试验药品 |
| 2.4 试验仪器 |
| 2.5 细菌分离培养与鉴定 |
| 2.6 药物敏感性试验 |
| 2.7 引物设计 |
| 2.8 PCR扩增 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 耐药表型分析 |
| 3.2 耐药基因检测结果 |
| 3.3 耐药表型与耐药基因的相关性 |
| 4 讨论 |
| 4.1 截短侧耳素类耐药情况分析 |
| 4.2 四环素类耐药情况分析 |
| 4.3 氟苯尼考耐药情况分析 |
| 5.结论 |
| 试验四 芽孢杆菌耐药基因检测及分析 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 菌株 |
| 2.2 培养基 |
| 2.3 试验药品 |
| 2.4 试验仪器 |
| 2.5 细菌分离纯化培养 |
| 2.6 药物敏感性试验 |
| 2.7 引物设计 |
| 2.8 PCR扩增 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 药敏结果 |
| 3.2 耐药基因扩增 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 附录一:缩略词表 |
（8）猪链球菌2型类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶A介导的补体逃逸机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表(Abbreviation) |
| 1 文献综述 |
| 1.1 补体系统概述 |
| 1.1.1 补体系统的组成及功能 |
| 1.1.2 补体激活途径 |
| 1.1.3 补体C5a和C3a的研究进展 |
| 1.2 细菌补体逃逸机制的研究进展 |
| 1.3 猪链球菌概述 |
| 1.3.1 猪链球菌生物学特征 |
| 1.3.2 猪链球菌流行病学特征 |
| 1.3.3 猪链球菌病理特征 |
| 1.3.4 猪链球菌2型毒力因子研究进展 |
| 1.3.5 猪链球菌C5a肽酶研究进展 |
| 1.3.6 猪链球菌2型类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶A(SspA)研究进展 |
| 1.4 病原菌与宿主间蛋白相互作用的研究方法 |
| 1.4.1 FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer)技术 |
| 1.4.2 细菌双杂交技术 |
| 1.4.3 单核细胞趋化技术 |
| 2 研究目的和意义 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 质粒与菌株 |
| 3.1.2 引物设计设计 |
| 3.1.3 主要药品及试剂 |
| 3.1.4 常用培养基及相关溶液 |
| 3.1.5 细菌双杂交试剂 |
| 3.1.6 蛋白纯化相关缓冲液 |
| 3.1.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液 |
| 3.1.8 Tricine SDS-PAGE缓冲液 |
| 3.1.9 ELISA缓冲液 |
| 3.1.10 切割实验缓冲液 |
| 3.1.11 Western Blot缓冲液 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 重组质粒的构建 |
| 3.2.2 细菌双杂交实验 |
| 3.2.3 His标签蛋白的表达与纯化 |
| 3.2.4 GST标签蛋白的表达与纯化 |
| 3.2.5 BCA法测蛋白浓度 |
| 3.2.6 ELISA验证互作实验 |
| 3.2.7 C3a/C5a切割实验 |
| 3.2.8 FRET实验 |
| 3.2.9 单核细胞趋化实验 |
| 4. 结果与分析 |
| 4.1 细菌双杂交验证猪链球菌SspA与C5a和C3a的相互作用 |
| 4.1.1 细菌双杂交诱饵及文库构建 |
| 4.1.2 SspA与C3a、C5a的细菌双杂交结果 |
| 4.2 SspA、C3a和C5a重组蛋白的表达纯化 |
| 4.2.1 SspA结构分析 |
| 4.2.2 重组质粒构建及双酶切验证 |
| 4.2.3 SspA蛋白及C3a、C5a蛋白的表达纯化 |
| 4.3 ELISA验证SspA与C3a、C5a的相互作用 |
| 4.3.1 SspA蛋白与C5a蛋白的ELISA结果 |
| 4.3.2 SspA蛋白与C3a蛋白的ELISA结果 |
| 4.4 Western Blot验证SspA对C3a和C5a的切割 |
| 4.5 荧光底物验证SspA对C3a和C5a的切割 |
| 4.6 SspA对C3a和C5a趋化作用的影响 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 SspA蛋白与细菌致病性的关系 |
| 5.2 SspA和C3a、C5a的互作在细菌免疫逃避中的作用 |
| 5.2.1 SspA蛋白对C3a、C5a的切割作用 |
| 5.2.2 SspA对C3a、C5a趋化作用的影响 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（9）人感染猪链球菌病流行态势（论文提纲范文）
| 1 病原学特性 |
| 2 流行概况 |
| 3 临床表现特征 |
| 4 流行环节 |
| 4.1 传染源 |
| 4.2 传播途径 |
| 4.3 人群易感性 |
| 5 流行特征 |
| 5.1 地区分布 |
| 5.2 时间分布 |
| 5.3 人群分布 |
| 6 流行因素 |
（10）猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇的分析及其在血清型鉴定中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 细菌荚膜多糖 |
| 1 化学结构 |
| 2 合成相关基因 |
| 2.1 革兰氏阴性菌荚膜产生相关基因 |
| 2.2 革兰氏阳性菌荚膜产生相关基因 |
| 3 荚膜多样性产生的机制 |
| 4 生物合成 |
| 5 功能 |
| 5.1 耐干燥 |
| 5.2 黏附 |
| 5.3 抵抗宿主的非特异性免疫 |
| 5.4 抵抗宿主特异性免疫 |
| 5.5 细菌与植物之间的相互作用 |
| 6 应用 |
| 6.1 疫苗 |
| 6.2 治疗癌症 |
| 参考文献 |
| 第二章 猪链球菌流行情况 |
| 1 猪链球菌及猪链球菌病 |
| 2 流行病学特点 |
| 2.1 感染猪的流行特征 |
| 2.2 感染人的流行特征 |
| 3 猪链球菌在中国的流行情况 |
| 4 其它国家的流行情况 |
| 4.1 美洲 |
| 4.2 欧洲 |
| 4.3 亚洲 |
| 4.4 大洋洲 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第三章 猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇保守区的克隆与分析 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 细菌与培养 |
| 1.2 模板DNA的提取 |
| 1.3 CPS locus的5’端保守基因及侧翼序列的克隆测序 |
| 1.4 CPS locus的3’端保守侧翼序列的筛选 |
| 1.5 CPS locus的3’端保守侧翼序列的测序 |
| 1.6 序列分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 CPS locus的5’端保守基因及侧翼序列 |
| 2.2 CPS locus的3’端保守侧翼序列的筛选与测序 |
| 2.3 进化树分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
| 第四章 猪链球菌15个血清型荚膜多糖合成相关基因簇的基因分析 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 细菌与培养 |
| 1.2 模板DNA的提取 |
| 1.3 猪链球菌部分血清型CPS locus下游片段的扩增 |
| 1.4 鸟枪法(shotgun)测序 |
| 1.5 猪链球菌部分血清型完整CPS locus的拼接 |
| 1.6 orf和转录单位分析 |
| 1.7 orf翻译蛋白的同源组分析与BPGN命名 |
| 1.8 序列比较与进化分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 猪链球菌1、3、4、5、7、8、9、10、14、16、19、23、25、1/2型CPS locus的序列 |
| 2.2 HGs分析 |
| 2.3 起始转移酶、合成酶和翻转酶 |
| 2.4 猪链球菌1、2、14、16和1/2型的唾液酸合成 |
| 2.5 糖基转移酶 |
| 2.6 其他转移酶 |
| 2.7 猪链球菌1、2、14和1/2型CPS locus的比较 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
| 第五章 猪链球菌3、4、5、8、10、16、19、23、25型等9个血清型PCR检测方法的建立及应用 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 菌株与培养 |
| 1.2 探针的制备 |
| 1.3 特异性基因的筛选 |
| 1.4 PCR检测方法建立与应用 |
| 1.5 血清凝集鉴定分离株的血清型 |
| 2 结果 |
| 2.1 型特异性基因 |
| 2.2 PCR方法的建立与应用 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 猪链球菌1、2、14、1/2型荚膜多糖的单糖组成比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 荚膜多糖的提取 |
| 1.2 荚膜多糖的纯化 |
| 1.3 荚膜多糖鉴定 |
| 1.4 荚膜多糖的分子量测定与分析 |
| 1.5 荚膜粗多糖的柱前衍生液相色谱法分析 |
| 1.6 荧光标记液相色谱法测定唾液酸含量 |
| 1.7 唾液酸与其他单糖比例的测定 |
| 2 结果 |
| 2.1 荚膜多糖的分离与纯化 |
| 2.2 荚膜多糖的鉴定与分析 |
| 2.3 荚膜多糖的分子量 |
| 2.4 荚膜多糖的柱前衍生液相色谱法分析 |
| 2.5 唾液酸种类及与其他单糖比例的测定结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 附录1:猪链球菌各血清型cps基因各ORF的功能及其与其它细菌蛋白的相似性 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
四、猪链球菌引起人猪共患病22例临床分析（论文参考文献）
- [1]湖南省首例猪链球菌14型人源分离株鉴定及毒力基因分析[J]. 贺子翔,夏昕,覃玉芳,杨浩,覃迪,向星宇,胡俊忠,湛志飞. 中国人兽共患病学报, 2020(08)
- [2]HPS、SS2和Pm的三重PCR检测方法建立及三联灭活疫苗的研究[D]. 熊景峰. 华南农业大学, 2019(02)
- [3]猪链球菌4型分离株及其转录调控因子GalR生物学特性研究[D]. 孙珂. 吉林农业大学, 2019(03)
- [4]猪链球菌脑膜炎5例报告[J]. 李燕华,韦俊杰,范秉林,姜炳坚. 中国感染控制杂志, 2018(09)
- [5]江苏某市屠宰场猪链球菌流行病学调查及NCLs菌株病原特性分析[D]. 高雪萍. 南京农业大学, 2018(08)
- [6]天津地区猪链球菌2型流行情况调查及耐药性检测[D]. 王颖. 吉林大学, 2017(04)
- [7]河南省猪呼吸道隐性感染病原菌耐药分子特征[D]. 李进福. 河南农业大学, 2017(05)
- [8]猪链球菌2型类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶A介导的补体逃逸机制研究[D]. 徐闻逸. 华中农业大学, 2016(05)
- [9]人感染猪链球菌病流行态势[J]. 黄革,李建明. 疾病监测与控制, 2013(07)
- [10]猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇的分析及其在血清型鉴定中的应用[D]. 王楷宬. 南京农业大学, 2011(05)