一、骨髓移植治疗急性髓细胞白血病（论文文献综述）
王梦亚[1]（2020）在《升麻鳖甲汤加减方通过PI3K/AKT通路抑制急性髓系白血病血管新生的机制研究》文中研究指明研究背景及目的急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）是起源于多能造血干细胞的恶性克隆性血液系统疾病,表现为白血病干细胞的恶性增殖而导致的造血细胞增殖分化能力受抑,从而引起一系列全身多脏器功能受累。具有较高的异质性,死亡率高,预后不良。目前的主要治疗多以标准化的化疗方案、造血干细胞为主,后者是潜在性治愈白血病的有效方案,近年来免疫疗法的研究也在进一步开展。研究表明,血管新生在白血病的发病机制中发挥着重要的作用。骨内膜存在的广泛血管网供给造血干细胞的增殖以及进一步分化,病理状态下,白血病细胞和血管内皮细胞相互作用,刺激生长因子的失衡进而导致病理性血管的形成,影响疾病的化疗敏感性及预后,增加耐药几率,同时会提高并发症的发病几率。升麻鳖甲汤原方来源于《金匮要略·狐惑阴阳毒病证治》,目前临床已用于皮肤病、免疫组织疾病等疾病治疗中,临床数据显示其具有调节免疫、抗炎等作用。根据中医辨证论治的理论基础,并结合临床实践经验,我们通过对升麻鳖甲汤原方进行加减后应用于血液系统疾病中,在一定程度上减少了化疗后不良事件（如造血受抑、免疫缺陷、胃肠道反应等）的发生率,提高化疗有效率,改善患者中医证候积分。本课题组在前期的实验研究中表明升麻鳖甲汤加减方（ShengMa BieJia Decoction,SMBJD）在荷瘤鼠体内具有抑制移植瘤生长的作用,体外研究显示其对急性髓系白血病细胞株具有细胞毒性作用,且通过MAPK通路诱导AML细胞的凋亡。鉴于白血病发病机制与血管新生之间的联系,本研究拟探讨SMBJD的抗白血病作用是否与其在AML中的抗血管新生作用有关,以及其中可能存在的分子作用机制。研究方法1.体内实验研究通过鸡胚尿囊膜实验观察不同浓度的SMBJD对体内微血管密度的影响;通过构建HL60荷瘤鼠模型研究不同浓度SMBJD对小鼠移植瘤瘤体组织的影响,采用免疫组织化学、蛋白免疫印迹技术（Western Blot,WB）和聚合酶链反应法（Polymerase Chain Reaction,PCR）检测SMBJD介导抗血管新生的相关因素表达。2.体外实验研究高压液相质谱（high performance liquid chromatography,HPLC）检测升麻鳖甲汤加减方中的主要有效成分。利用MTT实验分别检测SMBJD对HUVECs和AML细胞株的细胞活性影响,根据结果提取经SMBJD干预AML细胞后无细胞毒性的药物浓度培养AML细胞提取上清液即为条件培养基（conditional medium,CM）,MTT法检测CM对HUVECs的细胞活性影响;采用划痕实验、Transwell小室实验和体外管腔形成实验分别观察经SMBJD和条件培养基干预后的HUVECs的趋化、迁移及体外成管能力的变化;酶联免疫吸附实验检测AML细胞的VEGF分泌表达情况;利用WB和PCR技术检测相关蛋白和mRNA的变化。研究结果1.体内实验结果荷瘤鼠实验观察结果显示,不同浓度的SMBJD（20,40,80 g/kg）对荷瘤小鼠体重的影响组间无明显差异,瘤体体积随时间推移逐渐增大,给药组与对照组（生理盐水组）之间无明显差异;免疫组化标记结果中CD31和VEGFR2表达的受抑制,且抑制程度与给药浓度成正相关。鸡胚尿囊膜试验中证实,SMBJD对于体内微血管密度（microvessel density,MVD）具有削弱作用,且随着浓度增加而削弱作用逐渐增强。2.体外实验结果升麻鳖甲汤加减方HPLC结果显示,其中的有效成分分别为甘草苷（liquiritin）,阿魏酸（ferulic acid）,升麻素（cimifugin）,异阿魏酸（Isoferulic acid）和甘草酸（glycyrrhizic acid）。细胞增殖活性检测结果显示,SMBJD在所给药剂量范围内（2,4,8 mg/mL）对HUVECs和AML细胞系均无明显细胞毒性。因此均选取2,4,8 mg/mL三个浓度作为后续实验的给药浓度。在非细胞毒性药物浓度的作用下,SMBJD干预后的HUVECs的迁移、趋化和体外成管能力均受到不同程度的抑制,且该抑制作用在8 mg/mL最为显着。无细胞毒性的SMBJD干预后的AML细胞培养上清即CM,对HUVECs亦无明显细胞毒性,但是削弱了 HUVECs的迁移、趋化和成管能力;ELISA结果显示,非毒性浓度的SMBJD抑制了 AML细胞系中血管内皮生长因子（Vascuoar endothelial growth factor,VEGF）的分泌。经内皮细胞刺激因子—VEGF165刺激后的HUVECs在SMBJD干预后,呈现出与给药浓度正相关的活性抑制,且这种抑制作用与不经VEGF165刺激相比有所下降;划痕、Transwell实验、体外管腔形成实验也受到抑制;WB和PCR结果均显示出,无论是SMBJD干预、VEGF165刺激还是条件培养基培养的HUVECs,VEGF、血管内皮生长因子受体-2（Vascuoar endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2）及 mRNA 的表达均受到负向调节作用,且具有统计学差异;另外,信号通路相关的PI3K、AKT及其磷酸化蛋白的表达和mRNA的调控也受到负导向作用,其中8 mg/mL的作用更显着。研究结论1.SMBJD体内具有减少鸡胚尿囊膜微血管密度的作用,下调荷瘤鼠模型瘤体组织中VEGF、VEGFR2和mRNA,以及免疫标记CD31、VEGFR2的表达;2.SMBJD体外抑制HUVECs的生理功能,抑制AML细胞中VEGF的分泌;3.条件培养基干预后的HUVECs,随条件培养基中SMBJD浓度的提升,VEGF、VEGFR2、P13K和AKT磷酸化蛋白以及mRNA的表达下降;4.SMBJD的抗血管新生作用的潜在机制可能与负调控AML细胞中VEGF的水平和PI3K/AKT通路有关。
钟樱红,罗华山,黎民君,郭丽堃,冯思琼[2]（2015）在《自体外周血造血干细胞和自体骨髓移植治疗急性髓性白血病的临床研究》文中研究指明目的探讨自体骨髓移植与自体外周血干细胞移植治疗急性髓性白血病的临床疗效。方法选择急性髓性白血病患者30例,根据治疗方法不同分为2组,观察组1 9例采用自体外周血干细胞移植治疗,对照组11例采用自体骨髓移植治疗,观察2组患者无病存活率,复发率和移植相关死亡率。结果观察组患者治疗后CR+PR为13例（68 42%）,对照组患者治疗后CR+PR为5例（45.45%）,2组患者比较差异有统计学意义（x2=8.254,P<0.05）;观察组患者3年无病生存率和复发率分别为78.95%（15/19）和26 67%（4/15）与对照组的45 45%（5/11）、40.00%（2/5）相比差异有统计学意义（P<0.05）。2组的移植相关死亡率差异无统计学意义,死亡的主要原因为感染和内脏出血。结论自体外周血干细胞移植治疗期急性髓性白血病,其造血重建显着快于对照组,能降低移植后的复发率,提高生存率。
吴必嘉,龚峻梅,郭天剑,陈万红,李娜[3]（2012）在《造血干细胞移植治疗恶性血液病的研究与分析》文中研究指明背景:近年来,随着血液学及相关领域基础和临床研究的不断发展,造血干细胞移植已成为治疗恶性血液病的有效手段,甚至是治愈某些血液病的惟一方法。目的:对造血干细胞移植治疗恶性血液病SCI数据库文献资料进行多层次对比分析。方法:通过计算机检索SCI数据库2001/2010有关造血干细胞移植治疗恶性血液病的文献,检索词为"造血干细胞（hematopoietic stem cell）,移植（transplantation）,急性髓性白血病（acute myelogenous leukemia）,非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin lymphoma）,慢性髓细胞白血病（chronic myelocytic leukemia）",分析结果以文字和图表的形式进行统计和计量学分析。结果与结论:SCI数据库2001/2010收录造血干细胞移植治疗恶性血液病相关文献中美国在该领域文献产出量多于其他国家,对该领域研究有重要贡献,发表文献较多的机构集中在美国Fred Hutchinson癌症研究中心。10年来文献数量呈总体上升趋势。
马平[4]（2020）在《PD-L1对急性髓系白血病糖酵解的影响及机制研究》文中研究表明背景急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）是一种高侵袭性和高异质性的血液系统恶性肿瘤,也是成人最常见的急性白血病。近年来,随着治疗手段的进步及新药的不断出现,诱导化学治疗（化疗）的完全缓解率（complete remission,CR）可以达到70%-80%,但仍有约10%-40%的患者诱导治疗失败,并且即使诱导治疗完全缓解并接受规律巩固治疗的患者仍有高达50%的复发率。诱导治疗失败及复发患者最终演变为难治、复发白血病。目前有关AML的发生、发展的机制尚未完全阐明,其发病涉及到多种因素,其中细胞遗传学异常在AML的发病机制中起着重要作用,其中葡萄糖代谢途径是受遗传学影响的重要领域。糖酵解是肿瘤细胞主要的能量代谢过程,上世纪二三十年代,Otto Warburg等人发现,即是在氧气充足的条件下,肿瘤细胞可将大部分葡萄糖以糖酵解的形式转化为乳酸,这种以葡萄糖高消耗、有氧糖酵解及乳酸生成为特点的代谢方式称为“Warburg效应”。糖酵解中的一系列关键酶在实体肿瘤及急性白血病的增殖、浸润、转移及耐药过程中发挥重要作用。糖酵解不仅为肿瘤细胞的快速增殖提供能量供应,同时还为其提供了大量的增殖所必须的合成原料。通过抑制糖酵解可以出现肿瘤细胞增殖受抑、凋亡增加和逆转耐药的现象,实现抗肿瘤目的。AKT/mTOR信号通路是肿瘤细胞糖酵解最为密切的调控通路之一,同时又参与了转录因子HIF-1α的表达与调控。PD-L1（programmed death ligand 1）作为B7超家族成员常在抗原递呈细胞及肿瘤细胞表面表达,通过与其受体PD-1（programmed death 1）相互作用参与肿瘤细胞的免疫逃逸过程。PD-L1在多种肿瘤细胞表面及肿瘤微环境的免疫细胞表面都可以被检测到,PD-L1不仅参与肿瘤的免疫逃逸还与肿瘤的恶性程度及不良预后相关。已有多项研究证实PD-L1与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。还有研究显示肿瘤细胞表面PD-L1可直接激活细胞内AKT/mTOR信号通路导致糖酵解基因表达上调、增强糖酵解代谢。目前关于PD-L1在AML中的研究报道较少,且主要集中在PD-L1与PD-1相结合影响抗肿瘤免疫方面,缺乏PD-L1对AML的发生、发展的影响及具体机制的研究。其中,PD-L1是否可以直接参与调控AML细胞的生物学行为,AML中异常表达的PD-L1是否与AML的高糖酵解表型有关等问题都未见报道。为了解决这些问题,本研究首先探讨了 PD-L1在初治AML患者中的表达与临床特征和预后的关系,随后探讨了 PD-L1对AML细胞生物学行为和糖酵解的影响及作用机制。为研究PD-L1在初治AML患者中骨髓单个核细胞中的表达情况,我们收集郑州大学第一附属医院于2013-2015年间住院的初治非M3的AML患者的骨髓标本。经过对患者的随访及病例资料的整理后共有90例,收集新鲜标本后立即将标本用淋巴细胞分离液离心提取单个核细胞,然后提取mRNA应用荧光实时定量PCR方法检测mRNA表达水平。进一步构建稳定过表达及干扰PD-L1表达的AML细胞株,通过在体内、体外实验研究PD-L1表达量对AML细胞的增殖、凋亡、周期及糖酵解的影响。应用RNA-Seq技术分析PD-L1基因过表达组与对照组AML细胞株在转录组水平上基因表达变化。应用生物信息学技术对差异基因进行功能和通路富集,分析PD-L1在AML中可能的作用机制。最后应用Western blot技术检测PD-L1 的表达变化对糖酵解相关蛋白及AKT/mTOR/HIF-1α信号通路中关键蛋白的影响,分析其具体作用机制。本研究共分三个部分:第一部分PD-L1在AML中的表达及对临床预后影响目的应用Q-PCR方法检测PD-L1在AML患者骨髓单个核细胞中的mRNA水平,探讨PD-L1表达水平的变化与临床特征和预后之间的关系,并分析PD-L1基因与糖酵解基因及HIF-1α基因之间的相关性。方法1.利用GEPIA网站提供的公开肿瘤测序结果数据,分析PD-L1基因在AML患者与正常对照中的表达情况,同时分析PD-L1基因表达水平的高低与生存之间的关系。最后分析PD-L1基因与糖酵解相关基因及HIF-1α基因之间的相关性。2.应用Q-PCR方法检测90例初治的AML患者和18例骨髓移植供者骨髓的单个核细胞中的PD-L1基因、糖酵解相关基因及HIF-1α基因的表达水平,并进行基因之间相关性分析。3.收集90例初治AML患者临床资料,根据诱导治疗及后续巩固治疗的疗效与随访结果将患者分为持续完全缓解组和难治复发组,分析AML患者与正常对照及持续完全缓解组与难治复发组之间PD-L1基因表达量的差异,分析AML患者与正常对照组之间糖酵解相关基因和HIF-1α基因表达量的差异。4.应用卡方检验分析PD-L1的表达与AML患者临床特征之间的关系,Kaplan-Meier方法进行生存率分析并绘制生存曲线。用COX回归模型进行单因素及多因素分析。结果1.通过在GEPIA网站中检索发现与正常对照相比PD-L1基因在AML患者中表达量增高,但差异尚不具有统计学意义。检索生存发现PD-L1表达上调的AML患者较PD-L1表达下调的患者生存时间显着降低（P=0.046）。分析PD-L1基因表达与糖酵解相关基因（PFKM、PDK1、ENO2、GLUT1）及HIF-1α基因的表达具有正相关性（均P<0.05）。2.Q-PCR方法检测PD-L1、糖酵解相关基因（PFKM2、ALDOA、PGK1、PDK1、LDHA、HK2）和HIF-1α的mRNA表达水平显示,PD-L1在初治AML患者较正常对照表达量增高（P<0.05）;在难治复发组较持续完全缓解组的表达量增高（P<0.05）;糖酵解相关基因及HIF-1α在初治AML患者较正常对照表达量增高（均P<0.01）;在初治AML患者中PD-L1的表达与糖酵解相关基因及HIF-1α间的表达存在正相关性（均P<0.01）。3.应用卡方检验分析PD-L1基因的表达与临床特征的关系,结果显示,PD-L1基因的表达水平与AML患者一个疗程是否缓解的临床特征呈正相关。4.生存分析的结果显示PD-L1基因的表达水平与AML患者的预后相关,PD-L1基因高表达的AML患者相较表达量低的患者具有较差的总体生存期（P=0.041）。通过对AML患者预后多因素分析,WBC数（P=0.007）、预后分层（P=0.011）、一个疗程是否缓解（P=0.04）和PD-L1基因（P=0.02）是AML的独立预后因子。小结1.与正常对照相比,PD-L1基因的表达量在初治AML患者中显着增高,难治复发组较持续完全缓解组的表达量增高,其表达量与患者的预后呈负相关。2.与正常对照相比,糖酵解相关基因（PFKM2、ALDOA、PGK1、PDK1、LDHA、HK2）及HIF-1α基因的表达量在初治AML患者中显着增高。3.在初治AML患者中PD-L1的表达与糖酵解相关基因及HIF-1α间的表达存在正相关性,提示PD-L1可能通过HIF-1α调节AML的糖酵解过程。第二部分PD-L1在体内及体外对AML细胞生物学功能的影响目的通过体外细胞功能实验研究PD-L1表达量的变化对AML细胞的增殖、凋亡及周期的影响。研究PD-L1在AML发生、发展过程中的作用。构建裸鼠皮下移植瘤模型,检测PD-L1的表达量对瘤体体积及重量的影响。方法1.培养 5 株 AML 细胞:HL-60、Molm-13、K562、KG-1a 和 THP-1 细胞,应用磁珠分选技术在正常骨髓移植供者患者外周血中分离CD34+细胞作为正常对照,在细胞对数生长期提取细胞的蛋白及RNA。2.应用Q-PCR方法检测PD-L1基因在上述5株AMI细胞株及CD34+细胞中的表达水平;流式细胞术和Western blot方法检测细胞PD-L1蛋白的表达。3.应用PD-L1过表达及shRNA的干扰质粒包装慢病毒,将PD-L1过表达质粒转染到Molm-13细胞,将shRNA质粒转染到THP-1细胞,应用嘌呤霉素筛选出稳定表达株,最后应用荧光显微镜、Q-PCR、Western blot和流式细胞术对筛选后的细胞株进行检测荧光表达量、PD-L1基因及蛋白表达情况。4.应用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖,应用凋亡试剂盒检测细胞的凋亡情况,应用周期试剂盒检测细胞周期的分布变化,观察PD-L1表达变化对AML细胞生物学行为的影响。5.将Molm-13-vec和Molm-13-PD-L1细胞通过裸鼠皮下接种的方式构建皮下移植瘤模型,观察两组移植瘤的生长速率、体积及最后重量的变化。最后应用免疫组化的方法检测移植瘤中Ki67的表达变化。结果1.根据5种AML细胞株中PD-L1表达的情况,最后选出低表达PD-L1基因及蛋白的细胞株Molm-13,高表达PD-L1基因及蛋白的细胞株THP-1。2.应用Q-PCR、流式细胞术及Western blot方法检测稳转的细胞株显示,PD-L1 基因及蛋白在Molm-13-PD-L1 较Molm-13-vec及Molm-13-blank 中升高,在 THP1-sh1 和 THP1-sh2 较 THP1-NC 中减低。3.PD-L1过表达可使Molm-13细胞增殖增加、凋亡受抑同时增加S期细胞比例,PD-L1的减低可以导致THP-1细胞增殖受抑、凋亡增加同时增加G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例。4.裸鼠皮下移植瘤实验结果显示,PD-L1能显着增加AML移植瘤组织中增殖相关蛋白Ki67的表达,促进AML移植瘤的增殖。小结通过体内及体外实验证实PD-L1的表达变化可以影响AML细胞的增殖、凋亡和周期。第三部分PD-L1对AML细胞糖酵解的影响及机制研究目的将Molm-13-vec和Molm-13-PD-L1细胞进行转录组测序,对测序结果进行KEGG功能及通路富集分析,预测PD-L1在AML中的作用机制。检测PD-L1表达的变化对AML细胞糖酵解的影响并探讨PD-L1对糖酵解影响的具体信号通路。方法1.将稳转细胞株Molm-13-PD-L1和Molm-13-vec进行培养、收集和洗涤,加入适量TRIzol经干冰运输至深圳华大基因股份有限公司进行转录组测序。将差异基因进行KEGG功能和通路富集分析,预测PD-L1在AML中作用及其机制。2.应用Q-PCR和Western blot法检测PD-L1表达的变化对糖酵解相关基因及关键蛋白的影响,应用葡萄糖及乳酸检测试剂盒检测PD-L1表达的变化对葡萄糖摄取及乳酸生成的影响,应用Seahorse实验检测PD-L1表达的变化对细胞外酸化率（ECAR）的影响。3.应用Western blot法对测序得到的富集通路中的关键蛋白进行检测,然后应用AKT抑制剂、mTOR抑制剂及干扰HIF-1α的表达,检测通路关键蛋白的变化及对AML细胞糖酵解的影响。4.应用双荧光素酶表达实验验证HIF-1α对糖酵解关键基因HK2、LDHA的靶向调控。结果1.差异基因KEGG功能富集分析PD-L1可以调节AML碳水化合物的代谢;KEGG通路富集分析显示PD-L1对AML细胞代谢的影响可能是通过PI3K/AKT信号转导通路实现的。2.过表达PDL-1基因可以导致AML细胞糖酵解相关基因（ALDOA、PGK1、LDHA、HK2）及糖酵解关键蛋白HK2、LDHA表达上调,干扰AML细胞PD-L1的表达可导致糖酵解相关基因（ALDOA、PGK1、LDHA、HK2）及糖酵解关键蛋白HK2、LDHA表达下调。3.过表达PDL-1基因可以导致AML细胞葡萄糖摄取增加、ECAR增高及乳酸生成增加。干扰PD-L1的表达,可以导致AML细胞葡萄糖摄取减少、ECAR降低及乳酸生成减少。4.在对AML细胞系进行AKT/mTOR/HIF-1α通路关键蛋白检测显示与PD-L1低表达细胞系相比,P-AKT、P-S6和HIF-1α蛋白在PD-L1高表达细胞系THP1中表达增高。与空白细胞及空质粒细胞组相比,过表达PD-L1的AML细胞中P-AKT、P-S6和HIF-1α蛋白表达增高。与对照组相比,干扰PD-L1表达的AML细胞中P-AKT、P-S6和HIF-1α蛋白表达下降。5.在过表达PD-L1的AML细胞中应用AKT抑制剂可以导致P-AKT、P-S6、HIF-1α、HK2和LDHA蛋白的表达下降,同时导致AML细胞萄糖摄取减少、ECAR降低及乳酸生成减少。6.在过表达PD-L1的AML细胞中应用mTOR抑制剂雷帕霉素可以导致P-S6、HIF-1α、HK2和LDHA蛋白的表达下降,同时导致AML细胞萄糖摄取减少、ECAR降低及乳酸生成减少。7.将过表达PD-L1的AML细胞应用si技术干扰HIF-1α基因的表达可以导致HIF-1α、HK2和LDHA蛋白的表达下降,而P-AKT、P-S6蛋白的表达不受影响,同时导致AML细胞萄糖摄取减少、ECAR降低及乳酸生成减少。8.应用双荧光素酶实验验证HIF-1α可以靶向调控HK2和LDHA基因。小结1.PD-L1的表达变化可以影响AML细胞的糖酵解。2.HIF-1α可以上调靶基因HK2、LDHA的转录。3.PD-L1是通过AKT/mTOR/HIF-1α信号通路调节糖酵解。
靖彧,于力,刘海川,姚善谦,楼方定,张伯龙,高春记,周绮,李红华,薄剑,王全顺,赵瑜,朱海燕[5]（2008）在《自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病77例》文中提出背景:急性髓系白血病采用化疗方案效果欠佳,而异基因造血干细胞移植虽然是最有效的治疗方法,但寻找到HLA相合的供者概率较低,且易发生严重并发症。目的:评价自体造血干细胞移植对急性髓系白血病的改善效果。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于1989-01/2007-03在解放军总医院血液科完成。对象:选取急性髓系白血病患者77例,中位年龄27.6岁,均同意行自体造血干细胞移植,实验经医院医学伦理委员会批准。单次造血干细胞移植72例,其中自体外周血造血干细胞移植21例、自体骨髓移植51例;移植前CR1期69例,CR2期2例,CR3期1例。双次造血干细胞移植5例,其中均为自体骨髓移植1例,其余4例分别为首次进行骨髓移植和第2次进行自体外周血造血干细胞移植,移植前均为CR1期。方法:骨髓移植患者按单个核细胞（0.8～1.5）×108/kg采集骨髓细胞,外周血干细胞移植患者在联合化疗后行粒系-巨噬集落刺激因子动员,当白细胞>5.0×109L-1时采集造血干细胞。骨髓移植及外周血干细胞移植患者回输单个核细胞中位数分别为2.62×108/kg,4.03×108/kg。25例患者行TLI预处理方案,47例患者行TBI预处理方案,5例患者行不含TBI的高剂量化疗预处理方案。9例患者给予移植后治疗,接受VP/MM维持化疗3例,接受白细胞介素2+干扰素α免疫维持治疗4例,三者联合维持化疗2例。移植后每3个月进行随访,定期检测血常规、骨髓象等变化。主要观察指标:移植后造血重建情况、存活情况以及维持治疗对患者骨髓功能的影响。结果:所有患者均获得髓系造血重建。72例单次自体造血干细胞移植患者无病存活42例,其中移植前CR1期41例,CR3期1例,至今无病存活率58.3%;5例双次自体造血干细胞移植患者至今无病存活4例。定期进行血象和骨髓象复查,均未发现移植后维持治疗对患者骨髓功能有明显影响,患者对维持治疗的耐受性良好。结论:自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病安全有效,可改善难治急性髓系白血病患者预后。
李海鹰[6]（2019）在《甲状旁腺激素调控骨髓微环境影响白血病发病及多药耐药的研究》文中提出目的:骨髓间充质干细胞,是构成骨髓微环境的基本细胞成分,参与骨髓微环境细胞因子网络的形成。在白血病患者体内,间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的形态和功能会发生变化,与正常骨髓微环境向白血病骨髓微环境的转化相关。而甲状旁腺激素可以通过骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）通路促进间充质干细胞向成骨细胞的转化。同时,该通路与结缔组织细胞生长因子（Connective tissue cell growth factor,CTGF）存在相互作用,可以介导肿瘤的粘附、迁移和耐药。基于上述原因,本研究想证实,骨髓微环境的转变对白血病耐药的影响以及利用甲状旁腺激素对骨髓间充质干细胞的作用,能否改变其构建的骨髓微环境,达到调控白血病发生、进展和耐药的目的。并且对参与调控的通路进行初步研究,以期发现白血病治疗的新靶点,为白血病的治疗提供新的理论依据。方法:1、细胞实验:收集急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者骨髓进行原代培养,获得的急性髓系白血病来源的间充质干细胞（AML-MSCs）分别与K562及K562-ADM共同培养。形态学检测,过氧化物酶染色,实时荧光定量聚合酶链反应和荧光原位杂交技术对共培养后的细胞变化进行鉴定。流式细胞仪检测共培养前后K562及K562-ADM的细胞周期与凋亡。ELISA检测共培养前后细胞因子IL-6/IL-32的含量。在共培养的细胞中加入不同浓度梯度的甲状旁腺激素,流式细胞仪检测加药后不同时间点K562/K562-ADM的细胞周期与凋亡。ELISA检测加药后细胞因子IL-6/IL-32的变化。RT-PCR和蛋白印迹法检测共培养组和加药共培养组BMP4基因/下游磷酸化蛋白Smad1/5、CTGF基因/蛋白、以及多药耐药基因（ATP-binding cassette sub-family B member 1,ABCB1）/多药耐药蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的变化。2、临床实验:收集2015-2017年在兰州大学第一医院就诊的急性髓系白血病初诊患者骨髓样本56例。根据NCCN指南进行诊断和分类,分为预后良好组、预后中等组、预后不良组以及复发耐药组。选取10例无骨髓病变的非恶性血液病患者骨髓样本及10例正常人的骨髓样本作为对照组。RT-PCR检测BMP4、CTGF和ABCB1的表达水平,ELISA检测骨髓浆及血浆中BMP4和CTGF蛋白含量。结果:1、AML-MSCs会促使K562-ADM发生梭形转化,这种转化在K562共培养组罕见发生。2、AML-MSCs促进K562-ADM的增殖,抑制凋亡。AML-MSCs抑制K562的增殖,促进凋亡。3、可溶性细胞因子IL-6和IL-32在K562共培养组中含量下降,但是在K562-ADM共培养组中明显增加。4、在共培养组中,加入甲状旁腺激素,可以促进AML-MSCs的分化、抑制增殖,抑制IL-6/IL-32的产生,促进K562/K562-ADM的凋亡,抑制增殖。甲状旁腺激素对K562-ADM的上述作用强于K562,在24小时作用最为明显。5、AML-MSCs与K562-ADM共培养,BMP4基因/p-Smad1/5蛋白表达下降,而与K562共培养,BMP4基因/p-Smad1/5蛋白表达升高。6、AML-MSCs与K562/K562-ADM共培养,CTGF和ABCB1/P-gp表达均升高,K562-ADM共培养组升高明显。7、甲状旁腺激素上调AML-MSCs上BMP4基因/p-Smad1/5蛋白的表达,下调CTGF的表达,抑制K562/K562-ADM上ABCB1/P-gp的表达。8、BMP4表达下降,CTGF表达升高,与急性髓系白血病患者的不良预后密切相关（p<0.05）。CTGF的表达与ABCB1表达呈正相关（r=0.907,r>1）;而BMP4的表达与ABCB1呈负相关（r=-0.827,r<1）。BMP4的含量变化在骨髓浆与血浆中的表达具有一致性;CTGF的含量变化在骨髓浆和血浆中的表达不一致。结论:1、骨髓微环境转变所诱导的K562-ADM梭形转化与白血病化疗耐药密切相关。2、甲状旁腺激素可以通过抑制AML-MSCs的增殖,促进K562及K562-ADM的凋亡,且对K562-ADM的作用强于K562。3、甲状旁腺激素可能是通过对BMP、CTGF的调控,下调K562及K562-ADM的多药耐药基因和蛋白的表达,参与白血病发病与多药耐药的发生。4、BMP-4表达减低,CTGF表达增高,与急性髓系白血病的多药耐药和不良预后相关。
石瑞平,韩婷婷,郭树霞[7]（2019）在《自体骨髓移植联合MHC单倍体相合淋巴细胞治疗急性髓性白血病的临床疗效》文中研究说明目的:自体骨髓移植联合MHC单倍体相合淋巴细胞治疗急性髓性白血病的治疗效果和安全性。方法:以40例急性髓性白血病患者作为研究对象,随机分为两组各20例,研究组患者使用自体骨髓移植联合MHC单倍体相合淋巴细胞进行治疗,对照组单用自体骨髓移植进行治疗。结果:两组患者的造血系统都得到重建,重建时间以及并发症的发生均没有显着差异。而研究组患者复发率显着降低,且复发时间明显地长于对照组患者。研究组患者3年累积无病生存率明显地高于对照组患者,且差异具有统计学意义。结论:自体骨髓移植联合MHC单倍体相合淋巴细胞治疗能够有效控制急性髓性白血病病情,降低其复发,延长患者生存期。
杨文娟[8]（2020）在《自体造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床研究》文中研究表明目的:探讨自体造血干细胞移植（auto-HSCT）治疗恶性血液病的临床疗效及预后影响因素分析。方法:回顾性分析1983年1月2019年12月在中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院行自体造血干细胞移植（auto-HSCT）的215例恶性血液病患者的临床资料。自体外周血干细胞（APBSC）动员采用环磷酰胺（Cy）+足叶乙甙（VP-16）化疗联合重组人粒细胞刺激因子方案。预处理方案:恶性淋巴瘤（ML）及急性白血病（AL）、髓外浆细胞瘤采用全身照射（TBI）+VEM/IAC方案;多发性骨髓瘤10例采用白消安+VP-16+Cy（BVC）方案、5例采用硼替佐米+BVC方案、5例采用硼替佐米+马法兰方案、7例采用马法兰方案;孤立性浆细胞瘤采用BVC方案。对患者总生存率（OS）、无进展生存率（PFS）、复发率（RR）等进行统计。统计学处理采用SPSS 25.0统计软件,多分类数据采用非参数检验,对患者的OS、PFS采用Kaplan-Meier方法计算并绘制生存曲线,组间比较采用Log rank检验进行单因素分析,对影响OS、PFS的多因素分析采用Cox比例风险回归模型。P<0.05认被为差异有统计学意义。结果:本研究215例行auto-HSCT的恶性血液病患者中自体骨髓移植（ABMT）33例,自体外周血干细胞移植（APBSCT）182例。恶性淋巴瘤（ML）169例[非霍奇金淋巴瘤（NHL）119例,霍奇金淋巴瘤（HL）47例,灰区淋巴瘤（GZL）3例],多发性骨髓瘤（MM）27例,浆细胞瘤2例（髓外浆细胞瘤1例、孤立性浆细胞瘤1例）,NHL并髓外浆细胞瘤1例,急性淋巴细胞白血病（ALL）10例（Ph+1例）,急性髓系白血病5例[M2 1例、M3 1例（PML/RARα阴性）、M5 2例、粒细胞肉瘤1例],朗格罕斯细胞组织细胞增生症（LCH）1例。移植中位年龄34（1161）岁,男性患者148例,女性患者67例。中位随访时间为36（0426）个月,除1例患者移植当天回输自体外周血干细胞后发生急性肺水肿死亡、1例移植后9天因真菌败血症死亡外,其余213例患者均获得造血重建,粒细胞植入的中位时间为+12（+8+33）d,血小板植入中位时间为+13（0+73）d,ABMT造血恢复慢于APBSCT患者,差异有统计学意义（P<0.05）。215例患者3年、5年OS分别为79.9%、74.9%,3年、5年PFS分别为66.9%、63.2%,复发率（RR）为26.98%（58/215）,移植相关死亡率（TRM）为3.72%（8/215）,移植前76例PR、NR、PD或复发的患者中51例在移植后达CR,有效缓解率67.11%。单因素分析显示患者性别、移植年龄及移植前病程对auto-HSCT后长期预后无明显影响（P>0.05）,干细胞来源影响患者移植后3年OS及PFS,APBSCT的3年OS及PFS均优于ABMT患者（P<0.05）;诊断影响患者移植后3年OS,ML及MM患者移植后3年OS优于AL患者,3年OS分别为81.0%、73.2%、50.8%（P<0.05）;移植前疾病状态影响患者3年PFS,移植前病情CR及PR患者移植后3年PFS优于NR、PD及复发患者（P<0.05）。多因素分析显示急性白血病是影响患者OS的的独立危险因素,相对风险（RRs）是4.397（95%CI,1.716-11.268）（P<0.05）,而移植前病情未缓解、复发、进展是影响患者PFS的独立危险因素,相对风险（RRs）是2.718（95%CI,1.283-5.754）（P<0.05）。结论:自体造血干细胞移植治疗恶性血液病安全有效,可作为恶性血液病患者诱导缓解后的巩固治疗,移植后部分患者可获得长期生存;对于复发难治或移植前未缓解的恶性血液病患者,自体造血干细胞移植可作为挽救性治疗提高患者缓解率、延长生存期,改善生活质量。
范腾[9]（2020）在《复方青黄散调控HIF1A/GATA信号通路改善骨髓增生异常综合征红系造血》文中研究指明临床研究表明,复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征安全、临床有效。为进一步完善复方青黄散临床疗效、复方青黄散的药效学及作用机制研究,本研究在课题组研究基础上,对复方青黄散的临床疗效进行分析,并利用MDS转基因模型小鼠进行药效学和作用机制探讨。研究一 复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征的临床研究目的:分析复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征的临床疗效。方法:对2015年1月到2016年10月在中国中医科学院西苑医院血液科接受复方青黄散治疗1年半的61例骨髓增生异常综合征患者的临床资料进行回顾性分析。主要分析患者使用复方青黄散的临床疗效及影响疗效相关因素。患者一般资料描述采用统计描述,计数资料的描述采用均数±标准差表示,两组间比较采用t检验,计量资料采用秩和检验。结果:（1）61例MDS患者接受复方青黄散治疗后:16例获得血液学改善（16/61,26.2%）,40例获得血液学稳定（40/61,65.6%）,5例治疗无效（5/61,8.2%）,血液学进步率为91.8%。（2）61例患者治疗后血红蛋白水平（85.59±26.6g/L）较治疗前（79.23±21.28g/L）显着升高（p=0.016）。（3）61例患者治疗后中性粒细胞计数（1.14±0.63×109/L）较治疗前（1.01±0.53×109/L）升高,无显着差异（p=0.12）。（4）61 例患者治疗后血小板计数（43.67±37.79 × 109/L）较治疗前（44.35±38.23×109/L）无显着改变（p=0.93）。（5）61 例患者在治疗后 3 月（260ml）、6月（180ml）以及1年半（80ml）的输血量较治疗前（350ml）显着减少（p=0.0004）。（6）年龄小于60岁,染色体核型预后好和中等及IPSS-R低危和中危患者复方青黄散治疗后疗效较好。（7）61例患者使用复方青黄散后未见肝肾功能异常。结论:复方青黄散治疗MDS患者的血液学进步率为91.8%,复方青黄散对红系改善较为明显。研究二 骨髓增生异常综合征小鼠模型的建立及复方青黄散的药效学研究目的:为了解复方青黄散药效学,本研究建立骨髓增生异常综合征转基因小鼠模型并进行复方青黄散的药效学研究。方法:本研究利用M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ和TPM+移植小鼠的转基因MDS模型小鼠。M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ和TPM+小鼠发病后,将其骨髓移植到受体鼠体内（B6J和B6J*129）,TPM+移植小鼠给予多西环素食物诱导发病,M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ移植小鼠则等待发病。移植后监测小鼠移植物嵌合度。小鼠发病后将16只分为两组,分别给予复方青黄散或PBS灌胃治疗,每周5次,连续4周。复方青黄散给药小鼠药物剂量为4.2mg/kg/天,PBS组给予100ul/天。评价给药前、后小鼠血常规的变化,记录小鼠的生存时间。结果:（1）M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ和TPM+移植小鼠移植1月后移植物嵌合度检测:M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ移植小鼠CD45.2+细胞群所占百分比为76.19±3.21%,TPM+移植小鼠中,GFP+细胞群所占百分比为74.59±7.22%。（2）复方青黄散和PBS治疗组小鼠治疗前血常规基线。PBS组和复方青黄散组小鼠血红蛋白、红细胞、血小板的基线一致（p=0.32,0.19,0.55）。（3）复方青黄散和PBS组小鼠治疗后血常规变化。①治疗后第8,15,21天,复方青黄散组小鼠血红蛋白较PBS组小鼠血红蛋白显着升高（p=0.009,0.026,0.015）;②治疗后第8,15,21天,复方青黄散组小鼠红细胞较PBS组红细胞显着升高（p=0.005,0.012,0.004）;③治疗后第21天,复方青黄散组小鼠血小板较PBS组小鼠显着升高（p=0.029）。（4）复方青黄散组和PBS组小鼠生存时间:PBS对照组小鼠中位生存时间为47.5天;复方青黄散组小鼠记录至128天,仍未得到中位生存时间,复方青黄散治疗组小鼠的生存时间较PBS组显着延长（p=0.04）。结论:复方青黄散可改善MDS模型小鼠贫血、血小板减少,延长其生存时间。研究三 复方青黄散改善贫血的作用机制研究目的:为了解复方青黄散改善贫血的作用机制,本研究利用MDS小鼠和正常小鼠及MDS患者和正常人的细胞进行体内、外作用机制和分子作用机制研究。方法:（1）采用CCK-8法分析复方青黄散对正常小鼠和人的细胞以及MDS小鼠和人的细胞的细胞活力的作用;（2）采用流式细胞术分析MDS小鼠复方青黄散和PBS干预后骨髓造血干细胞和红细胞前体细胞分化;（3）采用克隆形成簇、红细胞爆发集落形成簇和红细胞集落形成簇分析,对MDS小鼠骨髓和正常小鼠骨髓进行体外培养,研究复方青黄散对红系分化的体外作用;（4）采用免疫蛋白电泳和定量PCR,探讨复方青黄散对MDS克隆和正常克隆的分子学作用机制。结果:（1）复方青黄散对MDS小鼠细胞、MDS患者细胞、正常小鼠和人脐带血细胞无细胞活力抑制作用,可促进MDS-L细胞分化。（2）MDS小鼠给予复方青黄散治疗后,红细胞前体细胞群Ⅰ、Ⅱ较PBS组显着增加（p=0.014,p=0.031）,成熟红细胞群Ⅳ较PBS组显着减少（p=0.039）;复方青黄散组正常造血干细胞群较PBS组显着增加（p=0.006）,复方青黄散组小鼠脾脏较PBS组显着减小（p=0.032）。（3）体外TPM+骨髓移植小鼠骨髓细胞、TPM+、TPM-小鼠骨髓细胞和正常小鼠骨髓的BFU-E和CFU-E培养结果显示:复方青黄散组BFU-E和CFU-E的克隆计数和细胞数均较PBS组增加（p<0.05）。（4）正常小鼠给予复方青黄散治疗后,小鼠的LSK,MPP2,MPP3,MPP4及Pre-CFU-E、Pro-E+CFU-E细胞群均较PBS组增加（p<0.05）,两组小鼠的脾脏重量和血常规改变无差异（p>0.05）。（5）复方青黄散可下调M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ细胞HIF1A蛋白及下游Binp3,Binp31,Ldha,Hk2,Ddit4基因表达,上调M11PTD/WT/Runx1Δ/Δ细胞P53、MDM2、VHL蛋白的表达。（6）复方青黄散可上调正常细胞GATA1、GATA2、GATA3蛋白表达。结论:复方青黄散通过促进MDS克隆和正常细胞的红系分化而改善贫血。复方青黄散改善贫血的分子作用机制为:下调MDS克隆HIF1A表达,发挥抑制MDS克隆作用,使MDS克隆向正常红系分化;上调正常细胞的GATA1、GATA2、GATA3,促进正常细胞的红细胞系分化。
唐暐[10]（2015）在《白消安为主的预处理方案治疗急性白血病》文中提出背景与目的白消安静脉制剂取代传统口服白消安作为预处理方案药物之一,应用于外周血造血干细胞移植可有效降低药物毒性从而降低移植的治疗死亡率已在临床上得到广泛的认可。但是,目前还没有就白消安应用于急性淋巴细胞白血病异基因外周血干细胞方面的相关报道,为此,我们临床就白消安环磷酰胺作为传统的预处理方案应用于急性淋巴细胞白血病异基因外周血干细胞移植所产生的药物毒性及移植的治疗相关死亡率进行的一定的研究。材料与方法我们回顾性分析了从2007年1月至2010年10月中的42例找到HLA相合供者并应用白消安环磷酰胺作为预处理方案的异基因外周血干细胞移植患者,其中同胞供者的移植患者为18例,非相关供者移植的患者为24例。42例接受移植的患者中有33例为第一次完全缓解状态下接受移植,2例为第二次完全缓解状态下接受移植,7例为二次缓解以上的状态接受外周血造血干细胞移植。患者的中位年龄为28岁（范围1755岁）。结果42例白消安环磷酰胺预处理异基因外周血干细胞移植患者中位随访15个月（范围148个月）,13例患者死亡,30个月总体生存率:第一次完全缓解后移植的总生存率为56.5%±10.6%（65.7%±12.5%）;第二次完全缓解后再接受移植的总生存率为25.4%±15.5%（P<0.001）。42例患者中有11例患者于移植后226个月复发,统计显示第一次完全缓解后接受移植后30个月复发率为40%±10.9%（32.0%±12.7%）,而第二次及之后缓解的患者接受移植后随访30个月复发率为71.4%±17.1（P=0.001）。II-IV度急性移植物抗宿主病（acute graft-versusdisease,GVHD）的发生率为39.2%±8.8%,III-IV度急性移植物抗宿主病发生率为7.4%±4.1%。慢性移植物抗宿主病发生率为63.9%±11.7%,广泛慢性移植物抗宿主病发生率为19.3%±7.9%。42例移植患者中2例临床诊断为静脉阻塞综合症（venoocclusive disease,VOD）,肝静脉栓塞综合征的发生率为4.7%,仅1例因严重肝静脉栓塞综合征而死亡。其它白消安环磷酰胺预处理移植相关的毒性还包括1例患者出现弥漫性肺泡出血和例患者出现出血性膀胱炎。4例患者因治疗相关毒性而死亡,随访30个月白消安环磷酰胺预处理移植治疗相关死亡率为9.7%±4.6%。总结白消安环磷酰胺预处理方案可安全应用于成人急性淋巴细胞白血病患者外周血造血干细胞移植,其具有低静脉阻塞综合症发生率及低治疗相关死亡率优势。背景与目的探索有效治疗难治复发急性髓细胞白血病的异基因外周血干细胞移植预处理方案,本项单臂II期临床研究采用福达拉滨、阿糖胞苷及去甲氧柔红霉素方案化疗以有效降低肿瘤负荷,并于化疗结束7天后予以清髓预处理后行异基因外周血干细胞移植。材料及方法复发难治急性髓细胞白血病患者予以福达拉滨、阿糖胞苷及去甲氧柔红霉素化疗以最大程度降低患者体内的肿瘤负荷,于化疗结束7天,即于患者骨髓抑制期予以福达拉滨、白消安清髓预处理并输注经集落刺激因子动员的人类白细胞抗原（HLA,human leucocyte antigen）相合的同胞或非相关供者的外周血干细胞行外周血干细胞移植。移植后对患者的2年无白血病生存率、完全缓解率、移植后2年的总生存率、非复发死亡率及复发率等进行随访。结果16例难治复发急性髓细胞白血病患者,平均年龄为36岁（1660岁）,9例初次诱导化疗未有缓解、2例缓解后早期复发、5例处于复发或难治期急性髓细胞白血病患者加入临床研究。这些患者平均前期接受化疗的次数为4次（310次）,加入临床研究前16例患者骨髓白血病细胞平均为55%（190%）,16例患者中6例患者行HLA相合同胞供者外周血干细胞移植,10例接受HLA相合的非相关供者异基因外周血干细胞移植。移植后随访28天时,15例患者骨髓缓解（11例患者达到完全缓解,4例患者骨髓缓解但血小板未有完全恢复）。进一步随访,8例患者移植后持续完全缓解存活,中位无白血病生存率为29.5月（9.540.5月）,4例患者移植后复发（其中3例复发死亡）,另4例患者因移植相关毒性死亡。2年非复发相关死亡率及复发率分别为25.0±10.8%及33.4±13.8%,2年总生存率为53.5±13.1%,2年无白血病生存率为50.0±12.5%。按照Simon II临床研究设计,随访异基因外周血干细胞移植后2年,14例患者中5例及以上患者始终骨髓保持缓解则提示此临床研究有进一步发展价值。结论基于以上的II期临床研究结果可见应用福达拉滨、阿糖胞苷及去甲氧柔红霉素化疗降低白血病肿瘤细胞负荷后行以福达拉滨及白消安为主的预处理方案行外周血干细胞移植有效治疗复发难治急性髓细胞白血病,并有意义行大样本的III临床研究（临床研究专利:NCT01496547）。
二、骨髓移植治疗急性髓细胞白血病（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、骨髓移植治疗急性髓细胞白血病（论文提纲范文）
（1）升麻鳖甲汤加减方通过PI3K/AKT通路抑制急性髓系白血病血管新生的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 理论研究 |
| 一、西医研究进展 |
| (一) 急性髓系白血病的概况 |
| (二) 病因学 |
| (三) 分类标准 |
| (四) 基因突变及预后 |
| (五) 血管新生与血液系统肿瘤的关系 |
| (六) 治疗方法 |
| 二、中医研究进展 |
| (一) 中药复方治疗AML |
| (二) 中药化合物治疗AML |
| 第二章 实验研究 |
| 第一部分 升麻鳖甲汤加减方影响荷瘤小鼠血管新生能力 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 第二部分 升麻鳖甲汤加减方抑制HUVECs的功能 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 第三部分 升麻鳖甲汤加减方干预的AML细胞上清影响HUVECs功能 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 第四部分 升麻鳖甲汤加减方抑制VEGF165刺激的HUVECs功能 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 第五部分 升麻鳖甲汤加减方抑制血管新生的机制研究 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论与展望 |
| 结论 |
| 创新性 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 中英文缩略词 |
| 攻读博士学位期间取得的学术研究成果 |
| 致谢 |
（2）自体外周血造血干细胞和自体骨髓移植治疗急性髓性白血病的临床研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 治疗方法 |
| 1.3 疗效判定 |
| 1.3.1 疗效评价标准 |
| 1.3.2 复发标准 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 临床疗效 |
| 2.2 复发情况 |
| 3 讨论 |
（3）造血干细胞移植治疗恶性血液病的研究与分析（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 入选标准 |
| 1.3 分析方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 SCI数据库2001/2010收录关于造血干细胞移植治疗恶性血液病检索词的文献计量结果 |
| 2.2 SCI数据库2001/2010收录造血干细胞移植治疗急性髓性白血病的文献分析 |
| 2.2.1 文献类型分布 |
| 2.2.2 国家分布 |
| 2.2.3 机构分布 |
| 2.2.4 文献出版物分析 |
| 2.2.5 文献年计量分析 |
| 2.3 SCI数据库2001/2010收录造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤的文献分析 |
| 2.3.1 文献类型分布 |
| 2.3.2 国家分布 |
| 2.3.3 机构分布 |
| 2.3.4 学科类别分析 |
| 2.3.5 文献年计量分析 |
| 2.4 SCI数据库2001/2010收录造血干细胞移植治疗慢性髓细胞白血病的文献分析 |
| 2.4.1 文献类型分布 |
| 2.4.2 国家分布 |
| 2.4.3 机构分布 |
| 2.4.4 文献年计量分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 造血干细胞移植治疗恶性血液病文献出版年份的分析 |
| 3.2 造血干细胞治移植治疗恶性血液病文献国家的分析 |
| 3.3 造血干细胞移植治疗恶性血液病文献研究机构的分析 |
| 3.4 造血干细胞移植治疗恶性血液病文献数据的总体分析 |
（4）PD-L1对急性髓系白血病糖酵解的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 PD-L1在AML中的表达及对临床预后影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 应用GEPIA网站分析AML患者中PD-L1基因表达水平及与生存之间的关系 |
| 3.2 应用GEPIA网站对AML患者中PD-L1基因与糖酵解相关基因进行相关性分析 |
| 3.3 应用GEPIA网站对AML患者中PD-L1基因与HIF-1α基因进行相关性分析 |
| 3.4 PD-L1在AML患者骨髓单个核细胞中的表达 |
| 3.5 糖酵解相关基因和HIF-1α基因在AML患者骨髓单个核细胞中表达 |
| 3.6 PD-L1基因与糖酵解相关基因相关性分析 |
| 3.7 PD-L1基因与HIF-1α基因相关性分析 |
| 3.8 PD-L1的表达水平与AML患者临床特征的关系 |
| 3.9 PD-L1表达与AML患者生存预后之间的关系 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二部分 PD-L1在体内及体外对AML细胞生物学功能的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 检测AML细胞株内PD-L1的mRNA及蛋白表达 |
| 3.2 过表达及干扰PD-L1基因细胞株的构建 |
| 3.3 过表达PD-L1基因Molm-13细胞株的鉴定 |
| 3.4 干扰PD-L1基因THP1细胞株的鉴定 |
| 3.5 免疫荧光观察过表达和干扰PD-L1在AML细胞中情况 |
| 3.6 PD-L1对AML细胞的生物学行为的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分 PD-L1对AML细胞糖酵解的影响及机制研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 转录组测序检测PD-L1在AML细胞中的作用 |
| 3.2 筛查CD34+细胞和AML各细胞系中糖酵解相关基因的表达 |
| 3.3 PD-L1的表达变化对AML细胞糖酵解相关基因的影响 |
| 3.4 PD-L1的表达变化对AML细胞糖酵解的影响 |
| 3.5 PD-L1的表达变化对AKT/mTOR/HIF-1α通路的影响 |
| 3.6 双荧光素酶报告基因实验验证HIF-1α对HK2、LDHA的靶向调控 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 急性髓系白血病代谢重编程的研究现状与进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
（5）自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病77例（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 造血重建情况 |
| 2.2 移植后存活情况 |
| 2.3 移植后维持治疗对患者骨髓功能的影响 |
| 3 讨论 |
（6）甲状旁腺激素调控骨髓微环境影响白血病发病及多药耐药的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 第二章 急性髓系白血病来源间充质干细胞(AML-MSCs)诱导K562-ADM形态转化 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 甲状旁腺激素通过对AML-MSCs的作用调控K562/K562-ADM的 增殖与凋亡 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 甲状旁腺激素通过改变BMP4、CTGF的表达调控K562/K562-ADM的耐药 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 第五章 BMP4、CTGF表达水平与急性髓系白血病患者预后与耐药的相关性研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 结论 |
| 第六章 结论 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 英文缩写词与中英文对照 |
（7）自体骨髓移植联合MHC单倍体相合淋巴细胞治疗急性髓性白血病的临床疗效（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 治疗方法 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组患者造血系统重建结果 |
| 2.2 两组患者复发情况 |
| 2.3 两组患者并发症情况 |
| 2.4 移植后患者生存分析 |
| 3 讨论 |
（8）自体造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 自体造血干细胞的动员与采集 |
| 2.3 预处理方案 |
| 2.4 造血干细胞回输 |
| 2.5 并发症的预防及支持治疗 |
| 2.6 移植后维持治疗 |
| 2.7 主要观察指标 |
| 2.8 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.0 基本情况 |
| 3.1 造血重建 |
| 3.2 移植相关并发症 |
| 3.2.1 感染 |
| 3.2.2 其他早期并发症 |
| 3.2.3 远期并发症 |
| 3.3 随访 |
| 3.3.1 恶性淋巴瘤患者生存分析 |
| 3.3.2 多发性骨髓瘤患者生存分析 |
| 3.3.3 急性白血病患者生存分析 |
| 3.3.4 其他 |
| 3.4 影响患者移植后OS、PFS的单因素分析 |
| 3.5 影响患者移植后OS、PFS的多因素分析 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 研究不足及展望 |
| 6.1 研究不足 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（9）复方青黄散调控HIF1A/GATA信号通路改善骨髓增生异常综合征红系造血（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 复方青黄散治疗MDS的临床研究 |
| 1. 研究内容 |
| 1.1 研究目的 |
| 1.2 病例来源 |
| 1.3 研究方案 |
| 1.4 病例选择 |
| 1.5 纳入和排除标准 |
| 1.6 治疗方法 |
| 1.7 疗效评价标准 |
| 1.8 患者资料 |
| 1.9 统计学分析 |
| 2. 研究结果 |
| 2.1 临床疗效 |
| 2.2 外周血细胞计数 |
| 2.3 输血量改变 |
| 2.4 不同年龄疗效比较 |
| 2.5 不同性别疗效比较 |
| 2.6 不同染色体核型疗效比较 |
| 2.7 不同IPSS-R危度疗效比较 |
| 2.8 安全性评价 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 复方青黄散的药效学和作用机制研究 |
| 第一节 MDS小鼠模型建立及复方青黄散的药效学研究 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 骨髓细胞提取 |
| 1.3 药物干预方案 |
| 1.4 外周血细胞计数 |
| 1.5 流式细胞术检测细胞表面标记物 |
| 1.6 动物实验伦理 |
| 1.7 仪器和设备 |
| 1.8 试剂 |
| 1.9 统计学分析 |
| 2. 研究结果 |
| 2.1 MDS小鼠移植物嵌合度检测 |
| 2.2 复方青黄散干预前MDS小鼠外周血细胞计数 |
| 2.3 复方青黄散干预后MDS小鼠外周血细胞计数 |
| 2.4 复方青黄散干预后MDS小鼠生存时间 |
| 3. 讨论 |
| 第二节 复方青黄散改善贫血的作用机制研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 细胞 |
| 1.3 CCK-8法检测细胞活力 |
| 1.4 流式细胞术检测细胞表面标记物 |
| 1.5 q-PCR检测目的基因表达 |
| 1.6 Western-bolt检测目的蛋白表达 |
| 1.7 克隆形成蔟分析 |
| 1.8 实验仪器及耗材 |
| 1.9 统计学分析 |
| 2. 研究结果 |
| 2.1 复方青黄散对小鼠和人源细胞细胞活力的作用 |
| 2.2 复方青黄散对MDS小鼠骨髓造血的作用 |
| 2.3 复方青黄散对MDS小鼠骨髓红系分化的体外作用 |
| 2.4 复方青黄散对正常小鼠造血的作用 |
| 2.5 复方青黄散对正常小鼠骨髓红系分化的体外作用 |
| 2.6 复方青黄散对MDS克隆的分子作用机制 |
| 2.7 复方青黄散对正常细胞的分子作用机制 |
| 2.8 复方青黄散中雄黄、青黛对正常小鼠骨髓红系分化的体外作用 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 文献综述 |
| (一) 中医论治骨髓增生异常综合征的研究进展 |
| (二) 西医诊治骨髓增生异常综合征的研究进展 |
| (三) 红细胞分化成熟机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附录 |
（10）白消安为主的预处理方案治疗急性白血病（论文提纲范文）
| 主要符号和缩略语说明 |
| 第一部分 白消安为主的预处理方案治疗急性淋巴细胞白血病 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 绪论 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 白消安为主的预处理方案治疗复发难治急性非淋巴细胞白血病 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 绪论 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 发表及待发表的文章 |
| 致谢 |
四、骨髓移植治疗急性髓细胞白血病（论文参考文献）
- [1]升麻鳖甲汤加减方通过PI3K/AKT通路抑制急性髓系白血病血管新生的机制研究[D]. 王梦亚. 南京中医药大学, 2020(08)
- [2]自体外周血造血干细胞和自体骨髓移植治疗急性髓性白血病的临床研究[J]. 钟樱红,罗华山,黎民君,郭丽堃,冯思琼. 当代医学, 2015(11)
- [3]造血干细胞移植治疗恶性血液病的研究与分析[J]. 吴必嘉,龚峻梅,郭天剑,陈万红,李娜. 中国组织工程研究, 2012(23)
- [4]PD-L1对急性髓系白血病糖酵解的影响及机制研究[D]. 马平. 郑州大学, 2020(02)
- [5]自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病77例[J]. 靖彧,于力,刘海川,姚善谦,楼方定,张伯龙,高春记,周绮,李红华,薄剑,王全顺,赵瑜,朱海燕. 中国组织工程研究与临床康复, 2008(47)
- [6]甲状旁腺激素调控骨髓微环境影响白血病发病及多药耐药的研究[D]. 李海鹰. 兰州大学, 2019(02)
- [7]自体骨髓移植联合MHC单倍体相合淋巴细胞治疗急性髓性白血病的临床疗效[J]. 石瑞平,韩婷婷,郭树霞. 现代肿瘤医学, 2019(10)
- [8]自体造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床研究[D]. 杨文娟. 甘肃中医药大学, 2020(10)
- [9]复方青黄散调控HIF1A/GATA信号通路改善骨髓增生异常综合征红系造血[D]. 范腾. 中国中医科学院, 2020(01)
- [10]白消安为主的预处理方案治疗急性白血病[D]. 唐暐. 上海交通大学, 2015(02)
标签：急性髓性白血病; 急性淋巴细胞性白血病; 慢性粒细胞白血病; 骨髓细胞; m3白血病;