感染性心包积水一例禽腺病毒的分离

感染性心包积水一例禽腺病毒的分离

一、从传染性心包积水病例分离出禽腺病毒(论文文献综述)

张蕾,栾勇娇,谢芝勋,罗思思,谢丽基,黄娇玲,谢志勤,曾婷婷,张民秀,王盛,范晴,张艳芳[1](2020)在《一株血清4型禽腺病毒的分离鉴定及分析》文中认为为探究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的遗传变异情况,对广西某鸡场疑似该病的病料进行鸡胚接种、PCR扩增和hexon基因测序,分离鉴定出1株广西FAdV-4,并对其进行全基因组测序。该毒株基因组全长43 722 bp,包括44个开放阅读框,与国内18株FAdV-4和国外4株FAdV-4代表毒株核苷酸同源性分别为99.8%~100%和94.8%~95.7%。Hexon和penton基因与FAdV-4核苷酸同源性为98.6%~100%,与国外毒株相比存在氨基酸的突变;fiber基因与FAdV-4核苷酸同源性为94.8%~100%,与国外毒株相比,除了存在氨基酸的突变,还有插入和缺失,fiber-2比fiber-1突变较多。研究结果为广西FAdV-4的遗传进化情况提供了参考资料。

张蕾[2](2020)在《FAdV-4广西分离株全基因测序分析及其感染CEL和SPF鸡对细胞因子mRNA转录水平影响的研究》文中研究指明禽腺病毒血清4型(FAd V-4)是双链DNA病毒,基因组全长约43 kb,主要感染3~6周龄肉鸡,引起心包积水-肝炎综合征(HHS),具有很强的传染性和致病性。自2014年以来,该病在我国呈暴发式流行,给养禽业带来巨大的经济损失。2016年起,广西多地养鸡场开始出现疑似该病的感染,但FAd V-4在广西地区的流行情况和对细胞因子影响的分析却鲜有报道。本研究从广西某养鸡场疑似FAd V-4感染的鸡肝脏中分离并鉴定出1株FAd V-4分离株FAd V-4-GX2017-005。对该毒株进行动物回归试验和全基因测序分析,并进一步用该毒株感染鸡胚肝细胞及SPF鸡,探究其对细胞因子转录水平的影响,为了解FAd V-4的流行情况提供数据参考,同时也为防控FAd V-4奠定基础。具体研究内容如下:本研究从广西地区疑似感染FAd V-4鸡中采集肝脏组织,经鸡胚肝细胞传代分离病毒、蚀斑纯化、再经FAd V-4 PCR鉴定、组织半数感染量测定和血清中和试验鉴定、动物回归试验等验证。PCR结果显示该毒株FAd V-4呈阳性,其他常见病原PCR检测结果为阴性;测序结果显示该毒株为FAd V-4,命名为:FAd V-4-GX2017-005;FAd V-4阳性血清能够中和该毒株的感染,进一步证明该毒株为FAd V-4;动物回归试验表明FAd V-4-GX2017-005能导致SPF鸡出现食欲减退、闭眼嗜睡、拉黄绿色稀粪等临床症状,剖检发现心包积水、肝脏出血黄染肿胀、肾脏肿胀充血等症状,此外病死鸡的病理组织切片显示肝脏、肾脏、肺脏、脾脏、胸腺、法氏囊均出现了病理变化。从表现的临床症状、剖检特点以及病理特征分析符合FAd V-4的典型特征,并进一步证实该分离株具有较强的致病能力,为广西地区FAd V-4的致病性和防控研究提供参考资料。通过全基因测序和生物信息学分析,本研究成功获得广西分离株FAd V-4-GX2017-005的全基因序列。分析发现该毒株基因组全长43,722 bp,共编码43个开放阅读框,全长核苷酸序列与国内分离株相似性为99.8%~100%,与国外分离株相似性为94.8%~95.7%。对该毒株重要结构基因hexon、penton和fiber的核苷酸序列比对分析,发现与国内外参考株相似性为96.0%~100%;经进一步深入分析该毒株所编码的氨基酸序列,发现其氨基酸序列中部分基酸位点发生突变,并在三个重要结构蛋白中,发现均存在多个潜在糖基化位点和磷酸化位点,fiber基因还存在氨基酸的插入和缺失。为了深入分析FAd V-4-GX2017-005分离株对细胞因子m RNA转录水平的影响,分别将其感染鸡胚肝细胞(CEL)和SPF鸡。首先将FAd V-4-GX2017-005感染CEL,分析其在CEL中增殖情况及对细胞因子表达量的影响。结果显示FAd V-4-GX2017-005感染CEL后表现出很好的亲嗜性,通过检测病毒hexon基因的表达量,发现病毒在感染后24 h开始迅速增殖,48 h开始细胞出现明显病变,60 h病毒达到最高。通过荧光定量PCR检测细胞因子在m RNA水平表达量的变化,在病毒感染后1~72 h,IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12和IL-15表达量变化不大,84~120 h显着上调,而IL-18的表达量在整个感染期间无明显变化规律。其次感染SPF鸡,通过滴鼻点眼FAd V-4-GX2017-005感染4周龄的SPF鸡,建立动物感染模型,进一步深入研究该分离株对SPF鸡细胞因子m RNA转录的影响。感染后4天SPF鸡开始出现精神沉郁、羽毛松乱等症状,5天有部分鸡死亡,7天鸡群的状态开始恢复。剖检观察,发现病死鸡出现典型的心包积水和肝脏肿胀出血。通过荧光定量PCR检测细胞因子表达量的变化,发现感染组SPF鸡的心脏、肝脏、肾脏、肺脏、脾脏、胸腺和法氏囊中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15和IL-18的表达量均出现不同程度上调,且在感染后5天或6天表达量最高(P<0.05)。本研究成功分离并鉴定出1株FAd V-4广西分离株FAd V-4-GX2017-005,动物回归试验显示该毒株感染SPF鸡后出现典型的心包积水-肝炎综合征,能对SPF鸡组织器官造成严重的病理损伤,表明该分离株具有很强的致病性。全基因序列分析发现,FAd V-4-GX2017-005毒株存在部分氨基酸位点的变异,说明广西分离的FAd V-4流行株与其它地区分离的FAd V-4毒株存在差异。FAd V-4-GX2017-005分离株可以在CEL中增殖并导致细胞病变,感染后84~120 h能引起细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12和IL-15表达量显着上调。感染SPF鸡5天或6天后,心脏、肝脏、肾脏、肺脏、脾脏、胸腺和法氏囊中细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15和IL-18表达量最高。本研究为了解FAd V-4在广西的流行情况提供了数据参考,也为今后深入研究FAd V-4的分子致病机制奠定了基础。

高亮[3](2019)在《吉林省鸡安卡拉病毒流行毒株的分离鉴定及其生物学特性分析》文中认为鸡安卡拉病是由禽腺病毒Ⅰ群血清4型引起的一种以心包积水肝炎综合征为主要特征的急性传染病。1987年,该病在巴基斯坦安加拉哥特地区发现第一起病例,因此以地名命名该病。据当时的报道,1988年夏季在费萨拉巴德发生该病,随后扩散到全巴基斯坦,造成了过亿只鸡死亡[1]。自此,该病在北美洲国家、欧洲国家、亚洲国家等多个国家相继被报道。1997年安卡拉病传入中国,由于当时在我国并没有造成大范围流行,因此未引起我国养禽业的重视[2]。但是,从2015年往后,安卡拉病在国内多个省市,如辽宁、河南、河北、湖北、江苏、吉林等地爆发,给养禽业造成了不小的经济损失。本实验对吉林地区九台、合心、龙嘉等多个养鸡场肉鸡疑似发病鸡群,采集病死鸡的肝脏,分离出一株野毒株,命名为FAd V4-JL16865株,提取DNA,并进行特异性引物的设计,进行PCR扩增,然后测序和序列分析。选择被感染的鸡的肝脏进行研磨,制成悬液,反复冻融三次,进行离心,取上清液,经尿囊腔接种9日龄的SPF鸡胚,盲传三代,观察鸡胚的生长发育和死亡情况。然后将第三代尿囊液接种到5日龄的SPF鸡胚,以观察鸡胚感染后的临床症状,是否死亡等情况,7天后,全部扑杀,采集心脏、肝脏等组织器官制作组织切片,经HE染色观察组织病理学损伤。然后对分离鉴定后的毒株做生物学特性分析。实验证明:从吉林地区采样的疑似发生鸡安卡拉病的不同鸡场分离到的17份病料中,分离到10株安卡拉病毒,接种鸡胚后能导致鸡胚精神沉郁、发育减缓,从第三天开始出现死亡的现象。组织学观察表明,本实验分离到的毒株能引起心肌细胞、肝细胞等多种组织发生颗粒变形、空泡变性以及坏死等损伤。从中选取一株表达比较好的毒株进行了全基因序列测序并分析,根据系统发育树显示,分离到毒株与I群禽腺病毒C亚群同源性最高,并与血清4型在同一分支上,证明了该毒株就是鸡安卡拉病毒。随后,针对吉林地区规模化养殖场进行采样,开展发病情况调查,统计发现在510份样本中,FAV4检出率为11.57%。结论:本实验成功分离鉴定一株鸡安卡拉病毒,命名为FAd V4-JL16865株,该毒株能使鸡胚发生肝炎等病理损伤,并给心脏、肝脏带来组织改变,对毒株进行热敏感性、酸碱度敏感性和有机溶剂等理化特性的检测,了解毒株的生物学特性;发病情况调查结果显示,在510份样本中,FAV4阳性检出率为11.57%。

黄潆艺[4](2017)在《鸡安卡拉病病原分离鉴定及病理学和血清学研究》文中指出鸡安卡拉病的病原为禽腺病毒Ⅰ群血清4型(Fowl adenovirus 4,FAdV4),临床上以心包积液为主要特征。该病最早发现于1987年,在巴基斯坦的安卡拉(Angara)地区一个肉鸡场发生爆发性流行,因此通常称作安卡拉病。目前该病在伊拉克、印度、智利、美国南部和中部、加拿大、匈牙利、波兰、韩国、俄罗斯、日本等多个国家都有发病报道。我国自2015年开始,该病在辽宁、山西、山东、河北、吉林、江苏等多个省市爆发,给养殖业造成巨大的经济损失。本实验对天津地区某养殖场65周龄肉种鸡和辽宁抚顺地区某养殖场11日龄商品蛋鸡疑似发病鸡群,采集病死鸡的肝脏,提取DNA,根据Hexon基因设计特异性引物进行PCR扩增,进行测序和序列分析。对病变肝脏经研磨后处理,反复冻融三次后离心取上清液,经尿囊腔接种7-9日龄SPF鸡胚,盲传3代,观察鸡胚生长发育及死亡情况。收集第三代尿囊液接种1日龄SPF雏鸡,观察临床症状及死亡情况,未死亡的于7日龄扑杀,采集心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、气管、法氏囊、胰腺、小肠等组织器官做石蜡切片,经HE染色观察组织病理学损伤。同时采血检测血液内总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、肌酐(CRE)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等9项与心脏、肝脏和肾脏相关的血液生化指标。结果:两株分离鸡安卡拉病毒毒株均能导致鸡胚发育迟缓,蜷缩,其中T组天津株接种鸡胚后第6d后死亡,鸡胚体表出血。SPF鸡F组接种病毒(抚顺株)后,从4d开始出现死亡现象。组织学观察表明,所分离的两株病毒均能引起心肌细胞、肝细胞以及肾小管上皮细胞等多种组织发生颗粒变性、水泡变性以及坏死等损伤。血液生化指标检测表明,所分离的两株鸡安卡拉病毒均可引起雏鸡血清内白蛋白含量下降,乳酸脱氢酶含量轻微上升,尿素氮、肌酐和肌酸激酶含量显着上升,碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和尿酸含量极显着上升,表明两株分离株均可影响SPF鸡的心脏功能、肝功能和肾功能。结论:本实验成功分离鉴定两株鸡安卡拉病毒,分别命名为天津株T和抚顺株F,两株病毒均可引起鸡胚和雏鸡出现特征性病理学损伤和心脏、肝脏和肾脏功能性改变。

张宇,乔涵,徐朋丽,杨兴武,韩昊莹,陈红英[5](2017)在《禽腺病毒4型河南株Hexon全基因的克隆及遗传进化分析》文中研究指明【目的】分析禽心包积水-包涵体肝炎综合征的主要病原禽腺病毒4型(FAV-4)在河南省的流行和遗传变异情况。【方法】对2015年8-10月送检的40份疑似FAV-4感染的病料进行PCR阳性检测,同时根据采集地区与宿主的差异性,选取7份FAV-4阳性样品进行了Hexon全基因的扩增、克隆、测序和遗传进化分析。【结果】通过扩增Hexon基因421bp的片段,成功建立了禽腺病毒4型的PCR检测方法;40份家禽肝脏样品中,PCR检测显示35份为FAV-4阳性,阳性率为87.5%;成功扩增了包含Hexon基因全序列的片段,长度为2 889bp;7株FAV-4河南株的Hexon基因与GenBank中的12株FAV-4参考毒株Hexon基因序列之间核苷酸序列同源性为98.5%99.8%,与参考株相比存在碱基的插入、突变现象;FAV-4河南株Hexon全基因推导的氨基酸序列与参考株之间的同源性为98.2%99.8%,且发生变化的位置集中在前段和中段。【结论】FAV-4河南株与印度分离株亲缘关系较近,但与韩国分离株亲缘关系相对较远。

张媛媛[6](2017)在《血清4型Ⅰ群禽腺病毒对不同日龄SPF鸡的致病性研究》文中指出心包积水-肝炎综合征(Hydropericardium Hepatitis Syndrome,HHS),又称安哥拉(Angara)病,是由腺病毒科的Ⅰ群禽腺病毒血清4型引起的以心包积水和包涵体肝炎为特征的一种高度接触性传染病。1987年在巴基斯坦安哥拉地区爆发了一种新病,其临床症状与包涵体肝炎(Inclusion Body Hepatitis,IBH)相似却又伴有严重心包积水的“新”综合征。随后该病在印度、科威特、伊朗、日本、墨西哥等地相继发生,经研究证实,这些地区的心包积水-肝炎综合征均由Ⅰ群禽腺病毒的血清4型(Fowl Adenovirus serotype 4,FAV-4)引起。2015年6月以来,我国湖南、江苏、河南、山东、河北、辽宁、安徽、吉林等省的部分地区鸡群出现了一种可以引起鸡心包积液和包涵体肝炎为特征的血清4型Ⅰ群禽腺病毒感染。该病多呈急性经过,且多发生于3-5周龄的肉用仔鸡,发病后第4-8d为死亡高峰,病程8-15d,死亡率为20%-80%,目前,该病在杂交鸡、麻鸡、种鸡、蛋鸡和肉鸭也可发生,给我国养禽业造成了严重的威胁,并造成严重的经济损失,因此加强对该病的研究,对于保护和促进我国养禽业的发展具有重要意义。本试验将90只10日龄SPF鸡,随机分为口腔攻毒组(30只)、肌肉攻毒组(30只)和对照组(30只)3组,每组用隔离罩隔离饲养。口腔攻毒组鸡,每只口腔注射1mL(EID50=10-7.569/0.2mL)病毒液;肌肉攻毒组鸡,每只肌肉注射1mL(EID50=10-7.569/0.2mL)病毒液;对照组鸡,每只注射1mL生理盐水。攻毒后连续观察20d,记录发病情况。分别于攻毒后第4d、8d、12d、16d和20d称重、采血,并随机剖杀攻毒组和对照组鸡各5只,观察记录感染鸡的临床症状和剖检变化,HE染色观察组织病理学变化,检测血清中生化指标(ALT,AST,LDH,UREA),ELISA试验测定血清中细胞因子(IL-6,IFN-γ)与抗体效价,荧光定量PCR方法检测组织中病毒载量。20日龄和10日龄组鸡的攻毒剂量及试验方法相同。两个日龄的攻毒组鸡均表现为精神沉郁,食欲减退,体重增长缓慢,且该病发病急,死亡快,死亡率较高,10日龄肌肉攻毒组的死亡率达到50%。剖检结果显示,10日龄组的病变与20日龄组类似,但是更加严重,出现明显的心包积液和包涵体肝炎现象,脾脏肿大、出血,肺脏水肿、出血,肾脏肿大,胸腺肿大、出血,且10日龄组腺胃出血。病理组织学结果表明试验鸡的肝脏、脾脏可见明显的炎性细胞浸润,心肌间质水肿增宽,胸腺与法氏囊淋巴细胞坏死。生化指标的检测结果显示,攻毒后ALT、AST、LDH、UREA的含量均升高,且明显高于对照组。细胞因子的检测结果显示,攻毒后IL-6和IFN-γ的含量均升高。对血清中抗体的检测结果显示,攻毒组抗体一直处于上升状态,且明显高于对照组。对组织中病毒载量的检测结果显示,口腔攻毒组和肌肉攻毒组的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、胰腺和法氏囊等组织器官中均检测到了病毒的存在,其中心脏和肝脏的病毒含量较高,且肌肉攻毒组各器官的病毒载量明显高于口腔攻毒组。FAV-4可侵害鸡的多个器官,导致鸡的发病,在没有母源抗体及其他病毒干扰的情况下,感染该病后小日龄鸡比大日龄鸡的病变情况更加严重。本研究表明,FAV-4对SPF鸡的致病性强弱与感染日龄和感染途径有关,小日龄比大日龄的鸡更易感,且肌肉攻毒组组比口腔攻毒组发病死亡情况更为严重,该病可侵害多个器官,病毒在组织中分布较广。

张宇,乔涵,杨兴武,徐朋丽,韩昊莹,陈红英[7](2017)在《禽心包积水-包涵体肝炎综合征的研究进展》文中认为禽心包积水-包涵体肝炎综合征(hydropericardium syndrome-inclusion body hepatitis,HPSIBH)是由禽腺病毒4型(fowl adenovirus-4,FAV-4)引起的一种具有高度传染性与高死亡率的急性传染病。该病最早于1987年在巴基斯坦的安哥拉地区被报道出来,因此又称"安哥拉病"。2013年4月至2014年8月,该病在我国江苏盐城地区爆发,2015年夏季该病在山东、河南、辽宁、广东等地又呈现大规模爆发,给我国家禽业带来了重大的经济损失。文章系统介绍了该病以及其主要病原FAV-4的最新研究进展,为我国对该传染病的诊治与预防提供理论参考。

朱后顺[8](2010)在《鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其斑点杂交方法的建立》文中研究说明鸡包涵体肝炎(chicken inclusion body hepatitis,IBH)是由禽腺病毒引起的一种急性传染病,已知有12种血清型的禽腺病毒与本病有关。病鸡死亡突然增多,严重贫血、黄疸、肝脏肿大出血和坏死灶,可见肝细胞核内有包涵体。该病又称贫血综合征。禽腺病毒主要侵害肝脏组织,并在感染细胞内产生核内包涵体。据报道我国山东地区以及内蒙地区鸡包涵体肝炎流行的致病毒株血清型主要为血清八型。因其可导致肉鸡蛋鸡的生产性能的下降,以及导致免疫抑,造成免疫失败或易发继发感染,因而得到越来越多的关注。然而生产实践中尚未有一种简洁、快速、经济的检测方法,斑点杂交技术凭借简单的操作和较好的成本控制成为了比较理想的选择。参考相关文献设计一对引物,同时根据NCBI GenBank数据库中禽腺病毒各种血清型Hexon六邻体蛋白基因的保守序列设计一对引物用以相互辅证,通过PCR扩增疑似病例的肝脏病料,得到相应大小的目的产物,目的条带经过切胶回收、纯化后,进行克隆转化,获得重组菌,挑取十二个克隆进行测序,序列比对后有十株重组菌序列与禽腺病毒血清八型序列同源性在百分之九十八以上,最高达百分之九十八点八。提取重组菌质粒酶切后,用地高辛标记即为包涵体肝炎病毒核酸探针,探针进行灵敏度检测表明该探针的最小检出量为1pg,特异性检测表明探针与其他病毒核酸无交叉反应。通过条件优化后建立斑点杂交检测方法,并检测山东部分地区采集的病料。处理疑似病料接种鸡胚肾细胞,经过传代回收细胞DNA,并用探针检测,两代后可检测到鸡包涵体肝炎病毒核酸的存在,细胞实验用禽腺病毒血清八型标准毒株作为阳性对照。通过实验,表明了鸡包涵体肝炎在养殖业中的广泛存在,山东地区的主要血清型属于禽腺病毒八型,与以往的流行病学调查结果一致。建立的斑点杂交诊断方法有良好的特异性和较高的灵敏度,可以用于生产中实验室诊断和检测。

吕敏娜,党海斌,蔡建平[9](2005)在《鸡包涵体肝炎—心包积水综合征的研究进展》文中进行了进一步梳理

李凯年[10](2000)在《肉鸡心包积水肝炎综合征的最新研究进展》文中提出 近几年来,在世界上一些地区发生了一种以前未被认识的疾病。这种疾病在临床上与包涵体肝炎类似,但是其特征是可以引起严重的心包积水,造成肉鸡大量死亡。一些实验室研究表明,其病原体是一种家禽腺病毒(FAV)I群血清型4。本病的主要表现是在3—5周龄组的肉鸡发生突然死亡,死亡率可达到75%,心包积水并伴有灶性坏死的肝炎,肺水肿以及肾炎。

二、从传染性心包积水病例分离出禽腺病毒(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、从传染性心包积水病例分离出禽腺病毒(论文提纲范文)

(1)一株血清4型禽腺病毒的分离鉴定及分析(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 病料来源及鸡胚
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 主要仪器
    1.2 方法
        1.2.1 病毒的分离鉴定
        1.2.2 病毒全基因测序与分析
        1.2.3 核苷酸同源性及系统进化树分析
2 结果
    2.1 病毒的分离与鉴定
    2.2 全基因测序结果分析
    2.3 Hexon基因核苷酸序列分析
    2.4 Penton基因核苷酸序列分析
    2.5 Fiber基因核苷酸序列分析
3 讨论

(2)FAdV-4广西分离株全基因测序分析及其感染CEL和SPF鸡对细胞因子mRNA转录水平影响的研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
主要英文缩写词
第一章 文献综述
    1.1 禽腺病毒血清4型
        1.1.1 FAdV-4及流行情况
        1.1.2 FAdV-4的培养致病性
        1.1.3 FAdV-4的理化性质
        1.1.4 FAdV-4的形态结构
        1.1.5 FAdV-4的基因组结构
        1.1.6 FAdV-4全基因主要组结构蛋白与生物学功能
    1.2 细胞因子
        1.2.1 白细胞介素1β
        1.2.2白细胞介素6
        1.2.3白细胞介素8
        1.2.4白细胞介素12
        1.2.5白细胞介素15
        1.2.6白细胞介素18
    1.3 本研究的目的与意义
第二章 禽腺病毒血清4型广西分离株分离鉴定
    2.1 材料
        2.1.1 毒株、SPF鸡胚及FAd V-4 阳性血清
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 FAdV-4的分离鉴定
        2.2.2 动物回归试验
    2.3 结果
        2.3.1 病毒分离
        2.3.2 蚀斑纯化结果
        2.3.3 病毒的鉴定
        2.3.4 病毒TCID50的测定
        2.3.5 中和试验结果
        2.3.6 PCR检测和临床症状
        2.3.7 组织病理学变化
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 禽腺病毒血清4型广西分离株全基因测序及序列分析
    3.1 材料
        3.1.1 毒株
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器
    3.2 方法
        3.2.1 全基因测序引物的设计与合成
        3.2.2 病毒DNA提取
        3.2.3 FAdV-4全基因分段扩增
        3.2.4 FAdV-4全基因分段克隆
        3.2.5 FAdV-4全基因组生物信息学分析
    3.3 结果
        3.3.1 全基因PCR分段扩增结果
        3.3.2 FAdV-4全基因组测序
        3.3.3 FAdV-4全基因组核苷酸序列相似性及遗传进化分析
        3.3.4 FAdV-4主要结构蛋白核苷酸序列相似性及遗传进化分析
        3.3.5 FAdV-4主要结构蛋白氨基酸位点分析
        3.3.6 FAdV-4主要结构潜在糖基化位点预测和潜在磷酸化位点预测分析
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 FAd V-4 广西分离株感染CEL对细胞因子m RNA转录水平的影响
    4.1 材料
        4.1.1 毒株
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要仪器
    4.2 方法
        4.2.1 FAd V-4 感染CEL接种剂量的优化
        4.2.2 病毒感染CEL与样品收集
        4.2.3 总RNA提取及反转录
        4.2.4 实时荧光定量PCR检测细胞因子表达
        4.2.5 数据的统计与分析
    4.3 结果
        4.3.1 FAd V-4 感染CEL接种剂量的优化
        4.3.2 FAd V-4 结构蛋白hexon基因m RNA转录水平的变化
        4.3.3 FAd V-4 感染CEL后细胞因子m RNA转录水平的变化
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 FAd V-4 广西分离株感染SPF鸡对细胞因子m RNA转录水平的影响
    5.1 材料
        5.1.1 毒株及SPF鸡
        5.1.2 主要试剂
        5.1.3 主要试验仪器
    5.2 方法
        5.2.1 FAd V-4 感染SPF鸡及样品的采集
        5.2.2 样品总RNA提取及反转录
        5.2.4 实时荧光定量PCR检测组织样品细胞因子表达的研究
        5.2.5 数据的统计与分析
    5.3 结果
        5.3.1 FAd V-4 感染SPF鸡后心脏中细胞因子m RNA转录水平的变化
        5.3.2 FAd V-4 感染SPF鸡后肝脏中细胞因子m RNA转录水平的变化
        5.3.3 FAd V-4 感染SPF鸡后肾脏中细胞因子m RNA转录水平的变化
        5.3.4 FAd V-4 感染SPF鸡后肺脏中细胞因子m RNA转录水平的变化
        5.3.5 FAd V-4 感染SPF鸡后脾脏中细胞因子m RNA转录水平的变化
        5.3.6 FAd V-4 感染SPF鸡后胸腺中细胞因子m RNA转录水平的变化
        5.3.7 FAd V-4 感染SPF鸡后法氏囊中细胞因子m RNA转录水平的变化
    5.4 讨论
    5.5 小结
第六章 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
项目及基金来源

(3)吉林省鸡安卡拉病毒流行毒株的分离鉴定及其生物学特性分析(论文提纲范文)

中文摘要
abstract
英文缩写表
前言
第一篇 文献综述
    第一章 安卡拉病毒研究进展
        1.1 病原学
        1.2 安卡拉病毒及疫苗研究进展
        1.3 安卡拉病临床症状
        1.4 安卡拉病病理特征
    第二章 安卡拉病毒的诊断方法
        2.1 血清学诊断
        2.2 分子生物学诊断方法
    第三章 实验的目的和意义
第二篇 研究内容
    第一章 吉林省鸡安卡拉病毒的分离鉴定
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
        1.3 实验结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 吉林省安卡拉病发病情况调查
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
        2.3 实验结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 安卡拉病毒的生物学特性分析
        3.1 实验材料
        3.2 实验方法
        3.3 实验结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及在学期间取得的科研成果
致谢

(4)鸡安卡拉病病原分离鉴定及病理学和血清学研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
综述
    1.1 病原学
        1.1.1 腺病毒分类
        1.1.2 腺病毒特点
    1.2 安卡拉病的发现和研究历史
    1.3 安卡拉病的流行病学
    1.4 安卡拉病的临床症状和眼观病变
        1.4.1 临床症状
        1.4.2 眼观病变
    1.5 诊断与防治
        1.5.1 诊断
        1.5.2 防治
    1.6 机体损伤后血清指标变化的研究进展
        1.6.1 总蛋白
        1.6.2 白蛋白
        1.6.3 碱性磷酸酶
        1.6.4 谷丙转氨酶
        1.6.5 尿素氮
        1.6.6 尿酸
        1.6.7 肌酐
        1.6.8 乳酸脱氢酶
        1.6.9 肌酸激酶
    1.7 实验目的和意义
实验一 鸡安卡拉病毒的分离鉴定
    1.1 仪器与材料
        1.1.1 仪器与试剂
        1.1.2 材料
    1.2 实验方法
        1.2.1 病料中DNA的提取
        1.2.2 引物的设计与合成
        1.2.3 目的片段扩增与测序
        1.2.4 鸡胚接种实验
        1.2.5 动物回归实验
        1.2.6 病理切片的制备
    1.3 结果与分析
        1.3.1 PCR扩增与测序结果
        1.3.2 SPF鸡胚实验结果
        1.3.3 动物回归实验结果
    1.4 讨论
    1.5 小结
实验二 鸡安卡拉病毒对SPF雏鸡血液生化指标的影响
    2.1 仪器与材料
        2.1.1 仪器与试剂
        2.1.2 材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 BCA法总蛋白定量测试盒
        2.2.2 白蛋白测试盒
        2.2.3 碱性磷酸酶测试盒
        2.2.4 谷丙转氨酶测试盒
        2.2.5 尿素氮测试盒
        2.2.6 尿酸检测试剂盒
        2.2.7 肌酐测定试剂盒
        2.2.8 乳酸脱氢酶测定试剂盒
        2.2.9 肌酸激酶测定试剂盒
    2.3 结果与分析
        2.3.1 总蛋白结果
        2.3.2 白蛋白结果
        2.3.3 碱性磷酸酶结果
        2.3.4 谷丙转氨酶结果
        2.3.5 尿素氮结果
        2.3.6 尿酸结果
        2.3.7 肌酐结果
        2.3.8 乳酸脱氢酶结果
        2.3.9 肌酸激酶结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
结论
参考文献
致谢

(5)禽腺病毒4型河南株Hexon全基因的克隆及遗传进化分析(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 病料样品
        1.1.2 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 引物设计
        1.2.2 组织病料中FAV-4
        1.2.3 FAV-4 Hexon全基因扩增、克隆及测序
        1.2.4 FAV-4 Hexon全基因序列分析
2 结果与分析
    2.1 FAV-4 Hexon基因片段的PCR扩增结果
    2.2 FAV-4 Hexon全基因扩增及序列测定结果
    2.3 FAV-4 Hexon全基因核苷酸序列同源性分析
    2.4 FAV-4 Hexon全基因推导的氨基酸序列分析
    2.5 FAV-4 Hexon基因的遗传演化关系
3 讨论

(6)血清4型Ⅰ群禽腺病毒对不同日龄SPF鸡的致病性研究(论文提纲范文)

符号说明
中文摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 腺病毒生物学特征
        1.1.1 分类学地位
        1.1.2 病原学
    1.2 流行病学
    1.3 传播途径
    1.4 感染机制
    1.5 临床症状及病理变化
    1.6 FAV-4 诊断方法的研究
        1.6.1 临床诊断
        1.6.2 实验室诊断
        1.6.3 鉴别诊断
    1.7 预防和治疗
        1.7.1 加强管理,严格消毒
        1.7.2 重视生物安全,控制种苗来源
        1.7.3 药物防治
        1.7.4 疫苗预防
    1.8 研究的目的及意义
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 病毒与试验动物
        2.1.2 主要试剂及化学药品
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要试剂的配制
    2.2 方法
        2.2.1 病毒的增殖
        2.2.2 EID_(50)测定
        2.2.3 试验方法
        2.2.4 病理组织学观察
        2.2.5 血清中生化指标的测定
        2.2.6 血清中细胞因子的测定
        2.2.7 抗体水平的测定
        2.2.8 组织总DNA的提取和荧光定量PCR
3 结果与分析
    3.1 临床症状
    3.2 剖检变化
    3.3 组织病理学变化
    3.4 血清中生化指标的检测结果
    3.5 血清中细胞因子的检测结果
    3.6 血清中抗体的检测
    3.7 荧光定量PCR检测结果
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢

(7)禽心包积水-包涵体肝炎综合征的研究进展(论文提纲范文)

1 分布情况
2 流行病学
3 典型症状及病理变化
4 病原学
5 病原增殖特性
6 病原的基因和蛋白特性
7 病原的免疫抑制性
8 诊断技术
9 防治技术及未来发展

(8)鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其斑点杂交方法的建立(论文提纲范文)

中文摘要
ABSTRACT
符号说明
文献综述
    1 包涵体肝炎概述
    2 核酸探针概述
    3 研究进展
论文研究一 鸡包涵体肝炎病毒目的片段重组质粒的获得
    摘要
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
论文研究二 鸡包涵体肝炎病毒DNA探针检测方法的建立与应用
    摘要
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
论文研究三 病料病毒的细胞传代与分离检测
    摘要
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
结论
参考文献
致谢

(9)鸡包涵体肝炎—心包积水综合征的研究进展(论文提纲范文)

1 流行病学
2 传播途径
3 病原学
4 病理发生
5 症状
6 病理变化
7 临床病理
8 免疫学特征
9 诊断
10 预防控制

四、从传染性心包积水病例分离出禽腺病毒(论文参考文献)

  • [1]一株血清4型禽腺病毒的分离鉴定及分析[J]. 张蕾,栾勇娇,谢芝勋,罗思思,谢丽基,黄娇玲,谢志勤,曾婷婷,张民秀,王盛,范晴,张艳芳. 动物医学进展, 2020(10)
  • [2]FAdV-4广西分离株全基因测序分析及其感染CEL和SPF鸡对细胞因子mRNA转录水平影响的研究[D]. 张蕾. 广西大学, 2020
  • [3]吉林省鸡安卡拉病毒流行毒株的分离鉴定及其生物学特性分析[D]. 高亮. 吉林大学, 2019(11)
  • [4]鸡安卡拉病病原分离鉴定及病理学和血清学研究[D]. 黄潆艺. 沈阳农业大学, 2017(01)
  • [5]禽腺病毒4型河南株Hexon全基因的克隆及遗传进化分析[J]. 张宇,乔涵,徐朋丽,杨兴武,韩昊莹,陈红英. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2017(06)
  • [6]血清4型Ⅰ群禽腺病毒对不同日龄SPF鸡的致病性研究[D]. 张媛媛. 山东农业大学, 2017(01)
  • [7]禽心包积水-包涵体肝炎综合征的研究进展[J]. 张宇,乔涵,杨兴武,徐朋丽,韩昊莹,陈红英. 黑龙江畜牧兽医, 2017(03)
  • [8]鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其斑点杂交方法的建立[D]. 朱后顺. 扬州大学, 2010(02)
  • [9]鸡包涵体肝炎—心包积水综合征的研究进展[J]. 吕敏娜,党海斌,蔡建平. 广东畜牧兽医科技, 2005(04)
  • [10]肉鸡心包积水肝炎综合征的最新研究进展[J]. 李凯年. 畜牧兽医科技信息, 2000(12)

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感染性心包积水一例禽腺病毒的分离
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