一、益智灵冲剂对老年痴呆小鼠脑内乙酰胆碱及乙酰胆碱酯酶的影响（论文文献综述）
王玉银[1]（2021）在《补肾益智抗衰方通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路促进M2型极化改善APP/PS1小鼠认知功能》文中研究表明目的:人淀粉样前体蛋白695/突变型人早老素1δE9双转基因（human amyloid precursor protein 695/mutant human presenilin 1 delta E9,APP/PS1 Tg）小鼠被认为是用于阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）研究的常用动物模型之一。本研究采用补肾益智抗衰方（Bushen Yizhi Anti-Aging Prescription,BSP）干预APP/PS1 Tg小鼠,观察BSP对APP/PS1 Tg小鼠认知功能治疗效果,并进一步探讨其对APP/PS1 Tg小鼠单核巨噬细胞和小胶质细胞的免疫调节作用。方法:本课题组将20只雄性8月龄APP/PS1 Tg小鼠随机分为AD模型组与BSP治疗组,同性别8月龄C57BL/6小鼠作为野生对照组,每组10只。各组小鼠在清洁级动物房适应性饲养7天后开始给药,给药方式为口服给药,时间为8周。AD模型组每日给予含山楂和山药的鼠粮,BSP治疗组每日给予等量含BSP的鼠粮,野生组每日给予等量普通鼠粮,给药结束后进行水迷宫和Y迷宫的行为学检测小鼠认知功能。之后处死小鼠,取小鼠脾脏用于制备单核巨噬细胞悬液,分离脑组织提取蛋白和制作冰冻切片。应用Western blot法和免疫荧光化学双染法检测脑内小胶质细胞激活标记物Iba-1以及其分泌的促炎性/抗炎性细胞因子的表达,流式细胞术检测脾脏M1/M2型巨噬细胞的变化。上述各组实验数据均采用Graph Pad Prism 5.0统计软件进行统计分析。结果:1.在水迷宫训练期间,结果显示,与AD模型组相比,随着训练天数的增加,BSP治疗组小鼠从入水点到平台的时间和总距离明显减少（分别为P<0.01,P<0.05）;在水迷宫正式测试期间,结果表明,与AD模型组相比,BSP治疗组从入水点到平台的总时间减少（P<0.05）,总距离缩短（P<0.05）,第一次进入平台所在区域的时间减少（P<0.05）。Y迷宫结果显示,与AD模型组相比,BSP治疗组小鼠自发进入新异臂的次数明显增多（P<0.05）。2.免疫荧光双染法与Western blot法检测各组小鼠脑内Iba-1的表达。结果显示,AD模型组小鼠脑内Iba-1+表达明显上调（均为P<0.01）,小胶质细胞激活数量增多;经BSP治疗后,Iba-1+表达明显减少（均为P<0.05）,脑内小胶质细胞激活受到抑制。3.免疫荧光双染法结果显示,AD模型组小鼠脑内DG区Iba-1+i NOS+和Iba-1+IL-6+的共表达增多（分别为P<0.05,P<0.01）;经BSP治疗后,APP/PS1 Tg小鼠脑内DG区Iba-1+i NOS+和Iba-1+IL-6+的共表达减少（分别为P<0.001,P<0.05）。Western blot结果显示,AD模型组小鼠脑内i NOS和IL-6的表达明显上升（分别为P<0.001,P<0.05）,给予BSP治疗后,i NOS和IL-6的表达减少（分别为P<0.001,P<0.01）。4.免疫荧光双染法结果显示,AD模型组小鼠脑内DG区Iba-1+Arginase-1+和Iba-1+IL-10+的共表达下降（分别为P<0.01,P<0.001）,经BSP治疗后,小鼠脑内DG区Iba-1+Arginase-1+和Iba-1+IL-10+的共表达升高（分别为P<0.05,P<0.01）,Western blot结果显示,BSP治疗组Arginase-1和IL-10的表达升高（分别为P<0.01,P<0.05）。5.流式细胞术检测脾脏巨噬细胞不同表型的表达。结果显示,与野生组相比,AD模型组CD16/32和IL-12的表达显着升高（均为P<0.01）,CD206和IL-10的表达明显下降（分别为P<0.01,P<0.05）,经BSP治疗后,CD16/32和IL-12的表达降低（均为P<0.001）,CD206和IL-10的表达升高（分别为P<0.01,P<0.05）。6.与AD模型组相比,BSP治疗组小鼠脑内TLR4、NF-κB和My D88的蛋白表达显着降低（分别为P<0.01,P<0.01,P<0.001）。BSP能抑制TLR4/My D88/NF-κB炎症信号通路的表达。结论:研究发现BSP可明显改善APP/PS1 Tg小鼠的认知功能。BSP还可以抑制APP/PS1 Tg小鼠中枢小胶质细胞的激活,减少促炎细胞因子的分泌增加抗炎细胞因子的分泌。并促进M1型小胶质细胞/巨噬细胞极化向M2型极化,改善免疫微环境,减轻脑损伤。
王双[2]（2021）在《保健食品益智咀嚼片的开发与研究》文中研究说明目的益智咀嚼片是在六味地黄丸的基础上经化裁重组而得的一种具有填精益髓、养血补虚、安神益智功效的保健食品,为进一步开发益智咀嚼片提供试验依据,本研究对益智咀嚼片的处方配伍、制备工艺、功能学评价、安全性评价及质量标准进行了系统研究。方法通过文献考证,对该方中各药物起决定性作用的成分及其相关药物的作用机制进行了分析,检验组方思路的合理性;同时采用功能学实验对处方不同剂量进行优选,采用正交实验进行工艺优选;采用东莨菪碱模型小鼠通过跳台实验、避暗实验和Morris水迷宫实验验证处方改善记忆的功能。此外,利用网络药理学研究技术及分子对接技术,预测并筛选益智咀嚼片改善记忆障碍的潜在作用靶点,为其潜在作用机制提供理论依据,并在此基础上运用分子对接技术以验证靶点预测的可靠性来进一步阐释益智咀嚼片处方配伍特点。提取工艺中对处方中的原料药经过前处理后,采用了正交设计试验,考察指标为总皂苷的含量,对浸泡时间、煎煮时间、加水量、煎煮次数为四个因素,通过设计正交试验进行考察,确定水提取的工艺参数,从而选择最佳的水提工艺,并加以验证。成型工艺中以水提取物为主要原料,在选择适当的辅料时,通过单因素试验法,将在使用量上对填充剂、黏合剂及矫味剂进行优化筛选,从而确定最优方案,应用湿法制粒压片工艺,研制出制备方法简单、酸甜可口、携带食用方便的益智咀嚼片。根据最优工艺进行工艺验证。益智咀嚼片3个剂量低剂量组（2 g/kg）、中剂量组（4 g/kg）、高剂量组（8 g/kg）,连续对ICR小鼠灌胃给予30 d后,在末次给予受试物后,对空白组以外的其他各组小鼠,采用腹腔注射的方法,每只注射东莨菪碱5 mg/kg,从而制备记忆障碍模型。造模后,通过跳台实验、避暗实验、Morris水迷宫实验等学习记忆相关指标,进一步评价各组小鼠学习记忆能力的变化,对小鼠脑组织中的乙酰胆碱（Ach）、乙酰胆碱酯酶（Ach E）及乙酰胆碱转移酶（Ch AT）含量的变化进行检测,以此来评价益智咀嚼片改善小鼠记忆的功能作用。对益智咀嚼片进行安全性评价研究。首先,在给予小鼠、SD大鼠受试物时,以最大剂量（46g生药/kg）、最大灌胃量（20 m L/kg BW）进行灌胃,不间断地观察14天,同时记录动物中毒反应情况;然后设定益智咀嚼片的3个剂量分别为2g生药/kg、4g生药/kg、8g生药/kg连续对SD大鼠灌胃30天,期间动态观察动物一般情况、体重、摄食量,试验结束后对其进行剖检、血液学、血液生化、脏器指数和组织病理检查。在质量控制研究中,以感官评价对其进行视觉、嗅觉、味觉等评判;本研究采用紫外分光光度法,建立了益智咀嚼片中的总皂苷的含量测定的方法;采用高效液相色谱法建立益智咀嚼片远志皂苷的含量测定方法;采用高效液相色谱法对远志中的细叶远志指标成分进行含量测定,建立制定了益智咀嚼片产品质量标准草案。结果益智咀嚼片具有填精益髓、养血补虚、安神益智的功效。网络药理学研究显示益智咀嚼片中的活性成分主要活动范围在经活性配体-受体相互作用通路、血管内皮生长因子信号通路、胆碱能突触信号通路等上,益智咀嚼片可能是通过豆甾醇、β-谷甾醇、薯蓣皂甙元、海风藤烯酮等活性成分细胞通过增殖凋亡调控、炎症反应、线粒体组成等过程AKT1、VEGFA、PTGS2、Ach、Ach E、Ch AT靶点作用于通路发挥改善记忆作用。益智咀嚼片最佳制备的处方工艺是:将原料药材浸泡在水中1h,加至其10倍体积的水,煎煮2次,每次煎煮60min,滤过,浓缩成浸膏并采用减压干燥的方法得到浸膏粉末,将浸膏粉末过100筛后,加入处方量的17%乳糖、6%微晶纤维素和17%木糖醇混合均匀,并使用95%乙醇作为润湿剂,湿法制粒过20目筛,将所得的颗粒在50℃真空干燥至水分在5-8%左右过14目筛,最后将制得的颗粒加入处方量的6%二氧化硅和2%硬脂酸镁混合进行压片,即得片重控制在910±3%mg、片子硬度5-7Kg.N,且片重差异检查合格,素片用薄膜包衣预混剂（白色和绿色）进行包衣,得到鲜绿色,十分美观。功能学评价结果显示益智咀嚼片能显着延长东莨菪碱小鼠跳台潜伏期,明显减少3 min内错误次数,显着延长模型小鼠的避暗潜伏期,明显减少5 min内的错误次数,能够缩短小鼠定位航行中逃逸潜伏期,显着增加以及平台进入次数,提示益智咀嚼片能够明显地改善东莨菪碱所引起的学习记忆障碍。益智咀嚼片4g生药/kg、8g生药/kg剂量组能显着降低东莨菪碱小鼠脑组织中Ach含量,且8g生药/kg组能显着提高东莨菪碱小鼠脑组织中Ach E及Ch AT的含量,益智咀嚼片可明显改善东莨菪碱小鼠模型的学习记忆能力,其可能通过调节胆碱能通路,增加Ach、Ch AT和降低Ach E的含量来改善东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍。在安全性评价方面,益智咀嚼片未见明显的毒副性,新增、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏等多个重要器官未见明显损伤,安全最大剂量为46g生药/kg,等同于临床人用剂量的150倍,可见益智咀嚼片安全性之高,具有推广性。在质量标准方面,本文运用紫外分光光度法对益智咀嚼片中指标成分总皂苷地含量进行测定,采用HPLC法建立了益智咀嚼片中细叶远志皂苷的含量测定方法,参照国家标准（GB16740-2014）,制定了益智咀嚼片质量标准草案。结论本文研制的益智咀嚼片是一款以改善记忆障碍为主要功效的保健品。通过大量数据挖掘、网络药理学及功能学评价等手段,全面阐述了益智咀嚼片处方配伍的合理性,确定了工艺参数,并对益智咀嚼片在改善记忆障碍的功能和安全性方面进行了评价,制定了质量标准,大体完成了益智咀嚼片的研制,值得进一步推广应用。
马慧慧[3]（2021）在《基于肾脑相关理论的温针灸治疗轻中度阿尔茨海默病临床研究》文中认为目的:本研究通过与改善阿尔茨海默病的基础药物“盐酸多奈哌齐片”的对照,观察基于肾脑相关理论,以督脉腧穴为主进行温针灸治疗轻、中度阿尔茨海默病患者的临床疗效。方法:在山西省针灸医院门诊及周边社区招募患者,根据纳入标准和排除标准,选取AD患者60例,按随机数字表,将其分为2组,对照组和治疗组各30例。对照组予以口服盐酸多奈哌齐片（5mg/d,每晚睡前,共3个疗程）;治疗组予以温针灸疗法（取穴:百会、大椎、命门、肾俞、悬钟、太溪）,根据不同的证型适当进行配穴（隔日1次,4周/疗程,共3个疗程）。所有入组患者在治疗前、后各进行观测和记录一次MMSE量表、ADAS-cog量表以及ADL量表评分情况,并观察治疗前后AD患者血清Hcy水平值的变化情况。本研究均采取SPSS25.0进行数据的统计分析。结果:（1）两组均可提升轻、中度AD患者的MMSE量表总分（P<0.05）,同时也可降低ADAS-cog量表、ADL量表总分（P<0.05）,说明在治疗轻中度AD患者方面,盐酸多奈哌齐、温针灸治疗两种治疗手段均具有临床疗效;（2）在疗效判定量表方面,两组治疗后治疗组临床疗效明显优于对照组（P<0.05）,说明通过温针灸疗法治疗轻、中度AD可提高患者认知功能和日常生活能力,且疗效优于盐酸多奈哌齐治疗;（3）在血清Hcy水平值变化方面,两组均可降低Hcy水平（P<0.05）,治疗后温针灸疗法在降低AD患者Hcy水平略低于盐酸多奈哌齐治疗,说明温针灸疗法在改善AD患者痴呆症状方面略优于盐酸多奈哌齐治疗;（4）两组患者治疗后有效率比较,治疗组显效有8例,有效有17例,总有效率为83.33%。对照组显效有4例,有效有14例,总有效率为60.00%。治疗组患者MMSE量表总有效率显着高于对照组,且差异有统计学意义（P<0.05）,说明温针灸疗法更能明显改善AD患者认知功能以及生活能力,且临床效果优于盐酸多奈哌齐治疗。结论:（1）在治疗轻、中度AD患者上,口服盐酸多奈哌齐、温针灸疗法两种治疗手段均具有临床疗效,且温针灸疗法优于盐酸多奈哌齐治疗;（2）基于肾脑相关理论,以督脉穴为主,温针灸疗法可明显改善轻、中度AD患者MMSE量表、ADAS-cog量表、ADL量表评分情况,可降低AD患者血清Hcy水平,能显着提高患者的认知能力,改善患者的生活质量,延缓疾病进程的发展,对降低AD患者的疾病负担具有重要的实际意义。
朱晓婷[4]（2021）在《解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究》文中进行了进一步梳理选题依据:阿尔茨海默病（AD）致残、致死率高,发病机制复杂,大脑内Aβ异常沉积是AD发生发展的重要病理变化及核心环节,前期研究已证实了解毒益智方具有抑制AD线虫头部Aβ斑块沉积及相关基因表达的作用,随之开展的随机对照临床研究证实解毒益智方应用6个月后MMSE、MoCA、ADL评分变化明显优于口服尼莫地平片的对照组。黄连为解毒益智方中的君药,为该方的主要成分,在本方中发挥“解毒”的重要功效。经查阅国内外文献发现黄连中发挥“解毒”作用的主要物质为黄连多糖（CCP）,因此设计体外细胞实验探究解毒益智方中的君药黄连的主要有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用,为“毒损”的病机及“解毒”的治法提供理论依据,为后续研究提供研究基础。因前期开展的研究均是以单基因单细胞的生物为研究对象,不能很好地模拟AD的疾病特点,因此选用APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,该小鼠很好的模拟了中枢神经系统Aβ异常沉积的状态,通过对小鼠的行为学研究及分子生物学研究,进一步评价解毒益智方的治疗作用。目的:通过体外细胞实验探讨基于“补肾益髓、活血化痰解毒”法形成的解毒益智方其中君药的有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用。通过行为学、分子生物学等研究手段,对APP/PS1小鼠的认知功能、Aβ沉积、BACE1表达的相关蛋白、基因等方面进行检测和分析,探讨解毒益智方对APP/PS1小鼠的作用机制,为中药治疗AD的推广应用提供可靠的研究证据。方法:1.本研究分别从体外实验、动物实验探究解毒益智方的作用机制。体外实验部分采用MTT还原法、Hoechst33258荧光染色等方法对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型进行线粒体活性、细胞活力、细胞凋亡的测定,探究CCP对PC12细胞的保护作用。动物实验部分选用APP/PS1双转基因小鼠为研究对象,随机分为5组,分别是模型组（APP/PS1组）、盐酸多奈哌齐组（Donepezil组）、解毒益智方低剂量组（JDYZFL组）、解毒益智方中剂量组（JDYZFM组）、解毒益智方高剂量组（JDYZFH组）,每组16只小鼠,另选用16只C57小鼠作为正常对照组（Control组）,于每日早晨8:30进行灌胃治疗,各组每日灌胃药物及剂量分别是,正常组和模型组0.5%CMC溶液0.20g·kg-1·d-1;阳性对照组:盐酸多奈哌齐溶液0.30g·kg-1·d-1;解毒益智方高、中、低剂量组药物浓度依次为0.60g·kg-1·d-1,0.3g·kg-1·d-1,0.15g·kg-1·d-1。持续6个月治疗结束。2.以Aβ25-35损伤的PC12细胞为研究对象,通过测定细胞活力、LDH释放率、细胞凋亡率、和线粒体膜电位的水平等评价CCP的神经保护作用。3.通过水迷宫实验,记录解毒益智方对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响。4.通过ELISE及免疫荧光法检测APP/PS1小鼠脑内Aβ水平的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积的影响。5.采用PCR方法检测脑组织SIRT1、NF-κB、BACE1基因量变化,并进一步采用Western blot方法检测大脑皮层内SIRT1、BACE1、NF-κB蛋白的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1转运蛋白通路SIRT1、BACE1、NF-κB的影响。结果:1.通过体外研究观察CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响PC12细胞活力测定结果显示:PC12细胞经过浓度为5-50μM的Aβ25–35处理24h后,细胞活力随着Aβ25–35浓度的增加从24%下降至61%。当Aβ25–35在浓度范围为5至50μM时引起PC12细胞中LDH释放增加至对照组的约130-160%。在用不同浓度的CCP（5至200μg/ml）处理PC12细胞24h后,未观察到显着的细胞损失。通过Hoechst33258染色及FCM测定细胞凋亡结果显示:细胞核在荧光显微镜下具有显着的浓缩核和凋亡的细胞形成。与在未处理的PC12细胞中观察到的完整,圆形和相对大的细胞核相比,暴露于50μMAβ25–35 24h的细胞显示出典型的细胞凋亡特征,包括染色质浓缩,核碎裂和凋亡小体的出现。用CCP不同浓度（5,25,50,100,200μg/ml）处理后可有效逆转细胞凋亡,其中100μg/ml效果最明显,FCM分析显示单独暴露于50μMAβ25–35 24h导致58.88±6.12%的凋亡率,这与正常对照组中的7.21±0.82%的值显着不同（P<0.01）。加入100μg/ml的CCP后,细胞凋亡下降至12.51±1.32%。通过JC-1红色荧光与JC-1绿色荧光的比率的变化来检测Aβ诱导的线粒体功能障碍结果显示:当PC12细胞暴露于50μM的Aβ25–35中24h后,与正常对照组相比,显着减弱了JC-1的红色荧光比例,提高了JC-1绿色荧光比例（P<0.01）。用CCP（100μg/ml）预处理Aβ25–35处理的PC12细胞显着抵消了Aβ25–35损伤引起的膜电位损失,JC-1从Aβ25–35处理的PC12细胞中的22.1%变为绿色荧光至84.3%,与正常对照组相近（P>0.05）。通过蛋白质印迹法检测细胞色素C结果显示:经50μMAβ25–35处理PC12细胞24h后细胞色素C在细胞质中的蛋白质表达增加,而预先用CCP（100μg/ml）处理的PC12细胞显着减弱线粒体释放的胞质细胞色素C。2.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响。水迷宫实验结果显示:随着实验天数的后移,各组小鼠潜伏期、路径长度、游泳距离均有所缩短,表明随着训练次数的增加各组小鼠对象限平台的定位记忆能力随之有所提升。与Control组相比,APP/PS1组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离均明显延长,差异显着（P<0.01）。首次到达平台的时间明显延长,目标停留次数明显减少,差异显着（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离有所缩短,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。首次到达平台的时间缩短,目标停留次数增多,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组相比,JDYZFL组作用与其相当,JDYZFM组略优于Donepezil组,差异有统计学意义（P<0.05）。干预治疗6个月的12月龄小鼠的定位航行实验及空间搜索实验结果优于干预治疗3个月的9月龄小鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。3.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ沉积的影响。各组小鼠结果如下:与Control组比较,APP/PS1组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积极数量明显增多,具有极显着统计学意义（P<0.01）。与APP/PS1组相比,JDYZFL组、JDYZFM组及Donepezil组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量不同程度降低,具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组比较,JDYZFM组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。通过免疫荧光法测得小鼠大脑皮层内Aβ表达发现,Control组只产生微量Aβ,而APP/PS1组Aβ表达量明显增高,经过用药干预后,12月龄干预组小鼠可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量较9月龄小鼠明显减少,免疫荧光标记从宏观上可以发现干预组Aβ沉积明显减少,APP/PS1组Aβ沉积明显增多。4.调控BACE1表达的相关因子结果（1）PCR检测结果各组小鼠进行的PCR检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量明显增高,SIRT1/GAPDH明显降低,差异有显着统计学意义(（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组及JDYZFM组小鼠海马体内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,SIRT1/GAPDH表达含量不同程度增高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。JDYZFH组在NF-κB/GAPDH表达上无统计学差异。与Donepezil组相比,JDYZFL组及JDYZFM组BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。PCR结果证实药物干预组可通过提高SIRT1mRNA的含量降低NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达,从而抑制Aβ的产生而起到神经保护的作用。各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1mRNA的表达均有所提高,NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）Westorn blot检测结果各组小鼠的Western blot检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层SIRT1的蛋白表达明显降低,NF-κB、BACE1蛋白表达显着升高（P<0.01）。与APP/PS1相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组BACE1、NF-κB表达降低,SIRT1蛋白表达增高差异有统计学意义（P<0.05）。与Donepezil比较,JDYZFL组、JDYZFM组NF-κB蛋白表达有所降低,差异有统计学意义（P<0.05）。JDYZFL组SIRT1、BACE1蛋白表达无显着差异,JDYZFM组SIRT1表达有所提高,BACE1蛋白表达量略有降低,差异有统计学意义（P<0.05）。经过为期3个月及6个月的干预后,各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1的蛋白表达均有所提高,NF-κB、BACE1蛋白的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 CCP能够保护Aβ25-35损伤的PC12细胞,其机制可能与提高细胞活力、抑制细胞凋亡、减少LDH释放、阻断膜电位的丧失,并阻止线粒体细胞色素C释放,修复线粒体功能障碍有关。2 JDYZF各剂量组可不同程度提高APP/PS1双转基因小鼠定位航行实验及空间搜索实验的成绩,说明JDYZF可改善小鼠空间学习及记忆能力。3 JDYZF可不同程度降低APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层内Aβ的异常沉积。4 JDYZF抑制BACE1的异常表达,其作用机制可能是通过调控大脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1信号通路的相关因子表达实现的。
宁富楠[5]（2021）在《制何首乌与石菖蒲合用改善小鼠学习记忆能力的物质基础及机制研究》文中研究表明背景:制何首乌（Polygoni Multiflori Radix Praeparata,PMPR）和石菖蒲（Acori Tatarinowii Rhizoma,ATR）是临床上用于预防和治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）方剂中的高频用药。根据中医理论,PMPR具有补肾的作用,ATR具有化痰的作用。PMPR和石菖蒲ATR的联合使用,体现了中医“补肾化痰法”的治疗原则。然而,对制何首乌-石菖蒲（PA）药对的有效成分和作用机制还有待进一步研究。目的:本研究旨在探讨PA对东莨菪碱诱导的小鼠认知功能障碍的保护作用,探讨PA的潜在作用机制以及PA中的活性成分。方法:采用HPLC-MS和GC-MS对灌胃给药PA后不同时间点的大鼠血浆和PA水提物中的主要成分进行检测。此外,在氢溴酸东莨菪碱（ip,4 mg·kg-1·d-1）处理前,小鼠灌胃给药PA（1.56和6.24 g·kg-1·d-1）,PMPR单味药（0.78和3.12 g·kg-1·d-1）和ATR单味药（0.78和3.12 g·kg-1·d-1）。d-1)30天。通过Morris水迷宫测试小鼠的学习和记忆能力。通过HPLC-MS分析神经递质（Ach,5-HT,NE,Epi,Glu和GABA）,通过蛋白质印迹和免疫组化检测突触相关蛋白（BDNF,Trk B,ERK,p-ERK,CREB,p-CREB以及P90RSK,PSD95）的表达。结果:HPLC-MS和GC-MS分别分析定量了PA和血浆中的8种成分。灌胃给药PA后的大鼠血浆中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（2,3,5,4’-Tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside）,大黄素（Emodin）,α-细辛醚（α-Asarone）和细辛醛（Asarylaldehydewere）相比于单独口服PMPR和ATR浓度增加,同时检测发现,分别灌胃给药PA,PMPR和ATR,大鼠血浆中没食子酸（Gallic acid）,大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（Emodin-8-O-β-D-glucopyranoside）,β-细辛醚（β-Asarone）和异甲基丁香酚（cis-methyl isoeugenol）的浓度相似。在东莨菪碱处理的小鼠中,发现PA通过提高神经递质（Ach,5-HT,NE,Epi,Glu和GABA）的浓度,激活BDNF/ERK/CREB信号通路（BDNF,Trk B,ERK,p-ERK,CREB和p-CREB）,以及增加P90RSK和PSD95蛋白的表达,保护突触活动。结论:PMRP和ATR的联合使用在认知功能障碍疾病的治疗中具有协同作用,充分体现了中医“补肾化痰法”治疗法则的应用。可以开发用于治疗包括AD在内的与衰老相关的疾病。
钱红月,肖移生,侯吉华,姜劼琳,欧阳厚淦[6]（2021）在《黄精配伍抗老年痴呆研究进展》文中研究说明老年痴呆包括阿尔茨海默病（AD）、血管性痴呆（VaD）、混合型痴呆等,此类疾病已严重危害广大中老年人健康。中医认为此类痴呆疾病的共同病因病机是肾虚髓亏、血瘀络滞,防治上采用补肾活血化瘀的基本治法。以黄精配伍的复方如二精丸、黄精地龙配伍、黄精丸等均具有较好的抗老年痴呆作用。对各黄精配伍抗老年痴呆的研究成果进行总结,并从中医理论和现代药理研究成果对其作用机理进行分析探讨,各黄精配伍复方均以"补肾、活血、化瘀"为核心,发挥中药复方功效,且其药理药效均显示出多靶点作用机制,可为临床挖掘、研发抗老年痴呆疗效确切的复方提供参考。
陈思馨[7]（2020）在《健脾益智法调节AD大鼠脑内尿素代谢的作用机制研究》文中研究说明理论研究部分,目的:旨在从“浊邪”在脑中异常堆积导致阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）的角度探讨该病的发病机制及防治方法,通过用中医理论逐条分析AD的症状,分析脑的生理病理特点,阐明AD病位在脑,与脾胃关系密切,探讨脾胃与AD的关系,最终得出健脾益智法可以通过脾胃的功能改善浊邪在脑中的异常堆积状况,达到治疗AD的理论依据。方法:回顾和总结了中医学对于AD相关症状的记载与认识,将中医理论的认知过程与AD认知衰退量表相结合,利用解剖学和中医传统理论结合,梳理脑与五脏的关联及脑的生理病理特点,归纳和分析脾胃与AD的内在联系,结合健脾益智汤组方分析及导师团队前期研究,为健脾益智法从祛浊角度治疗AD提供了理论依据。结果:在中医理论系统中,AD病名虽未被直接提出,但AD的症状都有相关描述,AD的认知衰退量表GDS与《内经》中描述的认知过程密切相关,病位在脑的原因与脑的生理病理特性相关,其发病与五脏皆有联系,但脾胃功能失常是其根本的病因。无论是从脾胃是后天之本,负责保障其他脏腑的正常生理功能运行,或是脾胃自身的主运化,主升清降浊的功能,亦或者现代的实验或临床研究,都可为从脾胃论治AD提供详实的依据。健脾益智汤从认知衰退过程,脑的病理特性论治AD,以健脾益气,升清降浊为基本治法,在基础和临床研究中均表现出较好的疗效,健脾益智汤中所含药物也对AD有着有益的成分,可以发挥联合靶向作用,提高疗效。实验研究部分,目的:通过构建AD大鼠模型,采用行为学、脲酶法、聚合酶链式反应、酶联免疫吸附剂测定法、蛋白检测法,旨在观察和分析健脾益智汤对模型大鼠学习记忆能力、脑内尿素含量、相关尿素转运蛋白及基因、尿素循环相关酶指标的影响,探讨和分析健脾益智汤对改善模型大鼠学习记忆能力的影响,及可能机制。方法:采用SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、健脾益智汤组、吡拉西坦组。采用海马区注射A β1-40的方法制备AD实验动物模型。各组术后第2周起开始灌胃,分别持续7天,14天,28天,14.4ml/kg/d,每日1次,西药组给与吡拉西坦,加生理盐水制成混悬液,14.4ml/kg/d,每日一次,其余各组给予同等剂量的生理盐水。采用Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力,观察和探健脾益智法对模型大鼠学习记忆的影响。采用脲酶法观察和分析各组大鼠脑内尿素含量,实时荧光定量PCR法检测SLC14A1基因mRNA表达情况,Western blot法检测UTB蛋白含量,ELISA法检测尿素循环相关酶ARG、OTC、CPS、ASS、ASL含量,从尿素代谢角度探讨健脾益智汤改善模型大鼠学习记忆障碍的可能机制。结果:1.Morris水迷宫:在治疗7天、14天、28天组中,模型组定位航行逃避潜伏期明显延长,空间探索实验穿台次数明显减少,目标象限探索时间明显减低,与对照组比较,有显着性差异（P<0.01）;与模型组相比,健脾益智汤组与吡拉西坦组逃避潜伏期及穿台次数明显增多（P<0.01或P<0.05）,且健脾益智汤组的改善效果随着治疗天数的增加而有所增强。2脲酶法检测:在治疗7天、14天、28天组中,模型组脑内尿素含量明显增加,与对照组比较,有显着性差异（P<0.01）;与模型组相比,健脾益智汤组与吡拉西坦组可有效降低大鼠脑内尿素含量（P<0.01或P<0.05）,且健脾益智汤组的改善效果随着治疗天数的增加而有所增强。3.实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测:在治疗7天、14天、28天组中,与对照组比较,模型组脑内SLC14A1基因mRNA相对表达水平与UTB蛋白含量均有明显降低（P<0.01）。在治疗7天组中,与模型组相比,健脾益智汤组与吡拉西坦组对SLC14Al和UTB均无统计学意义上的差异（P>0.05）。在14天组和28天组中,健脾益智汤组与吡拉西坦组相比于模型组,均能一定程度的升高SLC14A1mRNA相对表达水平和UTB蛋白含量（P<0.05或P<0.01）。通过对7天,14天和28天不同时间节点的各组大鼠脑内SLC14AlmRNA比较,可发现各组均无显着升高或降低,差异无统计学意义（P>0.05）,而对比UTB含量,治疗28天的健脾益智汤组和吡拉西坦组均比治疗7天时升高更多（P<0.05）。4.酶联免疫吸附检测:在治疗7天、14天、28天组中,与对照组比较,模型组脑内ARG、ASS含量均有明显升高（P<0.01或P<0.05）,ASL含量有所下降,但无统计学意义。与模型组相比,在治疗7天时,健脾益智汤组与吡拉西坦组ARG、ASS含量有所下降,ASL含量有所升高,但无统计学意义（P>0.05）;在治疗14天和28天时,健脾益智汤组与吡拉西坦组ARG、ASS含量明显下降（P<0.01或P<0.05）,ASL含量有所上升,但无统计学意义（P>0.05）。通过对7天,14天和28天不同时间节点的各组大鼠脑内ARG、ASS、ASL含量比较,可发现对照组,假手术组,模型组均无显着升高或降低（P>0.05）,健脾益智汤组和吡拉西坦组均有随着治疗时间增加而降低效果更佳,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.AD各症状在中医理论中均有描述,评价AD认知功能的认识衰退量表GDS与《内经》中认知过程各阶段相吻合,AD的病位在脑,脑因其独特的生理病理特点,与五脏的功能密切相关,而五脏的正常运行又赖于后天之本脾胃,故在防治AD时,应重视脾胃的调节。2.浊邪阻滞是AD发病的重要病机,脑内过量尿素的堆积是浊邪的一种,脾胃主升清降浊,从脾胃论治AD有据可依,健脾益智汤可通过组方药物的协同作用,调节脾胃功能,使清浊升降相因,对AD发挥整体治疗效果。3.大鼠颅内海马区注射Aβ 1-40造模方式成功构建了 AD模型,健脾益智汤可有效改善AD大鼠学习记忆能力;4.模型大鼠出现脑内尿素含量升高,健脾益智汤可能通过上调SLC14A1基因和UTB蛋白表达,提高尿素转运能力,或是通过下调ARG、ASS酶活性,使尿素生成减少或降低炎症细胞因子的表达水平而达到改善学习记忆障碍的作用。5.健脾益智汤对AD模型大鼠的行为学及脑内尿素水平改善与用药时间正相关,故通过健脾胃而益智需要一定的服药周期。
宋玲玲[8]（2020）在《基于“毒损脑络”研究大黄素、大黄酚对铝致AD小鼠认知障碍的保护作用》文中研究表明目的:随着世界人口老龄化趋势日益增长,阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）的发病率呈逐年攀升趋势,并日益发展成为全球性的重大公共健康问题。目前,AD的病因病机尚未完全明确、且缺少有效的治疗药物。因此,研发AD有效药物,明确其治疗AD的物质基础和作用机理显得尤为迫切。传统中医认为,AD属“老年呆病”、“络病”范畴,“毒损脑络”学说是其病机关键。西医关于AD的病因病机存在多种学说。通过文献调研,本课题发现大脑中异常代谢的铝离子（A13+）与AD的多种发病机制均存在直接或间接关联。由于大黄素和大黄酚具有抗衰老、抗氧化等功效,能通过血脑屏障,且能与Al3+螯合配位,因此,本课题提出:A13+是导致AD“毒损脑络”中“内生毒邪”产生的关键因素,大黄素、大黄酚可作为配体中药,通过螯合配位过量的A13+来改善Al3+致AD小鼠的记忆和行为,从而治疗AD。方法:1.应用量子化学计算方法,计算大黄素、大黄酚与Al3+的配位作用,并预测形成配位物时的配位化学参数,指导后续实验研究。2.灌胃AlC13（200mg/kg）造模AD小鼠,然后分别腹腔注射低、中、高剂量（0.1 mg/kg、1 mg/kg、10 mg/kg）大黄素:（1）每天观察并记录小鼠的生长发育状况;（2）应用Morris水迷宫方法检测给药前后小鼠的记忆与行为学变化;（3）应用试剂盒测定给药前后小鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶（AChE）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）生物指标的变化;（4）应用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）测定给药前后小鼠脑及血清中铝元素（Al）的含量变化。3.灌胃AlCl3（200mg/kg）造模AD小鼠,然后分别腹腔注射低、中、高剂量（0.1 mg/kg、1 mg/kg、10 mg/kg）大黄酚:（1）每天观察并记录小鼠的生长发育状况;（2）应用Morris水迷宫方法检测给药前后小鼠的记忆与行为学变化;（3）应用试剂盒测定给药前后小鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶（AChE）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）生物指标的变化;（4）应用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）测定给药前后小鼠脑及血清中铝元素（Al）的含量变化。结果:1.量子化学计算结果表明,大黄素、大黄酚均能与A13+形成1:1、2:1及3:1配位的配合物。其中,3:1配位的配合物可能具有较高的稳定性。2.（1）造模期间,与空白组相比,铝染毒组小鼠的生长发育情况较差,出现行动迟缓、被毛杂乱无光泽等萎靡状态,且从第三周开始,铝染毒组小鼠的体重变化值呈显着下降趋势（P<0.05）。而第五周给药大黄素后,铝染毒小鼠的行动变敏捷且被毛光泽度逐渐恢复。（2）Morris水迷宫结果显示,与空白组相比,铝染毒组小鼠的逃避潜伏期显着延长（P<0.05）,穿越平台次数则显着降低（P<0.05）。与铝染毒组相比,给药不同剂量大黄素后小鼠逃避潜伏期均有所降低,而穿越平台次数均有所增加。（3）试剂盒检测结果显示,与空白组相比,铝染毒组小鼠脑组织中SOD的活力显着降低（P<0.001）,AChE的活力（P<0.05）和MDA的含量（P<0.01）则显着升高。与铝染毒组相比,高剂量大黄素组（10 mg/kg）可升高小鼠脑组织中SOD的活力（P<0.01）,降低AChE的活力（P<0.001）和MDA的含量（P<0.001）;中剂量大黄素组（1 mg/kg）可升高小鼠脑组织中SOD的活力（P<0.05）,降低AChE的活力（P<0.05）和MDA的含量（P<0.001）;低剂量大黄素组（0.1 mg/kg）可升高小鼠脑组织中SOD的活力,降低AChE的活力和MDA的含量（P<0.001）。（4）ICP-MS检测结果显示:与空白组相比,铝染毒组小鼠脑铝及血清铝含量均显着增加（P<0.001）。与铝染毒组相比,各剂量大黄素给药组小鼠脑铝含量和血清铝含量均有所降低。其中,高剂量及中剂量大黄素可显着降低小鼠脑铝含量（P<0.001）;高剂量大黄素可显着降低小鼠血清铝含量（P<0.01）。3.（1）造模期间,与空白组相比,铝染毒组小鼠的生长发育情况较差,出现行动迟缓、被毛杂乱无光泽等萎靡状态,且从第三周开始,铝染毒组小鼠的体重变化值呈显着下降趋势（P<0.01）。而第五周给药大黄酚后,铝染毒小鼠的行动变敏捷且被毛光泽度逐渐恢复。（2）Morris水迷宫结果显示,与空白组相比,铝染毒组小鼠的逃避潜伏期显着延长（P<0.05）,穿越平台次数则显着降低（P<0.01）。与铝染毒组相比,给药不同剂量大黄酚后小鼠逃避潜伏期均有所降低,而穿越平台次数均有所增加。（3）试剂盒检测结果显示,与空白组相比,铝染毒组小鼠脑组织中SOD的活力显着降低（P<0.01）,AChE的活力（P<0.01）和MDA的含量（P<0.01）则显着升高。与铝染毒相比,高剂量大黄酚组（10mg/kg）可升高小鼠脑组织中SOD的活力（P<0.001）,降低AChE的活力和MDA的含量（P<0.001）;中剂量大黄酚组（1 mg/kg）可升高小鼠脑组织中SOD的活力（P<0.05）,降低AChE的活力和MDA的含量（P<0.001）;低剂量大黄酚组（0.1 mg/kg）可升高小鼠脑组织中SOD的活力,降低AChE的活力和MDA的含量（P<0.001）。（4）ICP-MS检测结果显示:与空白组相比,铝染毒组小鼠脑铝及血清铝含量均显着增加（P<0.001）。与铝染毒组相比,各剂量大黄酚给药组小鼠脑铝和血清铝含量均有所降低。其中,高剂量及中剂量大黄酚可显着降低小鼠脑铝含量（P<0.001）;高剂量大黄酚可显着降低小鼠血清铝含量（P<0.05）。结论:1.大黄素、大黄酚均能与Al3+形成1:1、2:1及3:1配位的配合物。其中,3:1配位的配合物可能具有较高的稳定性。2.大黄素、大黄酚均能够改善Al致AD小鼠的发育迟缓现象,对AD小鼠的生长发育有一定的促进作用。3.大黄素、大黄酚均可降低铝染毒小鼠在Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期、增加小鼠穿越平台次数。4.大黄素、大黄酚均可降低铝染毒小鼠脑组织中AChE活力、升高SOD活力、降低MDA含量,对小鼠脑组织胆碱能系统和抗氧化系统起到保护作用。5.大黄素、大黄酚均具有一定程度的排Al作用。综上所述,大黄素及大黄酚对AlCl3致AD小鼠的学习记忆均具有改善作用,其作用机制可能在于通过螯合配位并排出小鼠体内过量的“外邪”A13+来减少AD小鼠脑中“内生毒邪”的产生,从而治疗AD。本课题的成功实施,不但可以阐释大黄素、大黄酚治疗AD的作用机制,佐证AD“毒损脑络”病机学说的正确性,同时,还能为开发其他配体中药提供借鉴。
陈旭飞[9]（2020）在《基于组合中药分子化学设计的川芎嗪类衍生物的合成及其对胆碱酯酶抑制和细胞保护活性研究》文中指出阿尔茨海默症（AD）是最常见的老年痴呆症,是一种多发于老年前期和老年、以进行性记忆丧失和认知功能障碍为特征的中枢神经系统退行性疾病。随着全球人口老龄化的加剧已成为世界重要的公共卫生问题之一。在临床上主要表现为伴随病情加重而逐渐加深的认知及记忆能力下降、失语及行为改变等。AD病理学特征有老年斑、神经元损伤、神经元纤维缠结和和大脑皮层突触改变等。目前,AD的病因存在争议,普遍认为AD的发生与多种因素有关,如细胞凋亡、氧化应激、胆碱能损伤和能量代谢平衡紊乱等。治疗手段匮乏,临床一线用药较少。中医药治疗老年痴呆具有多阶段多靶点的优势,上千年的时间积累了丰富的临床用药经验。本论文运用组合中药分子化学研究策略,以川芎嗪为起始原料,设计合成30个川芎嗪酯和川芎嗪查尔酮衍生物。通过对胆碱酯酶抑制活性评价,以期获的显着抑制活性的化合物,采用谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,考察活性化合物的神经保护作用。通过分子模拟对接,阐释活性化合物的抑制胆碱酯酶的作用机制。全文共分为以下三个部分内容,作者的主要贡献如下:1.对老年痴呆的现状包括中西医的发病症候、发病机制、临床用药、现阶段进展中临床实验药物情况进行系统综述。阐释组合中药分子化学研究策略在药物分子设计的重要作用。2.基于组合中药分子化学研究策略,以传统治疗老年痴呆的活血行气中药川芎中的活性成分川芎嗪为出发点,在其结构中引入具有益智作用的红景天苷元设计合成出川芎嗪酯类化合物A1-A20;或引入具有明显的胆碱酯酶抑制活性的查尔酮结构片段设计合成出了川芎嗪查尔酮类化合物A21-A30。所有化合物经核磁与质谱表征,其结构正确。3.运用改良的方法对化合物进行胆碱酯酶抑制活性检测,结果显示大部分化合物都具有良好的活性。其中,化合物A12、A24、A27和化合物A29对乙酰胆碱酯酶的抑制活性优于阳性药加兰他敏,化合物A2、A26、A27和A28对丁酰胆碱酯酶的活性优于阳性药加兰他敏。运用谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞神经损伤模型评价活性化合物A12和A27的神经保护作用。结果显示,化合物A12和A27在不同浓度下均能显着降低谷氨酸的细胞毒性,提高细胞的生存率,与模型组比较均具有显着性差异。说明化合物A12和A27对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有明显的保护作用,值得进一步的研究。使用Discovery Studio 2019软件进行化合物的分子模拟对接,结果显示其化合物与多个氨基残基具有氢键作用、范德华力等相互作用。
杨云翔[10]（2019）在《气血与遗忘型轻度认知功能障碍的相关性研究》文中提出研究背景:遗忘型轻度认知功能障碍是介于正常衰老和老年痴呆之间的过渡阶段,也是预防老年痴呆的最佳阶段。目前对于遗忘型轻度认知功能障碍的诊断标准尚未统一,但是根据其主要的临床表现为记忆障碍,将它归于中医的健忘范畴。通过《内经》对认知过程的描述,发现遗忘型轻度认知功能障碍也属于中医的狭义之神的病变。现代研究中,有从“精血”、“痰”、“肾虚”等角度认识遗忘型轻度认知功能障碍,这些角度虽然都与气血有关,但并未确切和全面,因此本文尝试从气血角度认识遗忘型轻度认知功能障碍。研究目的:通过阐释气血与遗忘型轻度认知功能障碍的深层次内涵,进一步补充和完善遗忘型轻度认知功能障碍的中医诊疗方案,促进和提升对于遗忘型轻度认知功能障碍的认识,以期为科研以及临床诊疗提供新的思路与参考。研究方法:通过文献整理,采用分析归纳的方法将气血与遗忘型轻度认知功能障碍之间的关系系统化、条理化,以期为从气血角度研究遗忘型轻度认知功能障碍提供相应的理论参考。本文主要从以下几个方面进行阐述:首先通过遗忘型轻度认知功能障碍的相关概念研究,了解中西医对遗忘型轻度认知功能障碍的认识以及关联性;其次,梳理了隋唐以前至现在关于遗忘型轻度认知功能障碍的相关理论认识;再者,分别从气（包含气的生理功能与组成两个方面）、血（虚与瘀）、气血失常三个角度阐述与遗忘型轻度认知功能障碍的关系,发掘它们之间的内在机理;最后,提出从气血角度治疗遗忘型轻度认知功能障碍的临床意义,以期为遗忘型轻度认知功能障碍的现代诊疗以及科研等研究提供相应的参考。研究结论:遗忘型轻度认知功能障碍属于老年认知功能障碍的一种,衰老是其主要的病理因素,肾气不足为其主要原因。通过对遗忘型轻度认知功能障碍的文献整理发现,其病机主要分虚、实两个方面,虚者为气血两虚,实者为瘀血、痰浊以及因瘀致毒。同时提出气血两虚是遗忘型轻度认知功能障碍的基本病理因素,气虚血瘀是遗忘型轻度认知功能障碍的常见证型,气血逆乱是遗忘型轻度认知功能障碍的重要原因。因此在治疗遗忘型轻度认知功能障碍的时候可从以下几个方面入手:益气补血,健脾养心;活血化瘀,祛痰养肾;补泻同用,权衡升降;未病先防,防治并重。
二、益智灵冲剂对老年痴呆小鼠脑内乙酰胆碱及乙酰胆碱酯酶的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、益智灵冲剂对老年痴呆小鼠脑内乙酰胆碱及乙酰胆碱酯酶的影响（论文提纲范文）
（1）补肾益智抗衰方通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路促进M2型极化改善APP/PS1小鼠认知功能（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2.研究结果 |
| 2.1 BSP改善APP/PS1 Tg小鼠认知功能 |
| 2.2 BSP抑制APP/PS1 Tg小鼠脑内小胶质细胞激活 |
| 2.3 BSP促进APP/PS1 Tg小鼠M1 型小胶质细胞向M2 型转化 |
| 2.4 BSP促进APP/PS1 Tg小鼠M1 型巨噬细胞向M2 型转化 |
| 2.5 BSP抑制APP/PS1 Tg小鼠脑内TLR4、My D88、NF-κB的表达 |
| 3.讨论 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 综述 补益类药物防治阿尔兹海默病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）保健食品益智咀嚼片的开发与研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 立题背景及研究意义 |
| 参考文献 |
| 2 本课题研究目的、研究思路、技术路线、研究内容和创新点 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究思路 |
| 2.3 技术路线图 |
| 2.4 研究内容 |
| 2.5 创新点 |
| 第一章 益智咀嚼片处方研究 |
| 第一节 益智咀嚼片配方组成 |
| 第二节 益智咀嚼片改善记忆障碍的网络药理学研究 |
| 第三节 益智咀嚼片处方优选研究 |
| 第二章 益智咀嚼片制备工艺研究 |
| 第一节 提取工艺研究 |
| 第二节 成型工艺研究 |
| 第三章 益智咀嚼片改善记忆的功能学评价 |
| 第一节 益智咀嚼片改善小鼠记忆功能的研究 |
| 第四章 益智咀嚼片的毒理学安全性评价 |
| 第一节 急性毒性试验 |
| 第二节 30天喂养试验 |
| 第五章 益智咀嚼片质量标准研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法与结果 |
| 3 讨论与小结 |
| 4 益智咀嚼片的质量标准草案 |
| 总结与展望 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 Morris水迷宫的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）基于肾脑相关理论的温针灸治疗轻中度阿尔茨海默病临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 临床资料 |
| 研究方法 |
| 研究结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录 A:综述 针灸治疗阿尔茨海默病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附表 B |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 综述一 AD的病因病机及治疗进展 |
| 1 中医学对痴呆的系统认识及研究进展 |
| 1.1 中医学对痴呆病名由来及发展的认识 |
| 1.2 中医学对痴呆病因病机的古代认识 |
| 1.3 中医学对痴呆辨证论治及相关研究的认识 |
| 1.4 中医学对痴呆治疗的古今认识 |
| 综述二 西医学对AD的发病机制及治疗进展研究 |
| 1 现代医学对AD的认识及研究进展 |
| 1.1 AD的概述及流行病学 |
| 1.2 现代医学对AD发病因素的认识及研究 |
| 1.3 现代医学对AD发病相关机制的认识 |
| 2 现代医学对AD治疗的认识 |
| 2.1 乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEIs) |
| 2.2 兴奋性氨基酸受体拮抗剂 |
| 2.3 甘露特纳胶囊 |
| 2.4 其他非药物治疗 |
| 3 问题与展望 |
| 综述三 Aβ在脑内异常沉积的机制 |
| 1.Aβ的产生、分布与清除、传递与运输的研究进展 |
| 1.1 Aβ的产生 |
| 2 Aβ的清除 |
| 2.1 细胞的清除作用 |
| 2.2 Aβ被降解酶的清除作用 |
| 2.3 中枢Aβ的清除途径 |
| 2.4 血液成分介导的Aβ清除 |
| 综述四 解毒益智方在阿尔茨海默病中的应用 |
| 1 解毒益智方的创立 |
| 1.1 脑髓理论 |
| 1.2 髓虚毒损 |
| 1.3 补肾益髓,活血化痰解毒法 |
| 2 解毒益智方通过调节SIRT1/AMPK通路抑制BACE1表达改善Aβ的沉积 |
| 3 解毒益智方对阿尔茨海默病的临床应用 |
| 实验研究 |
| 第一章 CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤保护性的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠行为学的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ水平变化的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内BACE1表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（5）制何首乌与石菖蒲合用改善小鼠学习记忆能力的物质基础及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 实验一 制何首乌-石菖蒲在SD大鼠体内药物代谢动力学研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品及试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 药物提取与给药浓度 |
| 2.2 液相色谱与质谱条件 |
| 2.3 气相色谱与质谱条件 |
| 2.4 标准品制备 |
| 2.5 动物分组与给药 |
| 2.6 液质血浆样本的制备 |
| 2.7 气质血浆样本的制备 |
| 2.8 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 各物质检测结果 |
| 3.2 各物质标准曲线结果 |
| 3.3 药代动力学时间-浓度曲线与参数 |
| 实验二 制何首乌-石菖蒲对小鼠学习记忆能力的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 药物提取与给药浓度 |
| 2.2 动物分组与给药 |
| 2.3 小鼠记忆障碍模型的建立 |
| 2.4 Morris水迷宫检测 |
| 2.5 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 实验三 制何首乌-石菖蒲对学习记忆障碍模型小鼠大脑海马内P90RSK,PSD95 蛋白表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品及试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 药物提取与给药浓度 |
| 2.2 动物分组与给药 |
| 2.3 小鼠记忆障碍模型的建立 |
| 2.4 样本采集及切片 |
| 2.5 染色 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 实验四 制何首乌-石菖蒲对记忆障碍模型小鼠大脑海马中BDNF/Trk B/ERK/CREB信号通路蛋白表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品及试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 药物提取与给药浓度 |
| 2.2 动物分组与给药 |
| 2.3 小鼠记忆障碍模型的建立 |
| 2.4 样本采集 |
| 2.5 样本处理 |
| 2.5.1 组织总蛋白提取 |
| 2.5.2 蛋白浓度测定 |
| 2.5.3 蛋白变性 |
| 2.5.4 蛋白凝胶电泳 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 实验五 制何首乌-石菖蒲对记忆障碍模型小鼠大脑皮层神经递质Epi,5 -HT,GABA,Glu,NE,DA,Ach的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品及试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 药物提取与给药浓度 |
| 2.2 动物分组与给药 |
| 2.3 小鼠记忆障碍模型的建立 |
| 2.4 样本采集 |
| 2.5 标准曲线 |
| 2.5.1 对照品溶液配置 |
| 2.5.2 液相色谱与质谱条件 |
| 2.5.3 标准曲线的绘制 |
| 2.6 样本处理 |
| 2.7 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 各物质标准曲线结果 |
| 3.2 AD模型小鼠大脑皮层神经递质结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 文献综述 补肾、化痰类中药治疗阿尔茨海默病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 参与项目以及科研成果 |
| 致谢 |
（6）黄精配伍抗老年痴呆研究进展（论文提纲范文）
| 1 黄精配伍抗老年痴呆研究 |
| 1.1 二精丸抗老年痴呆研究 |
| 1.2 黄精地龙配伍抗老年痴呆研究 |
| 1.3 黄精丸抗老年痴呆研究 |
| 1.4 含黄精的组方抗老年痴呆研究 |
| 2 结语 |
（7）健脾益智法调节AD大鼠脑内尿素代谢的作用机制研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1. 中医学对AD主要症状的认识 |
| 1.1 衰老 |
| 1.2 记忆障碍 |
| 1.3 认知障碍 |
| 1.4 失语 |
| 1.5 精神症状 |
| 2. 中医学对AD病位的认识 |
| 2.1 脑的主要生理功能 |
| 2.2 脑的生理病理特点 |
| 2.3 脑与五脏的关系 |
| 2.4 五脏与AD的关系 |
| 3. 健脾益智法调治AD |
| 3.1 理论基础 |
| 3.2 实验基础 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠行为学的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 AD模型大鼠复制 |
| 2.3 Morris水迷宫实验 |
| 2.4 统计分析方法 |
| 3. 结果 |
| 3.1 Morris水迷宫定位航行实验结果 |
| 3.2 Morris水迷宫空间探索实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 动物模型的选择 |
| 4.2 Morris水迷宫检测 |
| 4.3 干预方法 |
| 实验二 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠脑内尿素含量的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 标本制备 |
| 2.3 脲酶法检测各组大鼠脑内尿素含量 |
| 2.4 统计方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验三 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠脑内SLC14A1基因表达情况及UTB蛋白含量的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 标本制备 |
| 2.3 实时荧光定量PCR法检测各组大鼠大脑中SLC14A1基因相对表达 |
| 2.4 western-blot法检测大鼠脑内UTB含量 |
| 2.5 统计方法 |
| 3. 结果 |
| 3.1 实时荧光定量PCR检测SLC14A1基因mRNA表达情况 |
| 3.2 Western bolt检测各组大鼠脑内UTB蛋白含量 |
| 4. 讨论 |
| 实验四 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠脑内CPS、OTC、ASS、ASL、ARG表达的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 标本制备 |
| 2.3 ELISA法检测大鼠脑内CPS、OTC、ASS、ASL、ARG酶 |
| 3. 结果 |
| 3.1 各组大鼠脑内ARG含量 |
| 3.2 各组大鼠脑内ASS含量 |
| 3.3 各组大鼠脑内ASL含量 |
| 4. 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 论文着作 |
（8）基于“毒损脑络”研究大黄素、大黄酚对铝致AD小鼠认知障碍的保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 世界人口老龄化日趋加速,AD的发病率呈逐年攀升趋势 |
| 2. 金属离子与痴呆机理 |
| 3. 大黄与老年痴呆 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 大黄素、大黄酚与Al~(3+)配位作用的计算研究 |
| 1. 方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 第二节 大黄素对AlCl_3致AD小鼠的药理药效实验研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第三节 大黄酚对AlCl_3致AD小鼠的药理药效实验研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 结语 |
| 1. 结论 |
| 2. 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）基于组合中药分子化学设计的川芎嗪类衍生物的合成及其对胆碱酯酶抑制和细胞保护活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 老年痴呆的症候和病因 |
| 1.1.1 老年痴呆的中医症候及病因 |
| 1.1.2 老年痴呆的西医症状和病因 |
| 1.2 老年痴呆症治疗方法 |
| 1.2.1 药物治疗 |
| 1.2.1.1 传统中药 |
| 1.2.1.2 现代化药 |
| 1.2.1.3 中西药联合治疗 |
| 1.2.2 其他治疗方法 |
| 1.2.2.1 针灸疗法 |
| 1.2.2.2 环境干预 |
| 1.3 老年痴呆药物研发现状和发展 |
| 1.4 组合中药分子化学研究策略 |
| 1.5 本论文的研究内容及意义 |
| 第二章 川芎嗪衍生物的设计和合成 |
| 2.1 实验仪器与试剂 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.2 化合物的设计与合成 |
| 2.3 合成步骤 |
| 2.4 合成结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 胆碱酯酶抑制活性和SH-SY5Y神经细胞保护活性研究 |
| 3.1 胆碱酯酶抑制活性检测 |
| 3.1.1 实验仪器和试剂 |
| 3.1.1.1 实验仪器 |
| 3.1.1.2 实验试剂 |
| 3.1.2 实验试剂的配制 |
| 3.1.3 胆碱酯酶体外抑制活性检测 |
| 3.1.3.1 实验原理 |
| 3.1.3.2 实验步骤 |
| 3.1.4 数据处理 |
| 3.1.5 实验结果与讨论 |
| 3.2 对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 |
| 3.2.1.1 实验细胞株 |
| 3.2.1.2 实验仪器 |
| 3.2.1.3 实验试剂 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.2.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2.2 损伤模型的建立 |
| 3.2.2.3 MTT法检测细胞存活率 |
| 3.2.3 数据处理 |
| 3.2.4 实验结果与分析 |
| 3.3 化合物A12和A27分子对接实验 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（10）气血与遗忘型轻度认知功能障碍的相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 遗忘型轻度认知功能障碍的文献概述 |
| 1 遗忘型轻度认知功能障碍的相关概念 |
| 2 遗忘型轻度认知功能障碍的理论沿革 |
| 2.1 隋唐之前 |
| 2.2 隋唐时期 |
| 2.3 两宋时期 |
| 2.4 金元时期 |
| 2.5 明清时期 |
| 2.6 近现代 |
| 第二章 气血与遗忘型轻度认知功能障碍相关性的内在机理 |
| 1 气与遗忘型轻度认知功能障碍的关系 |
| 1.1 气的生理功能与遗忘型轻度认知功能障碍 |
| 1.2 元气与遗忘型轻度认知功能障碍 |
| 1.3 宗气与遗忘型轻度认知功能障碍 |
| 1.4 营卫之气与遗忘型轻度认知功能障碍 |
| 1.5 经络之气与遗忘型轻度认知功能障碍 |
| 1.6 五脏之气与遗忘型轻度认知功能障碍 |
| 2 血与遗忘型轻度认知功能障碍的关系 |
| 3 气血失常与遗忘型轻度认知功能障碍的关系 |
| 3.1 气血两虚是遗忘型轻度认知功能障碍的基本病理因素 |
| 3.2 气虚血瘀是遗忘型轻度认知功能障碍的常见证型 |
| 3.3 气血逆乱是遗忘型轻度认知功能障碍发生的重要原因 |
| 第三章 从气血治疗遗忘型轻度认知功能障碍的临床意义 |
| 1 益气补血,健脾养心 |
| 2 活血化瘀,祛痰养肾 |
| 3 补泻同调,权衡升降 |
| 4 未病先防,防治并重 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
四、益智灵冲剂对老年痴呆小鼠脑内乙酰胆碱及乙酰胆碱酯酶的影响（论文参考文献）
- [1]补肾益智抗衰方通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路促进M2型极化改善APP/PS1小鼠认知功能[D]. 王玉银. 山西中医药大学, 2021
- [2]保健食品益智咀嚼片的开发与研究[D]. 王双. 山西中医药大学, 2021(09)
- [3]基于肾脑相关理论的温针灸治疗轻中度阿尔茨海默病临床研究[D]. 马慧慧. 山西中医药大学, 2021(09)
- [4]解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究[D]. 朱晓婷. 长春中医药大学, 2021(01)
- [5]制何首乌与石菖蒲合用改善小鼠学习记忆能力的物质基础及机制研究[D]. 宁富楠. 湖北中医药大学, 2021(10)
- [6]黄精配伍抗老年痴呆研究进展[J]. 钱红月,肖移生,侯吉华,姜劼琳,欧阳厚淦. 亚太传统医药, 2021(04)
- [7]健脾益智法调节AD大鼠脑内尿素代谢的作用机制研究[D]. 陈思馨. 山东中医药大学, 2020(01)
- [8]基于“毒损脑络”研究大黄素、大黄酚对铝致AD小鼠认知障碍的保护作用[D]. 宋玲玲. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]基于组合中药分子化学设计的川芎嗪类衍生物的合成及其对胆碱酯酶抑制和细胞保护活性研究[D]. 陈旭飞. 西北大学, 2020(02)
- [10]气血与遗忘型轻度认知功能障碍的相关性研究[D]. 杨云翔. 福建中医药大学, 2019(03)