生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用

生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用

一、生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用(论文文献综述)

谭文松,陆健,张元兴[1](1996)在《气升式生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用》文中认为在前述研究工作基础上,设计开发了10L规模的动物细胞培养用气升式生物反应器。应用该生物反应器悬浮培养杂交瘤细胞,通过平行试验,考察了该反应器设计的合理性和可靠性。结果显示该反应器不存在限制细胞生长、代谢和产物生成的因素,而且细胞破损被彻底消除,表明该气升式生物反应器给细胞生长、代谢和产物生成提供了理想的培养环境,其设计是成功的。

王贤辉[2](2004)在《抗凋亡与增殖抑制策略在杂交瘤细胞规模化培养中应用的研究》文中认为杂交瘤细胞H18由我室制备,分泌单抗Hab18,特异性结合肝癌相关抗原Hab18G/CD147分子。为了提高杂交瘤细胞在生物反应器培养中抗体的产量,本实验欲从抗凋亡及细胞增殖抑制两方面着手研究,以求提高杂交瘤细胞分泌抗体的产量,并整合上述因素,在5L生物反应器中进行中试培养。 第一部分 鼠bcl-XL基因的克隆及在CHO细胞中的表达 用Trizol提取BALB/c小鼠脑组织总RNA,反转录PCR扩增鼠bct-XL全长cDNA序列,并将所克隆的序列与pGEMT载体连接,进行测序;为了快速检测所获的bcl-XL全长cDNA序列是否能完全表达,将其与pEGFP载体连接,构建pEGFP—bcl-XL重组融合表达质粒;用脂质体法将重组真核表达载体pEGFP-bcl-XL转染入CHO细胞,用荧光显微镜检测转染细胞中Bcl-XL-EGFP融合蛋第四零医大学博士论灸白的表达结果表明:成功获得了鼠bcl一cDNA,构建编码鼠bcl-Xl的真核融合表达载体pEGFP一be卜XL,转染CHO细胞后观察到融合蛋白表达结论鼠bcl气XL基因的克隆及融合表达,为进一步在高密度、大规模细胞培养中利用bcl一具有重要意义。 第二部分H18杂交瘤细胞株抗凋亡能力的改造及鉴定 利用PCR从pGEM一T-be卜XL质粒中获得bcl一基因,构建真核表达载体pEF一bel一XL,脂质体法转染杂交瘤细胞H 18,G418筛选稳定表达株,Westem blotting检测目的蛋白表达,流式细胞仪检测Bd一XL提高杂交瘤抗正丁酸钠(NaBu)诱导凋亡的功能将构建的编码鼠bcl一基因的真核表达载体pEF一bcl一XL,转染H18细胞后,获得稳定的表达株细胞;稳定表达Bcl一XL的细胞具有抗正丁酸钠诱导凋亡的功能鼠bcl、k飞基因在杂交瘤细胞中稳定表达,提高了杂交瘤抗凋亡的能力,对高密度大规模培养杂交瘤细胞具有重要意义。 第三部分NaBu促进HIS.D4杂交瘤分泌抗体机制的研究 利用NaBu促进杂交瘤细胞分泌单克隆抗体,并对其作用机制进行了研究结果表明在H18D4杂交瘤细胞对数生长后期添加0.6mM浓度的NaBu与对照相比可提高抗体的产量1 .5倍;流式细胞仪检测细胞周期表明此时83.7%的细胞处于GI期;免疫印记结果显示在有NaBu作用下杂交瘤细胞P27蛋白表达显着升高因此,NaBu可通过促进P27蛋白的表达,抑制杂交瘤细胞的增殖,从而提高杂交瘤细胞分泌抗体的能力对NaBu进一步在高密度大规模培养杂交瘤细胞中的应用具有重要意义。第四零医大学博士论丈 第四部分H18.D4杂交瘤细胞的中试研究 利用SL生物反应器悬浮手睡忆培养改造后的抗凋亡杂交瘤细胞H18.D4,并结合细胞增殖抑制策略,研究其中试培养特点及生产的抗体特性H18.D4杂交瘤细胞2xl护个/mIJ接种于SL生物反应器中,当细胞生长到对数生长后期加入0.6mM NaBu,培养结束后通过Streamhne SP纯化系统回收纯化培养上清中的目标抗体;利用流式细胞仪Biacore和免疫组织化学对纯化的抗体进行免疫学鉴定;结果显示抗凋亡杂交瘤细胞H18.D4可快速的达到对数生长,细胞比生长速率为12h,加入NaBu后细胞的生长受到抑制,最高细胞密度为2.5 x 106个/mL;有效细胞培养周期可持续5天;抗体浓度为196ug/mL,收获培养上清后经Streamline sp和阴离子层析柱纯化后,抗体纯度可达95%,抗体免疫活性经鉴定可特异性的与肝癌细胞HHCC及肝癌组织的结合,经此生产过程获得的抗体的亲和常数为6.17x10一’。M抗凋亡杂交瘤细胞H18.D4结合增殖抑制药物NaBu在SL生物反应器中培养,其抗体产量与单纯杂交瘤细胞H18培养相比可提高2.5倍,而且最终获得的抗体与鼠腹水制备的抗体的免疫活性相同。

王祥斌,孔健[3](2002)在《体外培养杂交瘤细胞生产人用鼠源单克隆抗体》文中认为目前,人用鼠源单抗的生产方法一般分为体内法和体外法2种。体内法即腹水法。尽管腹水中抗体浓度比较高(2~10mg/ml),但由于所用的BALB/c小鼠必须达到SPF级,繁殖、饲养BALB/c小鼠及生产腹水、纯化抗体的厂房必须符合GMP要求,WHO及我国对体内法生产的人用鼠源单克隆抗体的质检项目繁多,要求严格,因此限制了体内法在人用鼠源单抗生产领域的应用。由于体外法(杂交瘤细胞体外培养法)的产品纯度高,可以避免鼠类病毒的污染,简化质检项目,操作具有可控制性,适用于大规模工业生产,

邹寿长,李干祥,杨葆生,徐秀英[4](2001)在《大规模动物细胞培养技术研究进展》文中进行了进一步梳理利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品 .为提高细胞活力和表达水平及有利于表达产物的纯化 ,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞 ,选择更有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度快的生物反应器 .在线监控细胞生存环境和生理活动 ,减少培养过程培养基中的抑制因素 ,可创造更适合细胞生存的环境 ,提高表达水平 .向细胞中导入抗凋亡基因 ,可提高细胞活性和蛋白产量 .利用多孔微载体以球转球方式大规模培养动物细胞有很好的发展前景 .

李玲[5](2005)在《葡萄糖和谷氨酰胺代谢优化的无血清悬浮流加培养及过程中多参数联合控制》文中指出面临重组药用蛋白需求的不断增长和哺乳动物细胞培养规模的不断扩大,对动物细胞培养过程的诸多不足进行优化成为亟待解决的问题。近年来,世界众多领域的研究集中在细胞特性优化、细胞代谢调控、细胞产品产率提高并保证其质量和一致性上;悬浮培养方式、无血清培养基、注重产品产量和质量同时提高的发展理念成为动物细胞规模化培养技术的发展趋势并取得重要的进展,但目前对动物细胞培养过程进行的优化研究缺乏针对某一产品的整体工艺集成性,没有充分考虑到工业化动物细胞培养及生产过程的系统性。因此,进行基于产品为基础的无血清培养基研制,无血清悬浮驯化培养,葡萄糖和谷氨酰胺代谢优化的流加培养,及流加培养的过程参数控制等方面系统性、整体性的研究优化,将为动物细胞培养生产生物技术药物提供可借鉴的研究思路,为建立我国动物细胞规模化培养技术平台奠定基础。 [目的]1.研制无血清培养基,进行无血清悬浮驯化培养;2.筛选适宜的葡萄糖和谷氨酰胺起始浓度,进行葡萄糖和谷氨酰胺代谢优化的流加培养;3.确定种子细胞前期培养的过程参数控制范围,实现培养过程中种子细胞生理状态稳定性的控制。

冯强[6](2003)在《杂交瘤细胞大规模培养过程控制策略及抗体制剂保存工艺的优化》文中研究指明目的:在应用生物反应器进行动物细胞大规模培养时,过程的在线分析和调控技术对于高细胞密度和高产品得率的获得是非常重要的。过程参数中,摄氧速率(OUR)是细胞生长代谢状态灵敏的指示剂,通过OUR在线实时测定,可以即时反映细胞的代谢状况,为补料策略的确定和调整提供依据,并为整个培养工艺的优化提供良好的参考指标。国内外相关文献显示:随着对大规模培养过程研究的不断深入,OUR已经成为数据分析中必需的部分。在一定条件下,OUR与对数生长期的细胞密度呈良好的线性相关关系;同时通过引入乳酸生成的计算后可以估算细胞总ATP的生成情况,从而反映细胞的生理状态,为在线监控提供依据。因此本研究的目的之一是建立并优化基于OUR的反馈控制策略并应用于杂交瘤细胞HAb18的批式及灌流培养过程中,提高抗人肝癌单抗 HAb18 IgG的生产效率。 另一方面,当大规模培养动物细胞的目的是为了获取分泌在上清中的产物(单抗、细胞因子、酶等)时,为保证产品的数量和质量不因环境影响而降低,目标产物的及时处理也就成为提高生产效率的一个重要环节。抗体分子会因水、热和氧等物理或化学因素的影响发生变性,因 第四军医大学硕士学位论文此纯化后高纯度抗体的有效保存就显得尤为重要。在各种保存方法中,采用冷冻干燥工艺可保持产品原有的理化性质和生物活性,因此冷冻干燥法是较理想的保存方法。因此本研究的目的之二是优化针对纯化后抗体制剂的冻干保存工艺,延长抗体的保存时间,从减少己得产品损失的角度来提高抗体的生产效率。方祛:1.批式培养中OUR与细胞生长及代谢的关系 (l)在 SL BIOSTAT B生物反应器中对杂交瘤细胞 HAbls进行批式培养。在溶氧浓度分别为 3 0%和 70%(空气饱和度)条件下对 DO水平对细胞的影响进行了研究。 门)两台生物反应器在搅拌转速 60rpm,温度 37C,表面通气速率1.5 L/min,pH 7.0刁.2条件下,以 5分钟为间隔记录溶氧历0%上 0%)随时间的变化,测定了体积氧传递系数KLL。 ()在 SL BIOSTAT B生物反应器中进行批式培养,研究了批式培养中OUR与细胞密度的关系。2.灌流培养中OUR与细胞生长及代谢的关系 在 SL CelliGen Plus反应器中进行灌流培养,工作体积为 3.SL,固定添装2009 F止ra{el聚酯片载体,采用连续灌流培养工艺培养杂交瘤细胞 HAb 8,以糖为主控指标对灌流培养过程中的抗体生成进行了研究。灌流过程以生物反应器内葡萄糖浓度保持在1.sg/L为指导,调整培养基灌流速率,范围为 0~SL/d。3.以OUR为主控指标的灌流培养反馈控制模式的研究 (l)杂交瘤细胞株 HAbls在 75rnL方瓶中形成不同乳酸或氨浓度的实验组,接种后每天所有方瓶吹匀后取样计数,进行乳酸浓度及氨浓度对细胞生长的抑制实验。 (2)在SL BIOSTAT B生物反应器中批式培养杂交瘤细胞HAb18,以 5 第四军医大学硕士学位论文OUR的变化为指导进行补料的初步研究。培养过程中在线检测OUR,待OUR不再上升即凸 OUR=R=0时补入新鲜培养基 0.SL。 (3)在 SL CelliGen Plus反应器中对 OUR-氨基酸补加模式进行了研究。灌流速率从第斗天起保持在1刀体积/天,同时根据氨基酸的特异性消耗,在八 OUR=0时按其消耗量的 50%补入六种氨基酸的浓缩混合液。培养过程中在线检测OUR,每6小时取样离线检测抗体、葡萄糖等物质的浓度。培养至门天时,共添加 3次。 ()在 SL CelliGen Plus反应器中对 OUR-灌流速率模式进行了研究。培养开始后,灌流速率以八 OUR—0时刻为调整点做相应提高。培养过程中在线检测OUR,每6小时取样离线检测抗体、葡萄糖等物质的浓度。4.抗体冻干工艺的研究 (l)抗体冻干保护剂的筛选 通过记录冻干机搁板降温时瓶内“温度-时间”变化曲线,测定分别加入冻干保护剂葡萄糖、蔗糖、甘露醇、右旋糖备 聚乙二醇后抗体溶液的共熔点温度,并根据共熔点温度进行冻干并检测各组冻干样品的质量,对各种保护剂进行筛选。 (2)抗体冻干流程的优化 使用蔗糖作为保护剂,设置不同预冻温度、一步干燥温度及25℃时二步干燥时间,对抗体溶液进行冻干并检测冻干品质量,对冻干各环节进行优化。结果:1.批式培养中OUR与细胞生长及代谢的关系 门)溶氧浓度在30%至70%(空气饱和度)范围内时,对杂交瘤细胞HAb 8的生长无明显影响。 门)两台生物反应器的 K。a值分别为:BIOSM BI刀92土0.067h刁;CClliGCll pills 0.914士0.082 h-1。 6 第四军医大学硕士学位论文 (3)杂交瘤细胞 HAb 8的生长特性为:在批式悬浮培养时生 L过渡期为30卜 此后进入对数生长期,比生长速率。约为0.054.om‘,最大话细胞密度可达到 2 XIO、ells/ml。OUR与活细

朱紫瑜,王冠,庄英萍[7](2021)在《大规模哺乳动物细胞培养工程的现状与展望》文中提出近年来,随着对疫苗和治疗性蛋白类药物等多种生物制品需求量增加以及产品质量要求的提高,细胞大规模培养技术也不断发展。为了增加产量、降低成本,生产更安全有效的药物,大规模细胞培养过程的开发至关重要,而动物细胞的工艺优化和规模放大具有挑战性。提高细胞培养工艺表达量、扩大细胞培养生产规模、保证表达抗体质量稳定成为目前大规模细胞培养过程中亟待解决的问题,迫切需要进一步研究和开发细胞培养工艺。本文围绕以上问题,系统综述了通过优良细胞株的构建、培养基设计与无血清培养基的开发、基于过程分析技术(PAT)培养工艺的优化与放大,建立合适的大规模培养体系,实现细胞的高密度培养和产物的高效表达。与此同时,细胞培养过程中产生的多源异质数据基本依靠低效的人工处理与判断,缺乏深层次的全局因素考虑。为此,未来希望通过人工智能深度挖掘数据之间的关系并指导细胞培养过程工艺优化与放大,实现真正的智能生物制造。

张元兴,魏明旺,董志峰[8](1997)在《杂交瘤细胞的大量培养》文中研究指明杂交瘤细胞的大量培养是一项迅速发展的技术。本文评述了杂交瘤细胞培养条件和代谢调控方面的研究进展,包括反应器培养中的过程参数优化、细胞损伤和保护、营养物质利用和有害副产物的形成、细胞生长和单抗分泌的动力学以及长期培养的稳定性等问题。同时,本文也讨论了在生物反应器中培养杂交瘤细胞的操作模式和控制策略的研究工作,特别是近年来备受重视的灌注培养和补料培养。

吴方丽,金伟波,王保莉,张涌[9](2005)在《动物细胞大规模培养技术研究进展》文中进行了进一步梳理利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品,为提高细胞活力和细胞生长密度,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞,选择既有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度快的生物反应器,在线监控细胞生存环境和生理活动,减少培养过程中培养基的抑制因素,从而给细胞提供更好的生存环境;另外通过向细胞中导入抗凋亡基因,可减缓细胞凋亡的发生,提高细胞活性和蛋白产量;此外,在动物细胞大规模培养过程中,利用多孔微载体能高效、大量地增殖细胞,具有良好的应用前景.

米力,李玲,冯强,余晓玲,陈志南[10](2002)在《连续灌流培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体》文中研究表明

二、生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用(论文提纲范文)

(1)气升式生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 细胞和培养基
        1.1.1 细胞:
        1.1.2 培养基:
    1.2 细胞种子培养
    1.3 生物反应器培养
        1.3.1 对照试验:
        1.3.2 气升式生物反应器:
        1.3.3 气升式生物反应器中细胞培养:
    1.4 分析测定方法
        1.4.1 细胞计数:
        1.4.2 营养物和代谢副产物测定:
        1.4.3 单克隆抗体测定:
2 结果
    2.1 细胞生长
    2.2 细胞代谢
    2.3 单抗生成
4 讨论

(2)抗凋亡与增殖抑制策略在杂交瘤细胞规模化培养中应用的研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
前言
文献回顾
    一、 抗凋亡策略在细胞大规模培养中的应用
    二、 细胞周期在动物细胞大规模培养中的应用
    三、 动物细胞规模化培养模型
研究内容
    第一部分 鼠bcl-X_L基因的克隆及在CHO细胞中的表达
    第二部分 H18杂交瘤细胞株抗凋亡能力的改造及鉴定
    第三部分 NaBu促进H18.D4杂交瘤分泌抗体机制的研究
    第四部分 H18.D4杂交瘤细胞的中试研究
小结
参考文献
致谢

(4)大规模动物细胞培养技术研究进展(论文提纲范文)

1 细胞培养环境的最优化
    1.1 配制细胞生长最适合的培养基
    1.2 生物反应器的选择
        1.2.1 气升式 (air lift) 生物反应器
        1.2.2 中空纤维管 (hollow-fiber) 生物反应器
        1.2.3 流化床 (fluidiz bed) 生物反应器 (FBR)
        1.2.4 搅拌罐 (stir tank) 生物反应器 (STR)
        1.2.5 固定床 (fixed bed) 生物反应器
        1.2.6 堆积床 (packed bed) 生物反应器
        1.2.7 一次性 (disposable) 生物反应器
    1.3 微载体的选择
    1.4 过程监控
    1.5 维持细胞培养所需的最佳条件
2 改变细胞特性
3 大规模动物细胞培养技术
    3.1 用堆积床 (packed bed) 生物反应器生产基因重组蛋白
    3.2 通过球转球方法 (beads-to-beads) 生产基因重组蛋白
    3.3 其他动物细胞大规模培养技术
4 结 语

(5)葡萄糖和谷氨酰胺代谢优化的无血清悬浮流加培养及过程中多参数联合控制(论文提纲范文)

缩略语表
术语
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
正文
    第一部分 无血清培养基的正交实验设计筛选
    第二部分 CHO-TS28细胞的无血清悬浮驯化培养
    第三部分 葡萄糖和谷氨酰胺代谢优化的流加培养
    第四部分 培养过程中种子细胞生理状态稳定性的多参数联合控制
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢

(6)杂交瘤细胞大规模培养过程控制策略及抗体制剂保存工艺的优化(论文提纲范文)

缩写词及专用术语中英文对照表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
研究内容
    第一部分 OUR测定及在反馈控制培养模式中的初步应用
    第二部分 抗体制剂的冻干保存工艺优化
研究小结
参考文献
学习期间发表论文情况
致谢

(7)大规模哺乳动物细胞培养工程的现状与展望(论文提纲范文)

1 优良细胞株的构建
    1.1 单克隆抗体生产过程中的“产品质量”
    1.2 单克隆抗体生产过程中“产品产量”
2 培养环境
    2.1 生长培养基
        2.1.1 基于化学计量模型约束的培养基设计
        2.1.2 代谢废物的脱除
        2.1.3 无血清培养基的开发
    2.2 以过程分析技术(PAT)为核心的大规模细胞培养过程工艺优化与放大
        2.2.1 在线检测(on-line)
        2.2.2 近线检测(at-line)
        2.2.3 过程数据统计与分析
    2.3 生物反应器中的流场环境
        2.3.1 微载体技术的应用
        2.3.2 微载体浓度对细胞生长的影响
        2.3.3 流体剪切对细胞生长的影响
3 未来大规模细胞培养平台:从“多尺度”到“智能化”
    3.1 基于多尺度参数相关分析的细胞培养过程优化与放大
    3.2 大规模细胞培养过程智能制造
4 总结与展望

(9)动物细胞大规模培养技术研究进展(论文提纲范文)

1 细胞最适生长培养基的选择
2 生物反应器的选择
3 培养用微载体的选择
4 培养过程的在线监控
5 维持细胞生长所需的最佳条件
6 物理场效应对细胞生长的影响
    6.1 增强细胞抗凋亡能力
    6.2 选择合适的细胞培养工艺
7 存在问题
    7.1 无血清培养基适用范围窄
    7.2 固定化培养技术及微载体需进一步探索
    7.3 生物反应器装置及生产工艺仍需改进
8 展望

(10)连续灌流培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 杂交瘤细胞系与种子细胞的制备
    1.2 培养基及其添加成分
    1.3 生物反应器
    1.4 连续灌流培养
    1.5 检测方法
2 结 果
    2.1 培养条件的选择
    2.2 连续灌流培养
3 讨 论

四、生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用(论文参考文献)

  • [1]气升式生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用[J]. 谭文松,陆健,张元兴. 生物工程学报, 1996(04)
  • [2]抗凋亡与增殖抑制策略在杂交瘤细胞规模化培养中应用的研究[D]. 王贤辉. 第四军医大学, 2004(04)
  • [3]体外培养杂交瘤细胞生产人用鼠源单克隆抗体[J]. 王祥斌,孔健. 中国生物制品学杂志, 2002(05)
  • [4]大规模动物细胞培养技术研究进展[J]. 邹寿长,李干祥,杨葆生,徐秀英. 生命科学研究, 2001(02)
  • [5]葡萄糖和谷氨酰胺代谢优化的无血清悬浮流加培养及过程中多参数联合控制[D]. 李玲. 第四军医大学, 2005(06)
  • [6]杂交瘤细胞大规模培养过程控制策略及抗体制剂保存工艺的优化[D]. 冯强. 中国人民解放军第四军医大学, 2003(03)
  • [7]大规模哺乳动物细胞培养工程的现状与展望[J]. 朱紫瑜,王冠,庄英萍. 合成生物学, 2021(04)
  • [8]杂交瘤细胞的大量培养[J]. 张元兴,魏明旺,董志峰. 生物工程进展, 1997(05)
  • [9]动物细胞大规模培养技术研究进展[J]. 吴方丽,金伟波,王保莉,张涌. 仲恺农业技术学院学报, 2005(03)
  • [10]连续灌流培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体[J]. 米力,李玲,冯强,余晓玲,陈志南. 生物工程学报, 2002(03)

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生物反应器在杂交瘤细胞培养中的应用
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