一、大熊猫生殖生物学研究:Ⅱ.大熊猫妊娠期尿中孕酮和绒毛膜促性腺激素样物质含量的变化（论文文献综述）
周世强[1]（2021）在《大熊猫生殖策略与觅食行为的耦合机制：能量-营养-气温关联效应》文中认为雌性大熊猫妊娠阶段的胚泡延迟着床、胎儿快速发育以及秋季产下体型短小幼仔的生殖策略,与其食物结构中的能量含量和营养成分密切相关,从而形成了野生大熊猫特有的觅食行为模式。即野生大熊猫以主食竹富含能量和营养物质的竹笋和幼嫩竹叶为主食,少量取食竹茎、竹枝和老竹叶以及不同的竹子种类,并且随栖息环境的气温变化而垂直迁移。本文从栖息地气候的季节变化格局与野生大熊猫的垂直迁移特征、亚高山竹类的物候规律与野生大熊猫的觅食行为习性、主食竹器官的营养和能量分异与野生大熊猫的生殖生理策略,以及主食竹营养和能量的生理基础等方面综述并论证了大熊猫生殖策略与觅食行为的耦合机制:能量-营养-气温关联效应。
李婵[2]（2019）在《雌性秦岭大熊猫尿液中类固醇激素ELISA试剂盒的研发及应用》文中研究说明大熊猫因其物种特殊性,圈养条件下难以准确判断发情排卵时间,难配种,难受孕。检测大熊猫尿液雌二醇（Estradiol,E2）与孕酮（Progesterone,P4）浓度变化规律,有助于准确判断大熊猫的发情、受精、怀孕等生殖活动。而现今市场上缺乏成熟的商品化可用于检测秦岭大熊猫尿液中E2和P4的试剂盒。酶联免疫法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）操作简单、快捷,灵敏性性高,是目前较为成熟可靠的激素检测方法之一。本研究旨在开发出可用于秦岭大熊猫尿液E2和P4检测的ELISA试剂盒,建立秦岭大熊猫发情、妊娠检测技术体系,为检测大熊猫的生殖活动提供理论依据。主要研究内容和结果如下:（1）制备了可用于试验动物免疫及酶标板包被的完全抗原E2-BSA、E2-OVA、P4-BSA、P4-OVA,其中E2-BSA的偶联比为17:1,浓度为32.35 mg/mL,E2-OVA的偶联比为5:1,浓度为2.721 mg/mL,P4-BSA的偶联比为26:1,浓度为17.889 mg/mL,P4-OVA的偶联比为9:1,浓度为2.151 mg/mL。（2）将制备好的完全抗原E2-OVA或P4-OVA与等量的弗氏完全佐剂混合,并充分乳化,背部皮下多点注射免疫试验动物。制备了兔源性E2、P4多克隆抗体,E2抗血清效价分别为1.28×105、5.12×105,IC50值为3.727 ng/mL,P4抗血清效价大于1.024×106,IC50值为18.040 ng/mL。（3）制备了用于检测E2的间接竞争ELISA方法,并经过检测条件和方法的优化,筛选出了最佳反应条件。优化结果为:用碳酸盐缓冲液4℃过夜+37℃2 h包被;封闭液用1%BSA溶液,在4℃过夜+37℃2 h封闭;竞争反应1 h,与二抗反应1 h,TMB以2 mg/mL DMSO溶解。优化后得到标准曲线y=-0.1653x+1.0533（R2=0.9548）,完善试剂盒数据,结果为:该ELISA试剂盒与17β-E2-HS交叉反应率为306.5%,与P4、11α-OH-P4-HS和T无交叉反应;灵敏度达112.683 pg/mL;批内变异系数为1.83%,批间变异系数为5.63%;准确性由回收率决定,回收率达到90%-110%。（4）制备了用于检测P4的间接竞争ELISA方法,并经过检测条件和方法的优化,筛选出最佳反应条件。优化结果为:用碳酸盐缓冲液于4℃过夜+37℃2 h包被;封闭液用1%牛血清,在4℃过夜+37℃2 h封闭;竞争反应1 h,与二抗反应1 h,TMB以2 mg/mL DMSO溶解。优化后得到标准曲线y=-0.3282x+1.9837（R2=0.9755）,试剂盒性能验证,结果为:该ELISA试剂盒与11α-OH-P4-HS交叉反应率为98.87%,与E2、T、17β-E2-HS无交叉反应率;灵敏度达309.854 pg/mL;批内变异系数为4.27%,批间变异系数为4.98%;准确性由回收率决定,回收率达到90%-110%。（5）运用试验建立的ELISA方法检测结果与林业科学院检测结果做了对比,E2和P4检测结果变化趋势相同,E2浓度略高于对比结果,P4浓度基本与对比结果相同。（6）运用本试验建立的ELISA方法,对大熊猫Ⅱ发情期、妊娠期和流产期尿液进行了检测,分析了该大熊猫激素变化。综上,本研究制备了可用于秦岭大熊猫尿液E2和P4 ELISA试剂盒,优化了最佳反应条件,筛选出了最简使用流程,并将其在大熊猫临床发情、妊娠诊断中做了初步应用。
卫泽珍,崔媛媛[3]（2017）在《内分泌学分析法在圈养野生动物研究中的应用》文中研究说明动物园等迁地保护机构承载着珍稀野生物种保护和科学繁殖的重任,合理保障圈养野生动物的繁殖成功率,关注动物在饲养环境下的应激水平及福利状态,是动物园动物管理工作的重要组成部分。随着各项科学技术的发展,在动物学研究中将宏观行为学与内分泌研究结合,可以更为准确、细致地进行动物繁殖判定分析,也将得到越来越广泛的应用。本文主要针对动物园中的圈养野生物种,对内分泌分析法在野生动物发情能力判定、适时配种、妊娠诊断、性别判定、应激测定等方面的应用进行了一定的阐述,并讨论了内分泌分析法中血液、尿液、粪样等测定样品利弊,旨在为今后相关的研究工作提供一定的帮助。
高凯[4]（2017）在《大熊猫食笋季节食物资源竞争》文中指出大熊猫（Ailuropoda melanoleuca）是中国特有的大熊猫科动物,同时也是全球生物多样性保护的旗舰物种,其种群的现状与发展一直受到广泛的关注。由于竹子的低营养含量特征,大熊猫能够从中获取的有效营养收益十分有限,因此,营养含量相对较高的竹笋在大熊猫的繁殖育幼等重要生命活动中起着重要作用。但目前缺乏关于笋期大熊猫觅食策略及其与同域物种之间食物资源竞争的研究。2016年3月开始,本研究以秦岭野生大熊猫为研究对象,在陕西佛坪国家级自然保护区,通过对野外觅食行为的直接观察和固定竹笋样方的定期监测,研究秦岭大熊猫在重要觅食时期—食笋时期的种间食物竞争状况,分析种间食物竞争可能对大熊猫产生的影响,探讨大熊猫在这一种间食物竞争状态下的觅食策略及其生物学意义,为野生大熊猫的科学保护与管理提供重要的基础资料。主要研究结果如下:1、研究区内的大熊猫采食巴山木竹（Bashania fargesii）竹笋的时间为每年的4-6月份,此后随着巴山木竹竹笋的木质化,大熊猫从6月中旬开始迁徙至高海拔地区采食秦岭箭竹（Fargesia qinlingensis）竹笋。虽然笋期大熊猫在对巴山木竹以及秦岭箭竹采食点的选择上有一定的差异,但这些采食点的共同特征是成竹基径较大、高度较高等这些发笋质量较好的地方。同时,在对竹子相关变量特征的选择上均倾向于选择基径较大、高度较高的竹笋。这些研究结果表明大熊猫在笋期的觅食策略与其他面临严峻营养挑战的食草动物相似,即通过在异质化的竹笋斑块中选择营养质量较高的食物资源从而最大化自身的营养收益。2、在研究区内与大熊猫同域分布的物种中,野猪（Sus scrofa）、羚牛（Budorcas taxicolor）、黑熊（Ursus thibetanus）、鸟类、昆虫存在在笋期采食竹笋的行为。在这些竞争种之间,野猪对两种大熊猫主食的两种竹笋的采食量均较大,而其他物种对于大熊猫采食竹笋的干扰较小。同时,二者在对食物资源以及微生境中各变量的选择上并没有明显的差异,却在采食竹笋的数量上差异不大。因此,我们推测对竹子这一食物资源的特化适应使得大熊猫具有较高的觅食效率,从而在食物资源丰富的情况下能与野猪在采食过程中达到竞争性共存。3、本研究结合微生境选择及食物资源利用方式,首次对大熊猫与同域物种之间在食笋季节的食物资源竞争关系进行分析和探讨,研究成果有助于理解专食性物种与广食性物种之间的竞争关系以及共存机制,同时为野生大熊猫的科学保护与管理提供一定的基础资料。
于冯[5]（2016）在《竹叶黄酮对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响》文中研究指明竹叶黄酮（AOB）是一类竹子中提取的黄酮类化合物。许多黄酮类化合物具有雌激素效能,可因剂量差异对动物生殖及胚胎发育功能产生不同影响。大熊猫是我国特有珍稀濒危动物,有“国宝”和“活化石”之称,低下的生殖力使大熊猫的种群正在走向灭亡。竹子是大熊猫的主要食物来源,大熊猫的低生殖能力是否会受到竹叶黄酮在体内累积的影响至今尚不清楚。本研究首先采用小鼠胚胎成纤维（MEF）细胞和小鼠胚胎干细胞（mESC）分化形成的拟胚体（mEB）为模型,探索AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能的毒理以及内在相关基因表达的影响及作用机制,以期为进一步探索竹叶黄酮是否对大熊猫生殖力具有影响奠定基础。本研究取得了以下主要结果：1、AOB对MEF细胞的毒理性作用及基因表达的影响采用形态观察、MTT实验、流式细胞术等检测不同浓度AOB对MEF细胞增殖的影响作用。结果表明低浓度AOB （0-10 μg/ml）对MEF生长具有显着促进作用；较高浓度的AOB（≥100μ/ml）对MEF细胞增殖具有显着抑制作用,且能显着增强MEF凋亡率。形态学观察发现,AOB可使贴壁的MEF细胞皱缩,不能维持其梭型状态。实验确定了AOB对MEF细胞的半致死浓度为400μg/ml。根据表达谱基因芯片结果筛选出差异基因792个,其中,实验组与对照组相比表达量上调2倍以上的基因有478个,下调的基因有314个。分析发现,许多差异基因与小鼠生殖功能及胚胎发育等功能密切相关,筛选出与精卵结合、精子发生、精子活力、胚胎发育及生殖细胞发育等生殖功能相关的GO terms 94个。同时KEGG分析发现,许多差异基因参与调控卵母细胞减数分裂、Wnt、MAPK、 P53、Hippo等生殖及胚胎发育功能相关的通路。然后,采用qRT-PCR方法,验证从中筛选的参与细胞凋亡（负调节细胞增殖、细胞凋亡、酮酸代谢过程、代谢过程以及有机酸代谢过程等）功能和生殖调节（精子发生、精卵结合、胚胎发育等）等功能相关GO类和通路中的基因20个（Cxxc4、Fzd1、Sfrp1、Ntrk2、Fgf10、 Kn2、Cpz、Dhrs9、Pla2g4e、Mapk12、Smc3、Lrp6、Cabyr、Pcsk4、Myl2、Pla2g4b、 B23120H23Rik、Rap1a、Pdgfb、Pdgfra）进行了表达检测,qRT-PCR结果表明,各基因的表达趋势与表达谱基因芯片分析结果基本一致。2、AOB影响MEF细胞中ERK和Wnt信号通路的活化程度采用Western blot实验检测AOB处理前后MEF细胞中ERK通路及Wnt信号通路关键蛋白表达量变化,结果发现,磷酸化的ERK和(3-catenin表达量显着上调,说明AOB对两条信号通路具有显着的激活效应。此外,Western blot实验结果显示AOB处理后,生殖相关的蛋白（CABYR, SOX17, P450scc）表达量显着上调。而加入ERK通路和Wnt通路抑制剂后,三种蛋白表达量显着下调,因而推测,AOB通过调控这两条经典通路的激活,影响生殖发育等功能相关蛋白的表达。3、AOB影响mESC分化和mEB的基因表达通过采用ALP染色和Oct4的免疫荧光化学方法鉴定mESC的状态,采用qRT-PCR技术检测处理组和对照组mEB中三胚层标志基因和mES干性标志基因的表达,研究AOB对mEB发育的影响以及预测AOB对胚胎发育的效应。结果表明,50 μg/ml和100μg/ml AOB处理后,其mES干性标志基因Oct4和Nanog的相对表达量较对照组显着增高,推断AOB显着抑制了mESC的分化过程。50μg/ml AOB处理后,mEB原始外胚层基因Gata6表达量显着下调、而Sox7和Pdgfrb表达量则显着上调；外胚层标志基因Nestin和Fgf5表达量显着下调；中胚层标志基因Brachyuary表达量显着下调,而Flk1则显着上调；内胚层标记基因Afp和Sox17表达量显着下调。100 μg/ml的AOB处理后,mEB原始外胚层基因Gata6、Sox7、Pdgfrb表达量显着上调；外胚层标志基因Nestin和Fgf5表达量显着下调；中胚层标志基因Brachyuary表达量显着下调,而Flk1则显着上调；内胚层标记基因Afp和Sox17表达量显着上调。说明AOB显着影响了mESCh和mEB的基因,推测AOB可能影响胚胎的早期发育。表达谱基因芯片分析结果显示,50μg/ml AOB处理后,mEB差异表达基因数明显少于100μg/ml处理组,说明AOB浓度越高,对小鼠生殖功能基因表达的影响越大。根据差异基因GO和KEGG分析的数据,筛选出与小鼠生殖及胚胎发育功能相关的差异基因,并进行qRT-PCR验证,结果与芯片检测结果一致。认为AOB影响小鼠生殖能力及胚胎发育是复杂的过程,可能是通过调控与小鼠生殖及胚胎后期发育、孕酮合成关键酶等功能相关基因表达而实现的。此外,AOB可显着影响生殖发育功能相关的Wnt及MAPK等信号通路的关键调控基因差异表达,影响通路信号传导,从而影响小鼠的生殖及胚胎发育功能。与对照相比,两种浓度AOB处理后的mEB中miRNA-294/295/372/373的靶基因Fgf10, miRNA-449abc/34ab的靶基因Pdgfra表达均显着上调。推测AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能的影响作用也可能与miRNA调控相关。4、AOB影响mEB细胞中ERK和Wnt信号通路的活化程度Western blot实验检测AOB处理前后mEB细胞中ERK通路及Wnt信号通路关键蛋白表达量变化,结果发现,磷酸化的ERK和P-catenin表达量显着上调,说明AOB对两条信号通路具有显着的激活效应。此外,Western blot实验结果显示100μg/ml AOB处理后,生殖相关的蛋白（CABYR, SOX17, P450scc）表达量显着上调。而加入ERK通路和Wnt通路抑制剂后,三种蛋白表达量显着下调,进一步证明,AOB通过调控这两条经典通路的活化,影响生殖发育等功能相关蛋白的表达。5、AOB影响差异表达基因的生物学效应为了进一步探索AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能影响作用机制,生物信息学预测芯片试验中与小鼠生殖及胚胎发育功能相关差异基因在调节信号传导网络中的作用,以及连接这些信号的上下游调控基因节点,进一步探索AOB影响小鼠生殖及胚胎发育功能的机制。通过IPA分析差异基因所导致的下游生物学效应,即疾病和功能分析,结果显示AOB作用后产生的差异表达基因主要在多种肿瘤、神经系统症状、骨骼肌病等相关疾病中富集。信号通路分析发现,差异表达基因主要在MAPK、Wnt、p53和PI3K/AKT等信号途径中富集。总之,通过MEF和mEB细胞模型研究,发现特定浓度的AOB对动物的胚胎发育和胚胎生殖具有明显的毒性作用。也为进一步探索大熊猫生殖力降低的原因和机理提供一种思路。
邓林华,魏荣平,王承东,张贵权,汤纯香,黄治,杨海迪,李德生[6]（2014）在《大熊猫产科疾病》文中提出大熊猫的产科疾病是指雌性大熊猫与生殖相关疾病的总称。在现有文献报道中,以消化系统、呼吸系统疾病最为常见,产科疾病占的比例较低,但随着圈养大熊猫种群不断增加及性别结构的变化（雌性个体增多）,大熊猫产科疾病的发病率有升高的趋势（近几年关于产科疾病的报道有所增加）。产科疾病是大熊猫繁殖障碍的主要原因之一,繁殖障碍又是导致人工圈养小种群衰败的关键因素,所以防治产科疾病尤为重要。1假孕假孕是指雌性大熊猫未受孕而出现类似妊
张杰[7]（2012）在《氟孕酮硅胶栓释放规律及诱导梅花鹿同期发情的研究》文中研究说明本研究检测了不同水平的自制醋酸氟孕酮硅胶栓在模拟体内环境下的醋酸氟孕酮（FGA）的释放规律，选择释放稳定的剂型与CIDR进口栓进行诱导梅花鹿同期发情对比试验，确定同期发情效果，结合B-超监测卵泡变化，血清和粪便中类固醇类生殖激素及非应激环境下粪便中类固醇类生殖激素的测定及相关性分析，探讨孕酮类阴道栓诱导梅花鹿同期发情的有效途径。研究结果如下：（1）自制FGA硅胶栓体外释放规律：用高效液相色谱测其浓度在12d的变化，30、40、50mg组整体呈下降趋势，50mg组释放最为缓慢平稳，三组整体无显着性差异。（2）同期发情效果：自制栓组和CIDR组同期发情率分别为66%、80%，差异不显着（P>0.05）。（3）血清生殖激素的变化：自制栓组E2从埋栓后到发情前总体呈稳定趋势，典型的63号和496号鹿E2峰出现在发情当天。CIDR组E2从埋栓到发情整体呈现上升趋势，其中S4号鹿在埋栓第4d出现一个高峰（113.40pmol/l）之后浓度一直下降，发情时又升高；210号鹿在埋栓后第2d出现E2浓度峰。CIDR组三头鹿血清P4浓度在埋栓后P4浓度急剧上升，在埋栓第2d达到高峰值，然后下降到基础水平。自制栓组496和63号鹿埋栓后都呈现逐渐上升趋势，在埋栓第4d达到最高峰，然后继续下降至基础水平。（4）粪样中生殖激素的变化：自制栓组三头鹿粪中E2浓度变化基本一致。埋栓后呈下降趋势，发情出现前第4d出现E2浓度峰值。CIDR组粪便E2激素出现升高-降低-升高的交替变化；CIDR组三头鹿粪样中P4变化也表现出良好的一致性，和血清中的相似，埋栓后粪中P4浓度急剧上升，第2d达到高峰值然后缓慢下降至基础水平。自制栓组中埋栓后粪中P4都呈上升趋势，第2d达到最高峰。（5）血清和粪样激素的相关性分析：CIDR组血清与粪样P4水平显着相关（P=0.0008），r=0.9766。CIDR组血清与粪样E2水平显着相关（P=0.0093），r=0.9199。自制栓组血清与粪样E2水平显着相关（P=0.0479），r=0.8155。自制栓组血清与粪样P4水平相关不显着（P=0.3628），r=0.4565。（6）卵泡大小变化：CIDR组卵泡都出现了先抑制后增长的现象。典型S4号鹿左侧卵泡先被抑制，在发情前第6d出现增长。自制栓组63号鹿左侧卵泡1直径从4.03cm减小为3.95cm，说明卵泡的生长受到了抑制，后来在发情前4d，出现缓慢增长的趋势。（7）卵泡其与激素的相关性；P4变化与卵泡变化呈现显着的负相关（P=0.0180），r=-0.8849。E2变化与卵泡变化呈现显着的正相关（P=0.0336），r=0.8463。（8）无损伤取样组和麻醉组粪中E2和P4分析结果：无损伤组E2和P4水平分别极显着（P<0.01）和显着（P<0.05）高于麻醉组。
肖彭莹[8]（2012）在《护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性的影响》文中认为目的：探讨中药护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性影响的作用机制,主要观察护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜组织细胞形态、子宫内膜容受性相关标记物表达的影响。方法：第一部分研究背景应用计算机网络技术,进行大量相关文献检索,并对文献进行详细、系统地整理、分析,研究体外受精-胚胎移植（IVF-ET）.控制性促排卵（COH）、子宫内膜容受性影响因素、中西药对子宫内膜容受性的影响及当前该领域的最新进展。大量研究表明中药在辅助治疗IVF-ET过程中具有疗效确切、安全、无耐药性的优势特点,值得进一步深入探索、研究。第二部分护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜组织形态学的影响实验采用SPF级SD大鼠,将大鼠随机分为3组：分别为模型组、中药护卵汤组,同时设正常组做对照。观察阴道脱落细胞涂片,于妊娠第2、5天分别剖腹取子宫、称量并制作标本,进行光、电镜下内膜形态学指标的观察,主要对不同时段各组大鼠的子宫指数、内膜厚度、内膜成熟度、糖原、胞饮突等指标进行观察、检测。第三部分护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性相关因素表达的影响实验采用SPF级SD大鼠,将大鼠随机分为3组：分别为模型组、中药护卵汤组,同时设正常组做对照。于妊娠第2、5天分别取颈静脉血液、断颈后剖腹取子宫,制作标本,应用放射免疫方法、抗体芯片检测方法等对不同时段各组大鼠子宫内膜容受性相关影响因素E2、P、P/E2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、 IL-6、TGF-β1、E-selectin、L-selectin、Leptin、OPN、TIMP-3、ICAM-1等进行检测,观察中药护卵汤对子宫内膜容受性相关因素的影响。结果：第一部分研究背景通过对网络数据库检索与大量文献整理、分析发现,常规IVF-ET的重要环节是COH,长方案在临床COH方案中应用最为普及；但COH药物的应用带来了不可避免的问题,直接、间接地影响了子宫内膜容受性,使妊娠率得不到提高。传统中医认为子宫内膜容受性与肾、气血、冲任密切相关,肾精充盈、气血充足,脏腑、经络、气血相互协调平衡则子宫能容物；现代医学认为子宫内膜容受性受多种激素、因子、酶类等相关因素的调控。导师根据多年临床治疗经验自拟护卵汤,此方以补肾为重、兼顾先后天之本、协调多个脏腑功能、调理冲任、理气调血并用。其药物亦有调控激素、因子等作用,能有效改善子宫内膜容受性,故将护卵汤作为被试因素。第二部分护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜组织形态的影响1.一般情况动物实验过程中,大鼠精神状态可,活动自如,饮食、二便正常,毛发光泽。用药期间无不良反应。2.动情周期模型组于注射丙氨瑞林5d后阴道脱落细胞涂片示动情周期改变消失,注射HMG后周期改变恢复,中药组、正常组未见动情周期消失,呈现各期细胞表现,但中药组周期变化速度减缓,周期延长。3.大鼠子宫指数孕2d、孕5d模型组与中药组、正常组两两比较,子宫指数均有显着统计学意义（P<0.01）；孕2d、孕5d同组间比较,子宫指数亦有显着统计学意义（P<0.01）。4.大鼠子宫内膜厚度及子宫内膜成熟度孕2d及孕5d模型组与中药组、正常组两两比较,大鼠子宫内膜厚度均无统计学意义（P>0.05）；模型组、中药组、正常组同组比较,内膜厚度均有显着统计学意义（P<0.01）。孕2d模型组与中药组、正常组两两相比,大鼠子宫内膜成熟度无统计学意义（P>0.05）；孕5d模型组与中药组比,子宫内膜成熟度有统计学意义（P<0.05）,与正常组比,子宫内膜成熟度有显着统计学意义（P<0.01）,中药组与正常组相比,无统计学意义（P>0.05）。5.光镜下大鼠子宫内膜形态学观察孕2d模型组内膜腺体发育不良,形态不规则,数目不多,腺腔轻度扩张弯曲,间质疏松水肿,血管少；中药组腺体发育,部分形态不规则,数目不多,腺腔稍增大,分泌物稍增多,间质疏松水肿不明显,间质内可见少量血管增生充盈；正常组腺体发育,数目增多不明显,腺腔稍增大,间质疏密相间、细胞多呈梭形,间质内血管少。孕5d模型组腺体数目少,腺上皮细胞增生,腺腔狭窄,弯曲不明显,间质致密,多呈梭形细胞,血管较少；中药组腺体发育明显,数目增多,腺腔明显增大,分泌物明显增多,间质中基质细胞明显增生,间质疏松、水肿,间质细胞多呈圆形,少部分呈梭形,,间质内血管增生；正常组腺体数目多,腺体发育良好,腺腔大,并充盈着丰富的分泌物,间质中基质细胞明显增生,间质疏松、间质细胞多呈圆形,间质内血管明显增生。6.光镜下大鼠子宫内膜上皮细胞糖原观察孕2d、孕5d模型组与中药组、正常组比,大鼠子宫内膜糖原个数有统计学意义（P<0.01）,而中药组与正常组比无统计学意义（P>0.05）。两时段同组间比较,均有统计学意义（P<0.01）。孕2d模型组糖原多于中药组及正常组,而孕5d明显少于中药组及正常组。7.电镜下大鼠子宫内膜胞饮突观察孕2d模型组大鼠子宫内膜表面形态呈不均一性表现,在内膜局部有少量胞饮突表达,形态大小不一,发育不同步,大部分内膜表面被浓密的微绒毛覆盖,无膜状突起,细胞间分界不清；中药组内膜表面形态规整,未见胞饮突表达,上皮细胞分布尚均匀,形态大小相对一致,发育基本同步,其顶端膜被长的微绒毛覆盖,细胞间分界欠清楚,微绒毛相互融合而构成小突起；正常组内膜表面形态较规整,未呈现胞饮突表达,上皮细胞分布均匀,形态大小基本一致,发育同步,其顶端膜被相对稍短的微绒毛覆盖,细胞间分界欠清楚,微绒毛相互融合而构成小突起。孕5d模型组内膜表面形态平整,但不均匀,胞饮突表达完全消失,上皮细胞形态大小不一,分布不均匀,其顶端膜被长短不一的微绒毛覆盖,细胞间界限不清楚,子宫内膜呈分泌晚期变化；中药组内膜表面有大量的膜状突起,胞饮突表达明显,其表面不甚光滑,分布相对均匀,形态大小相对一致,细胞间分界基本清楚,发育基本同步,膜状突起表面覆盖有较短而细的微绒毛；正常组内膜表面有大量胞饮突表达,顶端膜覆盖的微绒毛消失,表面光滑,突起明显,分布均匀,形态大小较一致,发育同步,彼此分界清楚,表现为完全发育的胞饮突。第三部分护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性相关因素表达的影响1.大鼠E2、P、P/E2值的比较孕2d模型组、中药组E2均高于正常组,有显着统计学意义（P<0.01）,模型组与中药组相比,无统计学意义（P>0.05）；孕5d模型组、中药组E2也高于正常组,有统计学意义（P<0.05、P<0.01）,模型组与中药组相比,无统计学意义（P>0.05）。孕2d及孕5d同组间比较,无统计学意义孕2d模型组、中药组P值均高于正常组,有统计学意义（P<0.01）,模型组高于中药组,有统计学意义（P<0.01）；孕5d模型组、中药组均高于正常组,有统计学意义（P<0.05）,模型组低于中药组,有统计学意义（P<0.05）。孕2d及孕5d同组间比较,模型组无统计学意义（P>0.05）,中药组、正常组有统计学意义（P<0.01）。孕2d模型组、中药组P/E2较正常组低,有统计学意义（P<0.01）,模型组较中药组稍高,但无统计学意义（P>0.05）。孕5d中药组、正常组P/E2高于模型组,有统计学意义（P<0.05）,中药组于正常组无统计学意义（P>0.05）。2.大鼠子宫内膜Th1、Th2型细胞因子的蛋白表达孕2d、孕5d模型组IFN-γ、TNF-α均高于正常组,且表达上调均大于1.5倍,而中药组IFN-γ、TNF-α均低于模型组,且表达下调均大于1.5倍；孕2d中药组IL-4、IL-6均高于模型组及正常组,但上调幅度小,模型组有所下调,但下调亦不明显；孕5d模型组IL-4、IL-6均低于中药组及正常组,且表达下调均大于1.5倍,而中药组较模型组表达上调大于1.5倍。模型组Th1/Th2升高,而中药组Th1/Th2降低。3.大鼠子宫内膜容受性相关因素的表达孕2d与正常组比较,模型组TGF-β1、E-selectin、L-selectin及Leptin表达下调,且下调大于1.5倍,OPN、TIMP-3、ICAM-1微下调。与模型组比,中药组TGF-β1、TGF-β3、E-selectin、L-selectin、Leptin、TIMP-3表达均上调大于1.5倍,OPN及ICAM-1微上调；孕5d与正常组比,模型组TGF-β1、 TGF-β3、E-selectin、L-seleetin、Leptin、TIMP-3、ICAM-1表达下调,且下调大于1.5倍,OPN微下调。与模型组比,中药组TGF-β1、TGF-β3、E-selectin、 L-selectin、Leptin、TIMP-3表达均上调大于1.5倍,OPN及ICAM-1微上调。结论：1.通过对中医历代文献及现代医学研究进展的整理、分析、总结发现,子宫内膜容受性差是导致IVF-ET失败、妊娠率低的主要原因。中药可以改善子宫内膜的容受性,提高妊娠率。传统中医认为肾虚、肾精不足是子宫内膜容受性差的主要病机,气虚血弱、冲任不调是协同病机。导师从肾、肝、心、脾论治,时限与脏腑双重定位,注重气血冲任调节,主次分明论治,自拟护卵汤以改善子宫内膜容受性,提高妊娠率。2.GnRHa超促排卵大鼠着床窗口期提前开放和关闭,子宫指数及内膜成熟度低；内膜总体发育不良,腺体与间质发育不同步；内膜糖原含量少；胞饮突提前出现,表达呈现不均一性；E2、P明显增加、P提前升高,P/E2比值失衡；IFN-γ、TNF-α表达上调,IL-4、IL-6表达下调,Th1/Th2比值失衡,子宫内膜容受性标记物TGF-β1、TGF-β3、E-selectin、L-selectin.Leptin. TIMP-3、ICAM-1表达下调,说明COH药物直接和间接地影响了以上因素,降低了子宫内膜容受性,导致了着床的失败,妊娠率降低。3.护卵汤可以延迟GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜着床窗的开放与关闭,提高子宫指数,改善内膜成熟度；促使内膜腺体与间质发育同步,增加内膜糖原含量；改变胞饮突表达的时限,使其呈现均一性；协调E2、P及P/E2比值；下调IFN-γ、TNF-α的表达水平,增强IL-4、IL-6的表达水平,使Th1/Th2细胞因子比值趋于平衡,从整体上调节免疫失衡状态；增强TGF-β1、TGF-β3、 E-selectin、L-selectin.Leptin.TIMP-3的表达,最终达到改善子宫内膜容受性的目的,促进胚胎着床,提高妊娠率4.本研究的创新点在于（1）应用多种实验方法从多方面多层次探讨了中药护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性的影响,为临床辅治IVF-ET提供科学依据,开辟新思路。（2）探讨了护卵汤改善子宫内膜容受性的作用机制,为进一步研制开发中药新药提供实验依据。（3）为中药辅助治疗IVF-ET,更深层次研究中药对子宫内膜容受性的作用机制及环节、适时启动着床的辅治效应与机制、进一步安全、有效、最大限度的提高IVF-ET妊娠率提供了初步思路。5.今后研究思路：完善研究设计,在现有研究基础上通过进一步研究相关细胞因子的信号通路及子宫内膜基因的表达,以期能更深层次地探讨护卵汤的作用机制和作用环节。
卢小琴[9]（2011）在《笼养大鸨繁殖期行为与粪便中性激素水平的研究》文中提出本研究于2010年4月到8月对长春动植物公园健康状况良好的9只大鸨的行为进行观测,同时收集粪便提取激素。采用瞬时扫描取样法对繁殖行为时间分配和活动节律进行研究,利用独立样本T检验分析不同性别大鸨繁殖前后期行为的性别差异,以及相同性别的大鸨在繁殖的不同时期的行为差异。利用放射免疫分析法（RIA）测定笼养大鸨繁殖期粪便中的性激素水平的变化,包括睾酮、孕酮和雌二醇。目的在于通过对笼养大鸨繁殖行为与粪便中性激素变化的关系进行研究,探讨从大鸨粪便中提取和测定性激素的方法及大鸨的繁殖行为与性激素之间可能的变化关系。结果表示,大鸨繁殖期的各种行为活动具有一定的时间分配和日节律,取食行为多发生在上午和下午的中间时段,炫耀、孵化多在早晨和傍晚,而中午的大部分时间处于休息状态。繁殖前期大鸨的行为主要表现为静立、趴卧和游走,雌雄大鸨的这三种行为分别占全部行为的80.63%和66.34%；到繁殖后期,雌鸨各种行为时间分配发生较大变化,90.41%的时间都在坐巢孵卵,而雄性大鸨不参与孵化；雌性的孵化、采食、警戒行为有明显的节律,而雄鸨的静立、趴卧和游走三种行为仍占较大的比例（59.23%）。研究同时表明,大鸨繁殖时期各种行为所占的比例不仅存在着一定的性别差异,而且同一性别个体的各种行为所占的比例在不同的繁殖阶段（繁殖前期和繁殖后期）也有很大变化。繁殖期雄性大鸨粪便中睾酮的平均含量为28.97±21.76 ng/dl,雌性大鸨粪便中孕酮的平均含量为285.92±205.08 ng/ml,雌二醇平均含量为1224.99±620.25pg/ml。繁殖期不同年龄雄性大鸨粪便中睾酮含量存在一定差异,不同年龄雌性大鸨粪便中孕酮含量也存在一定差异。不同年龄雌性大鸨雌二醇含量差异不显着,同一年龄的雌性个体孕酮含量以及雌二醇含量差异均不显着。繁殖期大鸨雌性个体的游走和采食行为发生频次与粪便中孕酮含量显着相关（P<0.05）,雄性个体的游走和理羽行为发生的频次与粪便中睾酮含量显着相关（P<0.05）。其他行为与性激素含量无显着相关。
司丽芳[10]（2010）在《IGF-1、IL-18在妊娠大鼠下丘脑—垂体—性腺轴的表达及IFN-γ对其表达和对妊娠的影响》文中提出正常妊娠时,一些细胞因子通过复杂的神经-内分泌-免疫网络的相互调节作用,在下丘脑-垂体-性腺轴的表达有所变化,这些细胞因子受某些内外界因素的影响表达紊乱时,往往会引发各种妊娠疾病,严重时会造成妊娠终止。目前,调控妊娠的一些细胞因子在有机体的调控特性及其相互作用的机理还不是十分清楚。有资料显示,白细胞介素-18（Interleukin-18, IL-18）、胰岛素样生长因子-1（Insulin-like growth factor 1 ,IGF-1）和γ-干扰素（Interferon-gamma ,IFN-γ）、均参与妊娠调控,但IL-18、IGF-1和IFN-γ在妊娠中的相互调控作用还不太清楚。本研究采用免疫组化SP法对妊娠各期大鼠下丘脑-垂体-性腺轴中IGF-1和IL-18的分布及IFN-γ对IGF-1和IL-18表达的影响进行了研究,并采用图象分析系统对其表达进行了分析。采用荧光定量RT-PCR法分别检测了植入后期大鼠卵巢和子宫中IL-18mRNA和IGF-1mRNA的表达变化及阴道壁注射IFN-γ后对卵巢和子宫中IL-18和IGF-1表达的影响,用ELISA法检测了外周血中IL-18和IGF-1水平的变化,并结合显微及形态分析法进一步研究了不同剂量IFN-γ对妊娠的影响,以期为妊娠早期胚胎丢失机理增添神经生物学研究资料。研究结果如下:1. IGF-1和IL-18在各妊娠期大鼠下丘脑视前室周核、视上核、视前大细胞核、视前内侧核、视前外侧核、视交叉上核、弓状核等21个核团均有表达,分布范围较广;在腺垂体及神经垂体均有表达;在卵巢表达于黄体的粒性黄体细胞、生长卵泡、成熟卵泡;子宫内膜基质细胞、子宫腺上皮细胞、子宫壁平滑肌细胞、血管内皮中也有IGF-1和IL-18阳性产物分布。提示IGF-1和IL-18通过下丘脑-垂体-性腺轴的途径对妊娠发挥着重要的功能。2.IGF-1和IL-18在妊娠大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的表达在妊娠各期存在一定的差异:如IGF-1在下丘脑主要核团胚胎植入前期、植入期、植入后期表达持续升高,妊娠中期表达较低,妊娠晚期表达明显高于妊娠中期,IL-18在下丘脑主要核团胚胎植入前期和植入期的表达不断下降,植入后期表达显着升高。说明两者的表达具有一定的时间程序和空间特性,也有各自的特点。IGF-1在胚胎的植入后期及妊娠晚期表达较多,说明IGF-1可能在胚胎的发育及分娩的启动方面具有重要的时间程序调控作用,同时表现了在下丘脑及垂体水平上参与妊娠的空间调控特性,而在卵巢及子宫的表达则说明,IGF-1能够调节卵泡和黄体的功能,从而影响卵巢中类固醇的生成;并参与了母胎界面的免疫耐受调节。同时IGF-1和IL-18的协同作用也为妊娠的维持创造了有利的免疫微环境。3. IGF-1和IL-18在妊娠各期大鼠的下丘脑变化主要在下丘脑视前室周核、视上核、视前大细胞核、视前内侧核、视前外侧核、视前交叉上核、弓状核等主要核团,说明下丘脑视前区的核团与妊娠调控密切相关。4.妊娠大鼠阴道壁注射不同剂量的IFN-γ后,下丘脑-垂体-性腺轴中IGF-1和IL-18的表达变化各不相同。注射100IU/g体重、500IU/g体重的IFN-γ后,下丘脑视前区视前室周核等核团中IGF-1和IL-18的表达均下调,下丘脑其它核团及垂体、子宫和卵巢中IGF-1和IL-18的表达也有不同程度的变化。在外周血中,妊娠早期的植入后期IGF-1和IL-18的表达水平有不同程度的下调。提示,高剂量的IFN-γ对妊娠期大鼠下丘脑-垂体-性腺轴中IGF-1和IL-18的表达及植入后期大鼠外周血中IGF-1和IL-18的水平均具有调控作用。表明IFN-γ对妊娠的调控是非常复杂和精细的。5.给妊娠早期大鼠注射高剂量的IFN-γ（500IU/g体重）,会造成胚胎丢失和妊娠终止。这可能是IFN-γ不同程度的下调了子宫和卵巢中IGF-1和IL-18的表达及外周血中IGF-1和IL-18的水平而造成的妊娠终止,结果提示,注射高剂量IFN-γ是机体免疫调控紊乱,妊娠失败的原因之一。6.阴道壁注射小剂量（2IU/g体重）的IFN-γ,可上调流产大鼠子宫和卵巢中IL-18mRNA及IL-18蛋白表达的同时还可以上调外周血中IL-18的水平,使其接近正常妊娠组,结果提示外源注射小剂量的IFN-γ可以通过调节机体内一些细胞因子的水平,在维持妊娠中具有重要作用。7.米非司酮致大鼠流产后,其外周血血清中IGF-1和IL-18的水平均有所降低,而注射小剂量的IFN-γ其水平又有所回升,IFN-γ可能是通过调节妊娠大鼠下丘脑-垂体-性腺轴IL-18和IGF-1的水平来抑制流产引发的炎症过程,从而通过免疫途径调控并维持妊娠。提示临床检测妊娠早期大鼠外周血中IL-18和IGF-1的水平对于预防胚胎丢失和流产具有一定的参考价值。8. IFN-γ与IGF-1、IL-18的表达存在密切关系。正常妊娠时,注射高剂量IFN-γ引起IGF-1和IL-18的表达下调,打破了Th1/Th2型细胞因子平衡关系,造成妊娠终止。注射小剂量的IFN-γ则通过下丘脑-垂体-性腺轴的途径及血液反馈途径上调IGF-1和IL-18的表达,影响母胎界面的免疫微环境,调节流产大鼠Th1/Th2型细胞因子平衡,维持妊娠。IFN-γ在预防妊娠早期流产中发挥着重要作用。
二、大熊猫生殖生物学研究:Ⅱ.大熊猫妊娠期尿中孕酮和绒毛膜促性腺激素样物质含量的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大熊猫生殖生物学研究:Ⅱ.大熊猫妊娠期尿中孕酮和绒毛膜促性腺激素样物质含量的变化（论文提纲范文）
（2）雌性秦岭大熊猫尿液中类固醇激素ELISA试剂盒的研发及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写词表 |
| 文献综述 |
| 第一章 大熊猫生殖激素检测研究进展 |
| 1.1 秦岭大熊猫的现状 |
| 1.2 秦岭大熊猫的生殖激素变化 |
| 1.2.1 大熊猫自身的繁殖能力 |
| 1.2.2 雌性大熊猫发情期的激素变化 |
| 1.2.3 大熊猫妊娠期的激素变化 |
| 1.3 生殖激素检测的研究进展 |
| 1.3.1 样品的采集 |
| 1.3.2 大熊猫生殖激素检测方式的发展 |
| 1.3.3 ELISA试剂盒在大熊猫上的应用 |
| 1.4 半抗原与完全抗原 |
| 1.4.1 载体的选择 |
| 1.4.2 半抗原活化物与载体的偶联 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 试验研究 |
| 第二章 完全抗原与多克隆抗体的制备 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器耗材 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 E_2及P_4完全抗原的制备与鉴定 |
| 2.2.2 E_2和P_4完全抗原的鉴定 |
| 2.2.3 试验动物免疫 |
| 2.2.4 抗血清的检测 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 E_2和P_4完全抗原的鉴定 |
| 2.3.2 抗血清的检测 |
| 2.4 试验讨论 |
| 2.4.1 完全抗原的制备与鉴定 |
| 2.4.2 多克隆抗体的制备与检测 |
| 2.5 试验小结 |
| 第三章 大熊猫尿液中E_2和P_4 ELISA检测方法的建立 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 间接竞争ELISA试验基本步骤 |
| 3.2.2 酶标板均一性检测 |
| 3.2.3 ELISA反应条件的筛选 |
| 3.2.4 ELISA标准曲线的绘制 |
| 3.2.5 ELISA试剂盒的性能检测 |
| 3.2.6 ELISA试剂盒临床尿样检测 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 酶标板均一性检测结果 |
| 3.3.2 E_2 ELISA试剂盒反应条件的筛选 |
| 3.3.3 E_2 ELISA试剂盒的性能检测 |
| 3.3.4 P_4 ELISA试剂盒反应条件的筛选 |
| 3.3.5 P_4 ELISA试剂盒的性能检测 |
| 3.3.6 ELISA试剂盒的验证 |
| 3.3.7 ELISA试剂盒的临床检验 |
| 3.4 试验讨论 |
| 3.4.1 E_2和P_4间接竞争ELISA的建立 |
| 3.4.2 ELISA试剂盒的临床检验 |
| 3.5 试验小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）内分泌学分析法在圈养野生动物研究中的应用（论文提纲范文）
| 1 内分泌研究法的应用 |
| 1.1 监测雄性发情能力 |
| 1.2 雌性适时配种时间的判定 |
| 1.3 妊娠诊断 |
| 1.4 性别判定 |
| 1.5 应激测定 |
| 2 样品来源 |
| 2.1 血液 |
| 2.2 非损伤性样品 |
| 2.2.1 尿液 |
| 2.2.2 粪样 |
| 2.2.3 唾液 |
| 3 小结 |
（4）大熊猫食笋季节食物资源竞争（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 动物种间食物资源竞争的发展历史与研究现状 |
| 1.2 动物种间食物资源竞争的形成机制 |
| 1.3 种间食物资源竞争对动物适合度的影响 |
| 1.4 种间食物资源竞争的研究方法 |
| 1.5 竞争性共存 |
| 1.6 大熊猫生态学研究概况 |
| 1.6.1 大熊猫的种群历史与分布现状 |
| 1.6.2 大熊猫对竹子这一食物资源的特化适应 |
| 1.6.3 大熊猫的觅食策略和生活史特征 |
| 1.7 大熊猫与同域物种之间的种间关系研究 |
| 1.8 本文的研究意义及科学问题 |
| 1.8.1 研究意义 |
| 1.8.2 科学问题 |
| 第二章 研究地点概况 |
| 2.1 自然概况 |
| 2.1.1 地质地貌 |
| 2.1.2 水文特征 |
| 2.1.3 气候特征 |
| 2.1.4 土壤、植被 |
| 2.2 生物多样性特征及分布特点 |
| 2.2.1 野生植物多样性概述 |
| 2.2.2 野生动物多样性概述 |
| 2.3 人类社会活动 |
| 2.3.1 社会经济概况 |
| 2.3.2 人类活动对保护区的影响 |
| 第三章 佛坪自然保护区竹子发笋与大熊猫利用情况 |
| 3.1 研究方法 |
| 3.1.1 大熊猫无线电项圈的佩戴 |
| 3.1.2 监测样方的选择及变量设置 |
| 3.1.3 监测方法 |
| 3.1.4 数据分析 |
| 3.2 研究结果 |
| 3.2.1 笋期大熊猫对竹笋的选择利用状况 |
| 3.2.2 笋期大熊猫种间食物资源竞争状况 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 大熊猫对两种主食竹竹笋的选择利用状况 |
| 3.3.2 笋期大熊猫种间食物资源竞争状况 |
| 3.4 研究展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表文章目录 |
| 附图 |
（5）竹叶黄酮对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 黄酮类化合物的应用研究进展 |
| 1.1 黄酮类化合物的抗氧化作用 |
| 1.2 黄酮类化合物的抗癌作用 |
| 1.3 黄酮类化合物抗心血管疾病和抗骨质琉松作用 |
| 1.4 黄酮类化合物的抗炎和抗菌等作用 |
| 1.5 黄酮类化合物雌激素样与抗雌激素样作用 |
| 1.6 雌激素诱发的生殖毒性 |
| 2 竹叶黄酮生理活性及应用 |
| 2.1 竹叶黄酮在疾病预防及治疗医学方面的应用 |
| 2.2 竹叶黄酮作为多功能食品添加剂的应用 |
| 2.3 竹叶黄酮在制备功能食品方面的应用 |
| 2.4 竹叶黄酮在化妆品制备等方面的应用 |
| 2.5 竹叶黄酮在其他领域的应用 |
| 3 小鼠胚胎干细胞在生殖毒理学中的应用 |
| 3.1 胚胎干细胞 |
| 3.2 胚胎干细胞多能性标志检测 |
| 3.3 胚胎干细胞在毒理学中的应用 |
| 4 大熊猫生殖生物学研究 |
| 4.1 大熊猫的濒危性及其机理研究 |
| 4.2 大熊猫的濒危性及其与微生物的共生关系 |
| 4.3 大熊猫在进化中的食物与生殖能力的关系 |
| 5 本课题的研究目的研究内容 |
| 5.1 研究目的 |
| 5.2 研究内容 |
| 第二章 竹叶黄酮对小鼠胚胎成纤维细胞生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 AOB对MEF细胞增殖的影响 |
| 3.2 MEF细胞总RNA样品质量检测 |
| 3.3 AOB对MEF细胞基因表达的影响 |
| 3.4 qRT-PCR实验检测 |
| 3.5 Western blot验证AOB处理前后MAPK和Wnt信号通路的活化程度 |
| 4 讨论 |
| 4.1 不同浓度AOB对MEF细胞增殖的作用 |
| 4.2 AOB对MEF细胞基因表达的影响 |
| 4.3 AOB对MEF细胞中信号通路的活化作用 |
| 5 小结 |
| 第三章 竹叶黄酮对小鼠胚胎干细胞生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 小鼠胚胎干细胞(mESC)形态观察及干性鉴定 |
| 3.2 倒置显微镜下拟胚体(mEBs)的形态观察 |
| 3.3 拟胚体总RNA样品质量检测 |
| 3.4 AOB对mEBs细胞基因表达的影响 |
| 3.5 qRT-PCR鉴定结果 |
| 3.6 AOB对mEB中信号通路的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 AOB对mESC亚全能性调节关键基因表达的影响 |
| 4.2 AOB对mEB三胚层基因表达的影响 |
| 4.3 AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响 |
| 4.4 AOB对mEB细胞中相关蛋白表达的影响 |
| 5 小结 |
| 第四章 AOB处理下小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因的IPA分析 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 差异基因信息注释 |
| 3.2 差异基因Bioprofiler综合信息分析 |
| 3.3 信号通路分析 |
| 3.4 分子相互作用网络 |
| 4 讨论 |
| 4.1 AOB作用下差异表达基因所导致的下游生物学效应 |
| 4.2 AOB作用下差异表达基因富集的信号通路分析 |
| 5 小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 1 总结 |
| 2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1：缩略词一中英文对照 |
| 附录2：主要试剂配方 |
（6）大熊猫产科疾病（论文提纲范文）
| 1 假孕 |
| 2 不育 |
| 3 生殖道疾病 |
| 4 流产 |
| 5 难产 |
| 6 产后大出血 |
| 7 畸胎 |
| 8 乳房炎 |
| 9 预防 |
| 9.1 休情期 |
| 9.2 发情期 |
| 9.3 妊娠期 |
| 9.4 分娩 |
| 9.5 产后期 |
| 9.6 哺乳期 |
| 9.7 干奶期 |
（7）氟孕酮硅胶栓释放规律及诱导梅花鹿同期发情的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 同期发情技术在鹿科动物的应用进展 |
| 1.2 同期发情的技术机理 |
| 1.3 同期发情的主要处理方法 |
| 1.3.1 前列腺素(PG)或类似物处理 |
| 1.3.2 PMSG 处理 |
| 1.3.3 孕酮或类似物处理 |
| 1.3.4 给药方式 |
| 1.4 同期发情存在的问题 |
| 1.4.1 给药方式 |
| 1.4.2 激素剂量 |
| 1.4.3 激素使用时间 |
| 1.4.4 激素使用后配种时间 |
| 1.5 同期发情与体内繁殖激素的关系 |
| 1.6 粪便类固醇激素的研究及其在野生动物研究中的应用 |
| 1.6.1 粪便中类固醇激素的提取方法 |
| 1.6.2 粪便中类固醇激素的测定方法 |
| 1.6.3 粪便中类固醇激素的应用 |
| 1.6.4 可行性、局限性及展望 |
| 1.7 本研究的背景、目的及意义 |
| 第二章 氟孕酮硅胶栓体外释放及现场试验 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 醋酸氟孕酮体外模拟释放规律 |
| 2.2.1 材料与方法 |
| 2.2.2 释放方法 |
| 2.2.3 醋酸氟孕酮含量的测定 |
| 2.2.4 数据分析 |
| 2.2.5 结果 |
| 2.2.6 结果分析 |
| 2.3 现场试验材料 |
| 2.3.1 试验动物 |
| 2.3.2 试验时间及地点 |
| 2.3.3 试验药品 |
| 2.3.4 仪器设备 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 试验鹿的同期发情处理 |
| 2.4.2 试验鹿的发情鉴定 |
| 2.4.3 试验鹿血样收集 |
| 2.4.4 血样的制备与保存 |
| 2.4.5 血清中生殖激素的测定 |
| 2.4.6 血液中 FGA 的测定方法 |
| 2.4.7 液相色谱-质谱连用法(LC-MS)测 FGA |
| 2.4.8 试情及配种 |
| 2.4.9 妊娠诊断 |
| 2.5 试验结果与分析 |
| 2.5.1 试验鹿的同期发情结果 |
| 2.5.2 醋酸氟孕酮的释放规律 |
| 2.5.3 同期发情自制栓组和 CIDR 组血清 E2、P4水平的变化 |
| 2.5.4 同期发情组卵泡发育变化 |
| 第三章 粪便中生殖激素的测定及与血液中激素的相关性分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验用主要仪器设备 |
| 3.1.2 试验主要试剂 |
| 3.2 试验鹿选择 |
| 3.3 试验粪样收集方法 |
| 3.4 取样注意事项 |
| 3.5 试验粪样保存与激素提取 |
| 3.5.1 有机溶剂保存法 |
| 3.5.2 干燥保存法 |
| 3.5.3 冷冻干燥法 |
| 3.5.4 激素提取 |
| 3.6 粪样中激素的测定 |
| 3.6.1 测定仪器设备 |
| 3.6.2 电化学发光试剂盒 |
| 3.6.3 激素的电化学发光测定 |
| 3.7 实验结果 |
| 3.7.1 梅花鹿粪样无麻醉组 E2、P4水平的变化 |
| 3.7.2 梅花鹿粪样中 E2、P4水平的变化 |
| 3.7.2.1 自制栓组和 CIDR 组粪样中 E2变化 |
| 3.7.2.2 自制栓组和 CIDR 组粪样中 P4变化 |
| 3.7.3 血清和粪样中 E2、P4变化的相关性分析 |
| 3.7.4 血清 E2、P4变化和卵泡变化的相关性分析 |
| 3.7.5 无损伤采样组和麻醉组激素水平显着性分析 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 体内外 FGA 释放规律讨论 |
| 4.2 粪样激素与血液中激素的相关性讨论 |
| 4.3 无损伤取样组激素水平分析 |
| 4.4 卵泡发育与内分泌调控的关系 |
| 4.5 小结 |
| 4.6 本研究创新点 |
| 4.7 本领域进一步研究方向 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 研究背景 |
| 1. 控制性促排卵方案的研究进展 |
| 1.1 IVF-ET的研究现状 |
| 1.2 排卵方案的研究进展 |
| 2. 对子宫内膜容受性认识的研究进展 |
| 2.1 现代医学对子宫内膜容受性的认识 |
| 2.2 中医学对子宫内膜容受性的认识 |
| 3. 中西医药物的运用对子宫内膜容受性的影响 |
| 3.1 COH对子宫内膜容受性影响的研究进展 |
| 3.2 中药对子宫内膜容受性影响的研究进展 |
| 4. 导师对COH的认识和中药辅助COH改善子宫内膜容受性的心得 |
| 4.1 中药辅助COH改善子宫内膜容受性研究的背景及原理 |
| 4.2 导师立方论治的理论基础及特点 |
| 4.3 方药组成、特点及其现代药理研究 |
| 第二部分 护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜组织形态的影响技术路线图 |
| 技术路线图 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验条件 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.4 试剂及主要设备 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 具体方法 |
| 2.3 造模评价 |
| 2.4 标本采集 |
| 2.5 标本制备与检测 |
| 3. 统计学处理 |
| 4. 结果与分析 |
| 5. 结论 |
| 第三部分 护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性相关因素表达的影响 |
| 技术路线图 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验条件 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.4 试剂及主要设备 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 具体方法 |
| 2.3 造模评价 |
| 2.4 标本采集 |
| 2.5 标本制备与检测 |
| 3. 统计学处理 |
| 4. 结果与分析 |
| 5. 结论 |
| 第四部分 讨论 |
| 1.COH周期子宫内膜容受性改变的机制探讨 |
| 1.1 COH周期子宫内膜形态学改变与子宫内膜容受性 |
| 1.2 E_2、P、P/E_2的变化与子宫内膜容受性 |
| 1.3 Th1、Th2型细胞因子改变与子宫内膜容受性 |
| 1.4 影响子宫内膜容受性的主要相关因素 |
| 2. 护卵汤对子宫内膜容受性影响的相关研究 |
| 2.1 中医学提高子宫内膜容受性的理论基础 |
| 2.2 护卵汤改善子宫内膜容受性的机制探讨 |
| 2.3 护卵汤组方的理论基础及特点 |
| 2.4 护卵汤的药方分析 |
| 2.5 护卵汤现代药理学研究 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 研究生在读期间发表的论文 |
（9）笼养大鸨繁殖期行为与粪便中性激素水平的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 国内大鸨的研究现状 |
| 1.2.1 人工饲养 |
| 1.2.2 形态特征 |
| 1.2.3 食性 |
| 1.2.4 繁殖生态 |
| 1.2.5 形态解剖及生理生化 |
| 1.2.6 疾病 |
| 1.2.7 遗传 |
| 1.2.8 其他 |
| 1.3 国外大鸨的研究现状 |
| 1.3.1 栖息地现状与种群数量变动 |
| 1.3.2 繁殖生态 |
| 1.3.3 食性 |
| 1.3.4 行为生态 |
| 1.3.5 遗传 |
| 1.3.6 其他 |
| 1.4 类固醇激素 |
| 1.4.1 类固醇激素简介 |
| 1.4.2 鸟类血液中性腺激素与粪便中代谢物之间的关系 |
| 1.4.3 动物粪便和尿液中性激素的研究进展 |
| 1.4.4 粪便样品的取样的优点和缺点 |
| 1.5 研究的意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究时间、地点及对象 |
| 2.2 实验用主要仪器设备及试剂 |
| 2.2.1 主要仪器设备 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 行为观察方法 |
| 2.4 类固醇激素的提取与测定方法 |
| 2.4.1 粪样的采集与保存 |
| 2.4.2 类固醇激素的提取 |
| 2.4.3 放射免疫测定 |
| 2.5 数据统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 笼养大鸨繁殖期行为的分析 |
| 3.1.1 大鸨繁殖前期期行为时间分配 |
| 3.1.2 大鸨繁殖前期日节律 |
| 3.1.3 大鸨繁殖后期期行为时间分配 |
| 3.1.4 大鸨繁殖后期日节律 |
| 3.1.5 大鸨繁殖期行为时间分配 |
| 3.2 笼养大鸨繁殖期行为差异性分析 |
| 3.2.1 繁殖期雌雄行为差异性分析 |
| 3.2.2 雌、雄大鸨繁殖前期和后期各行为差异性分析 |
| 3.3 笼养大鸨性激素水平的分析 |
| 3.3.1 大鸨性激素含量的变化 |
| 3.3.2 不同年龄大鸨睾酮含量的比较 |
| 3.3.3 不同年龄雌性大鸨孕酮含量、雌二醇含量水平的变化 |
| 3.4 笼养大鸨繁殖期行为和性激素水平变化的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 实验方法的讨论 |
| 4.2 实验结果的讨论 |
| 4.2.1 笼养大鸨繁殖期行为 |
| 4.2.2 性激素含量和年龄的关系 |
| 4.2.3 笼养大鸨繁殖期行为与性激素的关系 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（10）IGF-1、IL-18在妊娠大鼠下丘脑—垂体—性腺轴的表达及IFN-γ对其表达和对妊娠的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 母体免疫系统及母胎滋养层细胞 |
| 1.2 母胎界面免疫活性细胞 |
| 1.3 母胎界面的免疫因子 |
| 第二章 IGF-1、IL-18 和IFN-γ特性与妊娠调控 |
| 2.1 IGF-1 特性与妊娠调控 |
| 2.1.1 IGF-1 受体特点 |
| 2.1.2 关于IGF-1 与下丘脑-垂体-性腺轴 |
| 2.1.3 IGF-1 与中枢神经系统 |
| 2.1.4 IGF-1 在免疫和神经内分泌网络中的作用 |
| 2.1.5 IGF-1 对生殖的调控 |
| 2.1.6 IGF-1 在妊娠中的作用 |
| 2.1.7 IGF-1 与胎儿生长受阻 |
| 2.2.IL-18 特性与妊娠调控 |
| 2.2.1 IL-18 的分子特性及信号传导 |
| 2.2.2 IL-18 的产生 |
| 2.2.3 IL-18 的生物学功能 |
| 2.2.4 IL-18 与妊娠及妊娠相关疾病 |
| 2.3. IFN-γ特性与妊娠调控 |
| 2.3.1 IFN-γ受体及作用途径 |
| 2.3.2 IFN-γ的基因调节作用 |
| 2.3.3 IFN-γ介导的信号传导 |
| 2.3.4 IFN-γ对生殖的调节 |
| 2.3.5 IFN-γ对妊娠的调控 |
| 试验研究 |
| 第三章 IGF-1 和IL-18 在妊娠大鼠下丘脑-垂体-性腺轴中的表达 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验仪器和设备 |
| 3.1.2 试验动物及分组 |
| 3.1.3 取材及免疫组织化学SP 法程序 |
| 3.1.4 显微摄影、图像分析及数据处理 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 IL-18、IGF-1 在妊娠不同时期大鼠下丘脑中的定位与表达 |
| 3.2.2 IL-18、IGF-1 在妊娠不同时期大鼠垂体中的定位与表达 |
| 3.2.3 IL-18、IGF-1 在不同妊娠期大鼠卵巢中的定位与表达 |
| 3.2.4 IL-18、IGF-1 在不同妊娠期大鼠子宫中的定位与表达 |
| 3.2.5 IGF-1、IL-18 在妊娠过程中的关系 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 IL-18 在妊娠不同时期大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的表达及意义 |
| 3.3.2 IGF-1 在妊娠不同时期大鼠下丘脑-垂体-性腺轴中的表达及意义 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 IFN-γ对妊娠大鼠下丘脑-垂体-性腺轴IL-18、IGF-1 表达、外周血IL-18、IGF-1水平的影响及对妊娠结局的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 试验设计 |
| 4.1.3 方法 |
| 4.1.4 统计学处理 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 IFN-γ对各试验组大鼠下丘脑中IGF-1 和IL-18 表达的影响 |
| 4.2.2 IFN-γ对各试验组大鼠垂体中IGF-1 和IL-18 表达的影响 |
| 4.2.3 IFN-γ对各试验组大鼠卵巢中IGF-1 和IL-18 表达的影响 |
| 4.2.4 IFN-γ对各试验组大鼠子宫中IGF-1 和IL-18 表达的影响 |
| 4.2.5 荧光定量 RT-PCR 法检测IFN-γ对植入后期各试验组大鼠卵巢和子宫中IGF-1 mRNA 和IL-18 mRNA 表达的影响 |
| 4.2.6 植入后期各试验组大鼠子宫形态学变化 |
| 4.2.7 植入后期各试验组大鼠血清中IL-18 水平的变化 |
| 4.2.8 植入后期各试验组大鼠血清中IGF-1 水平的变化 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 IFN-γ对各试验组大鼠下丘脑-垂体-性腺轴中IGF-1 表达影响的意义 |
| 4.3.2 IFN-γ对各试验组大鼠下丘脑-垂体-性腺轴中IL-18 表达影响的意义 |
| 4.3.3 IFN-γ对植入后期各试验组大鼠卵巢和子宫IGF-1 mRNA 和IL-18 m RNA 表达影响的意义及对外周血IL-18 水平和妊娠结局影响的意义 |
| 第五章 IFN-γ对流产大鼠子宫及卵巢IL-18 表达和外周血IL-18 水平的影响 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验动物 |
| 5.1.2 样本采集 |
| 5.1.3 主要试剂 |
| 5.1.4 总RNA 的提取及RT-PCR |
| 5.1.5 免疫组化SP 法操作程序及结果观察 |
| 5.1.6 ELISA 法检测血清的IL-18 水平 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1.R T-PCR 方法检测IFN-Γ对各试验组大鼠卵巢及子宫中IL-18 MRNA 表达的影响 |
| 5.2.2 IFN-γ对妊娠早期各试验组大鼠卵巢及子宫IL-18 蛋白表达的影响 |
| 5.2.3 IFN-γ对妊娠早期各试验组大鼠外周血中IL-18 水平的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、大熊猫生殖生物学研究:Ⅱ.大熊猫妊娠期尿中孕酮和绒毛膜促性腺激素样物质含量的变化（论文参考文献）
- [1]大熊猫生殖策略与觅食行为的耦合机制：能量-营养-气温关联效应[J]. 周世强. 四川林业科技, 2021(06)
- [2]雌性秦岭大熊猫尿液中类固醇激素ELISA试剂盒的研发及应用[D]. 李婵. 西北农林科技大学, 2019(08)
- [3]内分泌学分析法在圈养野生动物研究中的应用[J]. 卫泽珍,崔媛媛. 野生动物学报, 2017(03)
- [4]大熊猫食笋季节食物资源竞争[D]. 高凯. 贵州师范大学, 2017(02)
- [5]竹叶黄酮对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响[D]. 于冯. 浙江大学, 2016(02)
- [6]大熊猫产科疾病[J]. 邓林华,魏荣平,王承东,张贵权,汤纯香,黄治,杨海迪,李德生. 中国兽医杂志, 2014(11)
- [7]氟孕酮硅胶栓释放规律及诱导梅花鹿同期发情的研究[D]. 张杰. 中国农业科学院, 2012(10)
- [8]护卵汤对GnRHa超促排卵大鼠子宫内膜容受性的影响[D]. 肖彭莹. 湖南中医药大学, 2012(10)
- [9]笼养大鸨繁殖期行为与粪便中性激素水平的研究[D]. 卢小琴. 东北林业大学, 2011(10)
- [10]IGF-1、IL-18在妊娠大鼠下丘脑—垂体—性腺轴的表达及IFN-γ对其表达和对妊娠的影响[D]. 司丽芳. 西北农林科技大学, 2010(07)